Extracción y cuantificación de betacarotenos, clorofila A y B mediante cromatografía líquida (hplc) de la microalga dunaliella (Dunaliella salina) Y de la cianobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii)
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Universidad Estatal de Bolívar, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, Carrera de Agroindustrias
Resumen
Este estudio tuvo como objetivo de extraer y cuantificar el contenido de
betacarotenos, clorofila a y b en la microalga dunaliella (Dunaliella salina) y la
cianobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii), empleando dos métodos de
separación y cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). La investigación
surgió ante la falta de protocolos estandarizados en la Universidad Estatal de
Bolívar para la extracción y análisis de estos pigmentos en dichos organismos, lo
cual limita su aprovechamiento sostenible en aplicaciones biotecnológicas. El
trabajo se enmarcó en el proyecto CEDIA ‘Dietas funcionales basadas en
carotenoides derivados de microalgas para mejorar la productividad y salud de
truchas (Oncorhynchus mykiss) en etapas iniciales’, utilizando muestras
proporcionadas por la Universidad Península de Santa Elena. Adicionalmente, se
evaluó la capacidad antioxidante mediante DPPH y el contenido proteico mediante
DUMAS de ambas especies. Los datos fueron analizados mediante ANOVA
multifactorial y comparación de medias al 95% de confianza respecto a la media.
Los resultados mostraron que la microalga dunaliella (Dunaliella salina) presentó
un mayor contenido proteico (11.25%) en comparación con la cianobacteria
lepto (Leptolyngbya lagerheimii) (9.16%), de la microalga dunaliella (Dunaliella
salina) se obtuvo 130,41 µmol ET/g muestra, mientras que de la cianobacteria lepto
(Leptolyngbya lagerheimii) no se pudo determinar la capacidad antioxidante. El
método de extracción LAP que combina solventes polares y disruptores físicos
demostró ser el más eficaz, al lograr una mayor ruptura de las paredes celulares.
Respecto a los pigmentos, la microalga dunaliella (Dunaliella salina) exhibió
mayores concentraciones de betacarotenos y clorofila b, mientras que la
cianobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii) destacó en clorofila a, hay que
considerar que las cianobacterias no contienen clorofila b. Con base en estos
hallazgos, se desarrolló un suplemento en polvo de betacarotenos en formato
monodosis a partir de la microalga dunaliella (Dunaliella salina).
Descripción
The objective of this study was to extract and quantify the content of beta-carotene,
chlorophyll a, and chlorophyll b in the microalgae dunaliella (Dunaliella salina)
and the cyanobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii), using two separation
methods and high-performance liquid chromatography (HPLC). The research arose
due to the lack of standardized protocols at Bolívar State University for the
extraction and analysis of these pigments in these organisms, which limits their
sustainable use in biotechnological applications. The work was part of the CEDIA
project ‘Functional diets based on carotenoids derived from microalgae to improve
the productivity and health of trout (Oncorhynchus mykiss) in the early stages’,
using samples provided by the University of Santa Elena Peninsula. In addition, the
antioxidant capacity was evaluated using DPPH and the protein content using
DUMAS for both species. The data were analyzed using multifactorial ANOVA
and comparison of means at 95% confidence with respect to the mean. The results
showed that the microalgae dunaliella (Dunaliella salina) had a higher protein
content (11.25%) compared to the cyanobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii)
(9.16%). Dunaliella (Dunaliella salina) had 130.41 µmol ET/g sample, while the
antioxidant capacity of the cyanobacterium lepto (Leptolyngbya lagerheimii) could
not be determined. The LAP extraction method, which combines polar solvents and
physical disruptors, proved to be the most effective, achieving greater cell wall
disruption. With regard to pigments, the microalgae dunaliella (Dunaliella salina)
exhibited higher concentrations of beta-carotene and chlorophyll b, while the
cianobacteria lepto (Leptolyngbya lagerheimii) stood out in chlorophyll a. It should
be noted that cyanobacteria do not contain chlorophyll b. Based on these findings,
a single-dose beta-carotene powder supplement was developed from the microalgae
dunaliella (Dunaliella salina).