UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA TEMA: EVALUACIÓN DE AJO, ORÉGANO Y CHOCHOS COMO ALTERNATIVAS ANTIPARASITARIAS EN COMPARACIÓN CON ALBENDAZOL ADMINISTRADO A PERROS DEL ALBERGUE CANINO MUNICIPAL GUARANDA Proyecto de Investigación, previo a la obtención del título de Médica Veterinaria y Zootecnista, otorgado por la Universidad Estatal de Bolívar a través de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia AUTORA: Lorena Elizabeth Saltos Villalva DIRECTOR: Dr. Washington Rolando Carrasco Mancero MSc. GUARANDA-ECUADOR 2020 “EVALUACIÓN DE AJO, ORÉGANO Y CHOCHOS COMO ALTERNATIVAS ANTIPARASITARIAS EN COMPARACIÓN CON ALBENDAZOL ADMINISTRADO A PERROS DEL ALBERGUE CANINO MUNICIPAL GUARANDA”. REVISADO Y APROBADO POR LOS MIEMBROS DEL TRIBUNAL Dr. Washington Rolando Carrasco Mancero MSc. DIRECTOR DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN Ing. Víctor Danilo Montero Silva Mg. ÁREA DE BIOMETRÍA Dr. Danilo Fabián Yánez Silva MSc. ÁREA DE REDACCIÓN TÉCNICA CERTIFICACIÓN DE AUTORÍA Yo, Saltos Villalva Lorena Elizabeth autora, declaro que el trabajo de investigación aquí descrito es de mi completa autoría; este documento no ha sido previamente presentado para ningún grado o calificación profesional; que las referencias bibliográficas que aquí se incluyen han sido consultadas por el autor (es). La Universidad Estatal de Bolívar, puede hacer uso de los derechos de publicación correspondientes a este documento, según lo establecido por la ley de propiedad intelectual, por su reglamento y por la normativa institucional vigente. ………………………………………………….. Lorena Elizabeth Saltos Villalva CI: 1205860750 ……………………………………………………….. Dr. Washington Rolando Carrasco Mancero MSc. DIRECTOR DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN ……………………………………………………… Ing. Víctor Danilo Montero Silva Mg. ÁREA DE BIOMETRÍA ……………………………………………………… Dr. Danilo Fabián Yánez Silva MSc. ÁREA DE REDACCIÓN TÉCNICA DEDICATORIA “En la vida hay algo peor que el fracaso; el no haber intentado nada” Franklin D. Roosevelt Este logro lo dedico infinitamente a Jehová mi Dios por permitirme despertar cada mañana para continuar en la lucha diaria que es la vida. A mi señor padre Holger Saltos, a mi señora madre Graciela Villalva; a mis hermanos: David y Andrés, quienes desde siempre me han brindado su apoyo incondicional, moral, económico, además de su amor, cariño y comprensión lo que facilito el cumplimiento de esta odisea. A mis abuelos paternos: Hermelinda e Isaías; materno: Héctor; a mis tíos (as): Rodrigo, Rolando, Olga, Olinda que arduamente me motivaron, me aconsejaron, me brindaron su ayuda absoluta, además de su confianza, credibilidad infinita en mí; a Vinicio Cordero, a Zandra Saltos que por hazañas del destino llegaron a mi vida para quedarse presentes en mi pensamiento; a mis amigos y a todos quienes fueron parte del desarrollo de esta travesía. SALTOS L. http://www.frasedehoy.com/autor/47/franklin-d-roosevelt http://www.frasedehoy.com/autor/47/franklin-d-roosevelt AGRADECIMIENTO “Estar preparado es importante; saber esperar lo es aún más, pero aprovechar el momento adecuado es la clave de la vida”. Arthur Schnitzler Deseo expresar mi gratitud inmensa a: Jehová Dios. A la Universidad Estatal de Bolívar, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia, entidad responsable de la formación profesional, ética y humanística que a través de los emblemáticos, abnegados pedagogos a lo largo de esta trayectoria han logrado explotar en gran parte el potencial de cada estudiante, haciéndonos sentir orgullosos de pertenecer a tan noble institución. A mis padres: Holger, Graciela; a mis hermanos: Andrés, David; abuelos, tíos, a Vinicio Cordero y amigos compañeros de la carrera quienes de una u otra manera me han sabido orientar a lo largo de mi vida universitaria infinitas gracias a todos. Agradezco de manera enfática a los señores miembros de mi tribunal: al Dr. Fernando Carrasco quien inicio esta investigación pero debido a razones de fuerza mayor no la culmino, al Dr. Washington Carrasco, al Ing. Danilo Montero, al Dr. Danilo Yánez por el tiempo y dedicación aportada para la culminación de esta investigación. SALTOS L. I ÍNDICE N° Descripción Pág. I. INTRODUCCIÓN...................................................................................... 1 II. PROBLEMA ............................................................................................... 3 III. MARCO TEÓRICO .................................................................................. 4 3.1 Generalidades del perro doméstico ........................................................... 4 3.2 Taxonomía del perro (Canis lupus familiaris) .......................................... 5 3.3 Constantes fisiológicas.............................................................................. 5 3.4 Parasitismo y Parásito ............................................................................... 6 3.4.1 Clasificación de los parásitos .................................................................... 6 3.4.1.1 Protozoarios .............................................................................................. 6 3.4.1.2 Helmintos ................................................................................................ 11  Nematodos (Nematelmintos) .................................................................. 11  Cestodos (Platelmintos) .......................................................................... 22 3.5 Técnicas de Diagnóstico de parásitos gastrointestinales ........................ 26 3.5.1 Examen microscópico ............................................................................. 26 3.5.2 Método de flotación ................................................................................ 26 3.6 Tratamiento convencional ....................................................................... 27 3.6.1 Albendazol .............................................................................................. 27  Descripción ............................................................................................. 27  Farmacodinamia ...................................................................................... 27  Farmacocinética ...................................................................................... 27  Dosis ....................................................................................................... 28  Efectos adversos...................................................................................... 28 3.7 Tratamiento alternativo ........................................................................... 28 3.7.1 Ajo........................................................................................................... 28  Taxonomía .............................................................................................. 29  Composición nutricional ......................................................................... 30  Composición Química ............................................................................ 31  Propiedades terapéuticas del ajo ............................................................. 32  Actividad Antiparasitaria ........................................................................ 32 II  Farmacodinamia ...................................................................................... 33  Farmacocinética ...................................................................................... 33  Dosis ....................................................................................................... 34  Toxicidad ................................................................................................ 34  Efectos secundarios ................................................................................. 35 3.7.2 Chochos................................................................................................... 35  Características botánicas ......................................................................... 35  Clasificación taxonómica ........................................................................ 36  Valor nutritivo ......................................................................................... 36  Dosis ....................................................................................................... 37  Principio activo ....................................................................................... 37  Alcaloides ............................................................................................... 37  Toxicidad ................................................................................................ 38 3.7.3 Orégano ................................................................................................... 38  Características ......................................................................................... 38  Taxonomía .............................................................................................. 39  Propiedades y usos .................................................................................. 39  Dosis ....................................................................................................... 39  Composición Química ............................................................................ 40  Composición nutricional ......................................................................... 40  Efecto antiparasitario .............................................................................. 41 3.8 Preparación de extractos ......................................................................... 41 3.8.1 Extracción por decocción ........................................................................ 41 3.8.2 Extracción por infusión ........................................................................... 42 3.8.3 Maceración .............................................................................................. 42 IV. MARCO METODOLÓGICO................................................................. 43 4.1 Materiales ................................................................................................ 43 4.1.1 Ubicación de la investigación ................................................................. 43 4.1.2 Localización de la investigación ............................................................. 43 4.1.3 Situación geográfica y climática ............................................................. 43 4.1.4 Zona de vida ............................................................................................ 44 III 4.1.5 Material experimental ............................................................................. 44 4.1.6 Material de campo................................................................................... 44 4.1.7 Material de oficina .................................................................................. 45 4.1.8 Materiales de laboratorio ........................................................................ 45 4.2 Métodos................................................................................................... 46 4.2.1 Factores en estudio .................................................................................. 46 4.2.2 Tratamientos ........................................................................................... 46 4.2.3 Tipo de diseño experimental ................................................................... 46 4.2.4 Análisis estadístico funcional ................................................................. 47 4.2.5 Métodos de evaluación y datos a tomarse............................................... 48 4.2.6 Manejo del experimento ......................................................................... 49 V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................. 53 VI. VERIFICACIÓN DE HIPÓTESIS ........................................................ 86 VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ..................................... 87 7.1 Conclusiones ........................................................................................... 87 7.2 Recomendaciones ................................................................................... 88 BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................. 89 IV ÍNDICE DE TABLAS Tabla N° Descripción Pág. 1 Datos sobre la taxonomía del perro doméstico .................................................. 5 2 Datos sobre las constantes fisiológicas .............................................................. 5 3 Clasificación taxonómica del ajo ..................................................................... 29 4 Componentes nutricionales del ajo .................................................................. 30 5 Procesos de obtención de componentes del ajo ............................................... 32 6 Clasificación taxonómica del chocho............................................................... 36 7 Análisis bromatológico del chocho amargo y desamargado ............................ 36 8 Clasificación taxonómica del orégano ............................................................. 39 9 Composición nutricional por cada 100 gr de orégano seco ............................. 40 10 Localización de la Investigación ...................................................................... 43 11 Condiciones Meteorológicas ............................................................................ 43 12 Características del Experimento ....................................................................... 47 13 Esquema de análisis de varianza (ADEVA) .................................................... 47 14 Total de caninos empleados en la investigación .............................................. 53 15 Total de casos según la variable sexo de los caninos ....................................... 54 16 Prevalencia parasitaria según la edad estimada ............................................... 55 17 Resultados de la prueba de tukey para la variable peso ................................... 56 18 Total de casos según el índice corporal estimado ............................................ 58 19 Total de casos según el análisis macroscópico de las heces ............................ 59 20 Parásitos encontrados en los caninos ............................................................... 61 21 Dosis administrada en los caninos ................................................................... 62 22 Grupo control (albendazol) y su prevalencia parasitaria .................................. 64 23 Grupo ajo y su prevalencia parasitaria ............................................................. 67 24 Grupo orégano y su prevalencia parasitaria ..................................................... 69 25 Grupo chocho y su prevalencia parasitaria ...................................................... 71 26 Grupo albendazol frente el grupo ajo. .............................................................. 74 27 Grupo albendazol frente el grupo orégano. ...................................................... 76 28 Grupo albendazol frente el grupo chochos....................................................... 78 29 Carga parasitaria ante y post tratamiento ......................................................... 80 30 Análisis de correlación y regresión .................................................................. 83 V 31 Resultados de la prueba de T Student para la verificación de hipótesis .......... 85 VI ÍNDICE DE FIGURAS Figura N° Descripción Pág. 1. Población general de caninos muestreados. ..................................................... 53 2. Total de casos según el sexo de los caninos. .................................................... 54 3. Prevalencia parasitaria según la edad estimada de los caninos. ....................... 55 4. Variable peso según los resultados de la prueba de Tukey. ............................. 56 5. Total de casos según la variable índice corporal. ............................................. 58 6. Total de casos según la variable análisis macroscópico las heces. .................. 59 7. Parásitos encontrados en los caninos en estudio. ............................................ 61 8. Parásitos gastrointestinales presentes en el grupo control (albendazol) ante y post tratamiento. ..................................................................................................... 65 9. Parásitos gastrointestinales presentes en el grupo ajo ante y post tratamiento.68 10. Parásitos gastrointestinales presentes en el grupo orégano ante y post tratamiento.............................................................................................................. 70 11. Parásitos gastrointestinales presentes en el grupo chocho ante y post tratamiento.............................................................................................................. 72 12. Prevalencia parasitaria ante y post tratamiento del grupo control frente al grupo ajo................................................................................................................. 75 13. Prevalencia parasitaria ante y post tratamiento del grupo control frente al grupo orégano......................................................................................................... 77 14. Prevalencia parasitaria ante y post tratamiento en el grupo control frente al grupo chochos. ....................................................................................................... 79 15. Carga parasitaria ante y post tratamiento al día 7 y 17 de muestreo. .............. 81 16. Adeva para la variable peso .......................................................................... 115 17. Análisis de varianza del muestreo ante-tratamiento...................................... 115 18. Análisis de varianza del muestreo 1 post aplicación de la primera dosis del tratamiento............................................................................................................ 115 19. Análisis de varianza del muestreo 2 post aplicación de la primera dosis del tratamiento............................................................................................................ 115 20. Análisis de varianza del muestreo 1 post aplicación de la segunda dosis del tratamiento............................................................................................................ 116 VII 21. Análisis de varianza del muestreo 2 post aplicación de la segunda dosis del tratamiento............................................................................................................ 116 VIII ÍNDICE DE ANEXOS Anexo N° Descripción 1 2 3 4 5 6 Ubicación de la Investigación Fichas de evaluación Base de datos Fotografías de la fase experimental Visita de campo Analisis de varianza IX RESUMEN El presente estudio evaluación de ajo, orégano y chochos como alternativas antiparasitarias en comparación con albendazol administrado a perros se desarrolló en el albergue canino municipal Guaranda, ubicado en el sector parque industrial en Negroyacu perteneciente a la parroquia Guanujo del cantón Guaranda, dentro del mismo se planteó los siguientes objetivos: determinar la presencia de parásitos gastrointestinales en perros mediante pruebas de laboratorio como la técnica de flotación de Faust, tratar la parasitosis intestinal en caninos mediante alternativas naturales y determinar el mejor desparasitante en caninos, para el cual se aplicó un diseño de bloques completamente al azar, un análisis estadísticos como: adeva, para la separación de medias se utilizó la prueba de tukey al 0,05% de probabilidad, el análisis de correlación y regresión, además para comprobación de hipótesis se usó la prueba de t Student, con el programa estadístico infostat, también se utilizó el programa excel para armar la base de datos, tablas y gráficos. Las variables en estudio fueron: sexo, raza, edad, peso, condición corporal, parásitos gastrointestinales presentes, examen macroscópico de las heces, carga parasitaria ante post tratamiento, luego de analizar los resultados encontrados hemos podido concluir que los tratamientos ajo y orégano presentaron un 100% de prevalencia parasitaria a diferencia del tratamiento chochos que presento 50%, por ende se determinó que el mejor desparasitante resulta ser el albendazol con un 33% de casos positivos a pesar de su característica de solubilidad que limita su acción en caninos, cabe indicar que no se descarta la acción desparasitante de estos elementos botánicos y se recomienda profundizar el estudio de los mismos ya sea en la especie canina o en otras especies. Palabras claves: parásitos gastrointestinales, ajo, orégano, chochos, albendazol, prevalencia, carga parasitaria, caninos. X SUMMARY The present study evaluating garlic, orégano and chochos as antiparasitic alternatives compared to albendazole administered to dogs was developed at the Guaranda municipal shelter located in the industrial park sector in Negroyacu belonging to the Guanujo parish of the Guaranda canton, within the following objectives were proposed: to determine the presence of gastrointestinal parasites in dogs through laboratory tests such as the Faust flotation technique; treat intestinal parasitosis in canines by natural alternatives and determine the best dewormer in canines, for which a completely randomized block design and statistical analyzes were applied such as: adeva, for the separation of means the tukey test was used at 0.05% probability, the correlation and regression analysis, in addition to checking The Student t test was used, with the statistical program infostat the excel program was also used to build the database, tables and graphs. The variables under study were sex, race, age, weight, body condition, gastrointestinal parasites present, macroscopic stool examination, parasitic load before post treatment. After analyzing the results found, we have been able to conclude that garlic and orégano treatments presented a 100% parasitic prevalence unlike the chochos treatment that I present 50% and therefore it was determined that the best dewormer turns out to be albendazole with 33% of cases positive despite its solubility characteristic that limits its action in canines, but it should be noted that the deworming action of these botanical elements is not ruled out and it is recommended deepening their study either in the canine species or in other species. Keywords: gastrointestinal parasites, garlic, orégano, chochos, albendazol, prevalence, parasitary load, caninos. 1 I. INTRODUCCIÓN Los perros se originaron por la elección humana, desde siempre coexistieron en un mismo hábitat la especie Homo sapiens, que somos nosotros y la especie Canis lupus, que son los lobos; el perro doméstico (Canis familiaris) es un animal que ha cohabitado de manera estrecha con el hombre desde hace 12.000 años aproximadamente, este vínculo ha dirigido a la difusión de los perros por todo el mundo y con ellos a especímenes infecciosos capaces de ocasionar enfermedades tanto a los mismos caninos como a los seres humanos (Medina, Rodríguez, & González, 2018). A raíz de esta estrecha relación aparece el parasitismo con etiología de diversa naturaleza bien sea por protozoos parásitos que se encuentran en el tracto digestivo, potencialmente patógenos por su carácter zoonótico como: Giardia, Eimeria spp, Isospora spp., también encontramos cestodos como: Taenias spp., Dipylidium caninum; nematodos como: Trichuris vulpis, Toxocara canis y Ancilostomídeos etc., estos parásitos afectan indistintamente al organismo del huésped, donde se multiplican y se adaptan al medio; los mecanismos de trasmisión tienen relación con sus respectivos ciclos biológicos que a su vez se ven favorecidos por el entorno; factores como situaciones de pobreza imponentes las cuales benefician el arraigo, transmisión de focos endémicos, volviéndose un tema importante dentro de la medicina veterinaria y la salud pública, debido a la alta morbilidad y mortalidad presente en la mayoría de canes y personas a nivel mundial (Alarcón, Juyo, & Larrota, 2015). En el siguiente archivo se detalla la aplicación de una alternativa natural con escaso nivel de procesamiento para la eliminación de parásitos gastrointestinales en perros, basada en las partes de plantas como las hojas del orégano (Origanum vulgare); los frutos como el ajo fresco (Allium sativum) y el chocho seco (Lupinus mutabalis), obtenidos mediante infusión, cocción y maceración. Estas plantas contienen compuestos químicos como el ajoene-alicina-tiosulfato (ajo), además de alcaloides como la esparteína, lupanina, lupanidin (chocho), carvacrol y timol (orégano), que al ser ingeridos o entrar en contacto con el animal y/o ser humano se presume son capaces de actuar sobre determinados procesos 2 morbosos en el organismo además resultan de fácil accesibilidad en nuestro país debido a la diversidad agrícola que posee, el bajo costo y su fácil elaboración. Los objetivos establecidos para esta investigación fueron los siguientes:  Determinar la presencia de parásitos gastrointestinales en perros mediante pruebas de laboratorio.  Tratar la parasitosis intestinal en caninos mediante alternativas naturales.  Determinar el mejor desparasitante en caninos 3 II.PROBLEMA El desconocimiento de las propiedades antiparasitarias presente tanto en el ajo (Allium sativum); en el chocho (Lupinus mutabalis) y el orégano (Origanum vulgare) se evidencian a causa de la falta de educación en salud y bienestar animal, característica propia de personas que erráticamente creen que poseer un estatus económico básicamente es necesario para controlar la salud en caninos, los mismos que desde la antigüedad son cercanos al hombre, por ende no aplican un tratamiento ni convencional mucho menos alternativo o fito-terapéutico; sin pensar que este tipo de acciones conllevan a la aparición de enfermedades graves como el parasitismo ocasionada por diferente etiología debido, a que, el perro es hospedador de muchos parásitos que actualmente se convierten en zoonosis, un problema importante para la salud pública. En la actualidad el uso o aplicación de la medicina alternativa en veterinaria ha sido poco difundida por parte de profesionales de la salud que a pesar de las extensas investigaciones desde tiempos remotos mencionan que la información sigue siendo limitada, lo que genera desconfianza, por ende en nuestro medio, por muchos todavía es considerado como una práctica asociada a nativos ancestrales; provocando el desplazamiento de las plantas medicinales, lo que se traduce, en un desperdicio de las bondades preventivas y curativas de las mismas. Otra causa importante para dejar de lado el uso de la medicina natural o alternativa es la aparición de fármacos convencionales, que a raíz del descubrimiento de la química, han generado un excesivo e inadecuado uso farmacológico por parte de la sociedad en general y se ve reflejado en un aumento de casos de resistencia parasitaria, en la mayoría de especies animales, con una contaminación ambiental grande, incrementando el riesgo sanitario tanto para el ser humano como para el perro, el mismo que se convierte en un portador asintomático diseminador de especímenes infecciosos. 4 III. MARCO TEÓRICO 3.1 Generalidades del perro doméstico Los caninos, son los animales domésticos comúnmente empleados como mascotas, siendo considerados como el mejor amigo del hombre; hasta la actualidad se han desarrollado un sin número de razas, las mismas que mantienen especificaciones tanto en hábitos como caracteres fenotípicos y genotípicos propios de cada raza; su esperanza de vida puede variar, debido a las condiciones de vida a las que sea sometido por lo que se estima es de 8 y 15 años, aunque hay registros de perros que gozando de buena salud vivieron hasta los 29 años. El perro doméstico es una subespecie del lobo, se cree que fue acercándose a convivir en lugares donde existían tribus humanas, ello hizó que se adaptará a la presencia del hombre, dando paso a su domesticación, que de manera evolutiva una población de animales se adaptó al hombre y a su ambiente de confinamiento. Como todo proceso, no tiene comienzo ni final, sino que es algo que está en continua transformación, por ende, muchas especies, no solo el perro, continúan modificando tanto su aspecto físico, como su conducta, hasta su genética esto ocurre de generación en generación como respuesta a la estimulación ambiental y su experiencia de vivir junto al hombre (Koscinczuk, 2017). Los caninos al mantener una estrecha relación con el ser humano, se consagran en una fuente de contaminación y diseminación de diferentes agentes patógenos, como es el caso de los parásitos gastrointestinales zoonóticos, se incluyen géneros como Toxocara spp., Ancylostoma spp., Uncinaria spp., Taenias spp., Dipylidium caninum y protozoarios como Coccidios spp., Giardia spp., etc., que provocan infecciones con sintomatología variada, causando deterioro de la salud y en casos extremos hasta la muerte, pueden ser adquiridos por consumo accidental de estadios larvarios, que contaminan los alimentos, los suelos o el agua (Luzio, Belmar, Troncoso, Luzio, Jara, & Fernández, 2015). 5 3.2 Taxonomía del perro (Canis lupus familiaris) Tabla 1 Datos sobre la taxonomía del perro doméstico Taxonomía Del Perro Doméstico Dominio: Eucarya (Eukaryota) Reino: Animalia Subreino: Eumetazoa Phylum: Craniata Filo: Chordata Subfilo: Vertebrata Subclase: Theria Clase: Mammalia Infraclase: Placentalia Orden: Carnívora Suborden: Caniformia Familia: Canidae Subfamilia: Caninae Género: Canis Especie: Lupus Subespecie: Canis lupus familiaris Fuente: (Equipo Editorial Perros, 2018) 3.3 Constantes fisiológicas Tabla 2 Datos sobre las constantes fisiológicas Constantes Fisiológicas PARÁMETRO VALOR UNIDADES Temperatura 37.5-39 C° Frecuencia cardíaca 70-120 Lpm Frecuencia respiratoria 10-30 Rpm Pulso 60-80 Ppm Micción 2-3 Veces/día Orina/día 0.25/1 L/día Tiempo de llenado capilar 1-2 Segundos Fuente: (Ramírez, Soto, Manjares, Artunduaga, & García, 2015) 6 3.4 Parasitismo y Parásito Se manifiesta como la unión ecológica entre individuos de diferentes especies donde el parásito, penderá, metabólicamente de otro organismo, el hospedador; hasta el momento se han encontrado organismos parásitos obligatorios es decir que para persistir en el medio la condición parasitaria resulta imprescindible para la vida del espécimen parásito y los parásitos facultativos se consideran entes que pueden proseguir libremente, es decir, que bajo condiciones definidas pueden mantener su vida parasitaria. Comprende a todas las criaturas que cohabitan a expensas de otros seres vivos (animal, humano, vegetal) causándoles perjuicio o enfermedad. Dentro del área de la medicina tanto humana como veterinaria, este término se asigna a los organismos protozoos, helmintos y artrópodos que conviven momentáneamente o permanentemente en su hospedador, los mismos pueden presentar elevada morbilidad y mortalidad en casos extremistas (Pabón, 2014). 3.4.1 Clasificación de los parásitos 3.4.1.1 Protozoarios La mayoría de protozoos se caracterizan por ser organismos de vida libre, sólo una cantidad estimada parasitan, causando inestabilidad en su homeostasis, algunas veces pueden comportarse como patógenos primarios, siendo responsables de algunas de las enfermedades más importantes de los seres humanos y los animales domésticos. La multiplicación de determinados protozoarios ocurre cuando un hospedador tiene diarrea, se difunden de un hospedador a otro a través de las heces o fluidos genitales, algunos se transmiten por quistes como la Giardia (Iza, 2016). Giardiasis La giardiasis es una afección originada por un protozoo de importancia zoonósica llamado Giardia intestinalis que se encuentra en el intestino delgado de perros, principalmente en el duodeno y el yeyuno, que genera diarreas, como signo característico de una forma de presentación aguda; sobretodo da problemas en 7 cachorros menores de un año por la fragilidad de su sistema inmune y en sectores como criaderos o perreras municipales; puede presentar posibles cuadros subclínicos, lo que incrementa el peligro de contagio (Vacacela, 2017).  Morfología Trofozoitos: presenta figura piriforme, en la parte anterior exhiben dos núcleos, que se juntan entre sí en el centro, dando aspecto de anteojos, mide aproximadamente 15 micras de longitud por 7 de ancho, consta de una ventosa que ocupa la mitad de la parte anterior de su cuerpo, la cual emplea para afianzarse a la mucosa intestinal, tiene capacidad de traslación con movimiento lento, vibratorio y a la vez rotatorio. Quiste: de forma oval, de 8-12 x 6-9 micras, siendo la dimensión promedio 10 micras de longitud, el parásito se encuentra bordeado por una gruesa cubierta hialina, donde presenta 2-4 núcleos situados en uno de sus polos, en el citoplasma se distinguen los axonemas flagelares, un cuerpo mediano duplicado; estos quistes son una forma proliferativa del parásito, de resistencia frente a las acciones desfavorables del ambiente externo, ya que, al perfeccionar su etapa se duplican y aparece dos nuevos trofozoitos muy bien estructurados, para atravesar la barrera gástrica (Granda & Bueno, 2018).  Ciclo biológico Presentan ciclo directo completo con una duración de 4 a 5 días, el trofozoito se localiza adosado a la mucosa intestinal, donde se fracciona activamente por fisión binaria, es arrastrado a lugares más distales del tracto digestivo a medida que se va desprendiendo; resulta de forma ovalada, es expulsado al medio externo con las materias fecales para ser ingerido por un hospedador nuevo, al llegar al estómago se inicia la exquistación, que se completa en el intestino por la acción de los componentes biliares, el ácido carbónico y las proteasas pancreáticas; de esta forma son liberados, para fijarse a la mucosa, dar inicio de nuevo a su replicación, a pesar de ser destruidos en el estómago, algunos pueden traspasar esta barrera, fijarse en la mucosa y continuar su desarrollo (Rojas, 2018). 8  Patogenia El desarrollo de la enfermedad, ocurre mediante un proceso multifactorial que implica tanto el daño afiliado al parásito mismo como el daño derivado de los procesos inflamatorios exclusivos del hospedero. Este parásito se aloja en el duodeno y yeyuno, presentan manifestaciones de tipo entéricas como una mala digestión producida por la inhibición inducida por trofozoitos, de lipasas, disacaridasas y el trastorno físico de las microvellosidades del glicocálix también se menciona una mala absorción de nutrientes como disacáridos (lactosa, maltosa), vitaminas A, B12, debido al desgaste de las vellosidades, microvellosidades y grasas (Mosquera, 2016).  Manifestaciones clínicas Al transcurrir el periodo de incubación de una a dos semanas; la giardiasis expresa una notable variación en la sintomatología de unos pacientes a otros. El signo más común en los perros sintomáticos es una diarrea esteatorreica, acuosa, mal oliente, esta puede ser aguda, de corta duración, intermitente, crónica, raras veces se distingue mucosidad, otras manifestaciones constan en anorexia, flatulencia, dolor abdominal, vómito, depresión, con la consecuente pérdida de peso, originando modificaciones morfo fisiológicas que dejan secuelas (Vázquez, 2018).  Diagnóstico El diagnóstico que más se practica en la determinación de Gardia en caninos consiste en efectuar un examen coprológico mediante un frotis directo, observando la presencia o ausencia del parásito, su forma quística o su fase trofozoica, también se puede aplicar la técnica de flotación con sulfato de zinc, pruebas antígenas y de PCR (Cabrera & Molina, 2016).  Tratamiento La terapéutica tradicional de la giardiasis, radica en el empleo de los bencimidazoles, metronidazol, albendazol, fenbendazol o el oxfendazol, que han mostrado una marcada eficacia (Zamora, Sosa, Gómez, & Ledea, 2016). 9  Prevención y control Es necesario conservar los lugares secos, desinfectados puesto que los quistes de Giardia spp., no perduran en la desecación, ni en la limpieza, es muy beneficioso el uso de compuestos que inactivan el quiste como amonio cuaternario, vapor y agua hirviendo. Se debe limpiar de forma rápida las heces del área donde el animal se aloja, evitando un contagio al dueño de la mascota y a los demás caninos (Mosquera, 2016). Coccidiosis El término coccidiosis ocurre por agentes pertenecientes a la subclase Eimeria spp., Cryptosporidium spp., Toxoplasma spp., Sarcocystis spp., Neospora spp., Hammondia spp., etc.  Ciclo biológico El ciclo de vida de las eimerias es semejante en todas las especies, con pequeñas diferencias en la duración y presencia de peculiaridades, a continuación, se detallan tres facetas: esporogonia, esquizogonia y gametogonia. Es de ciclo directo y altamente específico para cada especie animal (Chirinos, 2017). Los ooquistes se desarrollan en dos esporocitos (con 4 esporozoitos cada uno) en tiempo específico (1-4 días) en el exterior (esporulan). Es imprescindible que las heces frescas sean examinadas inequivocablemente, para evitar confusiones (sobre todo en pequeñas especies) con el género Sarcocystis, después de la deglución por vía oral de alimento y agua contaminada con ooquistes esporulados; intracelularmente ocurre específicamente en el epitelio intestinal del perro un proceso asexual (esquizogonia) y una reproducción sexual (gametogonia), con la coalición de los gametos machos con los gametos hembras dando lugar a los ooquistes, los mismos que vuelven a ser expulsados con el material fecal posterior a 5–10 días (Márquez, 2014). 10  Signos clínicos Según el nivel de infección presente, el primer signo será la diarrea tornándose de tipo leve o severo, pudiéndose observar sangre, mucosidad en ella, específicamente en casos avanzados, se evidencia pérdida de peso, deshidratación, hemorragias, anorexia, vómitos y por último la muerte (Robelledo, 2016).  Patogenia Los coccidios colonizan a los pocos días de haber ingresado mediante alimentos y agua contaminada con ooquistes a las células epiteliales del intestino, parasitando el citoplasma, debida a esta acción es considerado parásito intracelular, por que destruyen gran cantidad de células a medida que realizan su ciclo biológico. Estos parásitos se sirven de la vía fecal como puerta de salida del hospedador (Ortiz, 2018).  Diagnóstico Ninguna de las manifestaciones clínicas de la coccidiosis es patognomónica, por ende, deben evaluarse colectivamente los resultados de la anamnesis, los datos clínicos, así como los exámenes coprológicos y la necropsia. Es muy importante también realizar un análisis coprológico detallado, establecer un diagnóstico diferencial minucioso, ya que las infecciones moderadas o las infecciones con especies no patógenas pueden inducir coccidiosis subclínica confundiendo el diagnóstico (Davinia, 2015). El diagnóstico de Eimeria spp., se puede realizar por método de flotación (con NaCl, Zinc o azúcar) o a través de la cámara de Mc Master, posibilitando la visualización de los ooquistes. Es muy importante la identificación de las especies presentes en la infestación, evitando así los falsos positivos (Sánchez, 2016).  Tratamiento Las sulfonamidas son el fármaco de predilección para el control de la diarrea administrándose diariamente durante 5–7 días, pero no resulta eficaz para la excreción de ooquistes. La combinación de toltrazuril /emodepsida (9/ 0,45 11 mg/kg, respectivamente) se ha registrado para las coinfecciones de coccidios y helmintos (Márquez, 2014).  Prevención y control Como primera regla general se debe mantener aislado al perro de otros perros evitando la accesibilidad a material contaminado proveniente de posibles canes infectados; mantener la higiene ambiental del lugar donde la mascota habitualmente defeca recogiéndola diariamente; el uso de desinfectantes para la limpieza del suelo donde se encuentra la mascota también contribuye a prevenir la coccidiosis, es de suma importancia realizar esta medida en el caso de tener criaderos o pensionado de animales. El consumir alimentos crudos es otra vía de alto riesgo para las mascotas, siempre y cuando exista cierto grado o se sospeche de contaminación con cualquiera de las fases de este parásito para ello se debe alimentar a perros y gatos sólo con productos balanceados de origen comercial (Farigua, 2020). 3.4.1.2 Helmintos Los helmintos también llamados vermes, son organismos multicelulares, parte de ellos viven libremente y otros se han adaptado a llevar vida parasita tanto en animales, vegetales o el ser humano. Se clasifican en: nematelmintos, platelmintos (Moreta, 2018 ).  Nematodos (Nematelmintos) Son parásitos cilíndricos fusiformes o vermiformes, que más abundan en la tierra, se adaptan a situaciones extremas con un Ph muy bajo y temperaturas súper elevadas; cuentan con tamaño que varía entre los 1mm a 2 mm, tienen una simetría bilateral, aunque algunos poseen simetría intermedia dando una apariencia doble. El cuerpo está formado: por cutícula; epidermis con 4 invaginaciones longitudinales; su musculatura; un pseudocele conocido como espacio perienterico, un canal alimenticio conformado por boca ubicada en la zona anterior y terminal; en la mayoría en el agujero oral se puede encontrar dientes, ganchos, placas u otras modificaciones cuticulares; el esófago también 12 llamada faringe con función de succión o deglución de alimentos, un intestino cilíndrico, un recto que en caso de hembras se conoce como recto y ano; en los machos de recto y cloaca; el sistema nervioso consta de un anillo fibroso ubicado alrededor de la faringe de donde se derivan dos cordones nerviosos; el sistema excretor es muy rudimentario consta de un poro ubicado en la parte terminal del esófago (Benalcázar, 2018). Principales nematodos que afectan a los perros “Dentro del Phylum nematodo, los parásitos de interés que afectan a los caninos son: Ancylostomas spp., Ascáridos spp., Trichuris vulpis., Strongyloides stercoralis” (Tuasa, 2015). Ancylostomas “Son parásitos frecuentes en los carnívoros domésticos, silvestres, accidentalmente en el humano, es un nematodo de la familia Ancylostomatidae, que se localizan en el intestino delgado y se caracteriza por ser hematófago” (Bonilla, 2015). Es un gusano redondo con un cuerpo corto, macizo, que mide de 8 a 20 milímetros (mm) de longitud y de 0,4 a 0,8 mm de diámetro. Los machos suelen ser más cortos, en su parte posterior presentan lóbulos para la cópula y las hembras tienen la cola terminada en punta (Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo, 2014).  Identificación Se distinguen dos subfamilias: Ancylostomatidae y Bunostominae: la primera únicamente parasitá a especies carnívora; la segunda parasitá a especies herbívoras y el grupo omnívoro se ven afectados por ambas. Dentro de la subfamilia Ancylostomatinae se encuentran los géneros: Uncinaria; Ancylostoma que comprende a las especies: Ancylostoma caninum, el cual infecta a perros y cánidos silvestres; Ancylostoma brasiliense, parasitá a perros, gatos y carnívoros silvestres; Uncinaria stenocephala, parasitá cánidos silvestres, perros y gatos (Saldarriaga, 2016). 13  Ciclo biológico Los parásitos maduros de Ancylostoma spp., se encuentran en la mucosa del intestino delgado, elimina sus huevos a través las heces, evolucionan para convertirse en larvas 1 (L1) rabditoides; muda, se convierte en L2 rabditoides y finalmente mudan a larvas filariformes (L3) infectantes, permaneciendo a pocos milímetros de la superficie a ras del suelo (en condiciones óptimas de humedad), (Granda & Bueno, 2018). El ingreso se da al momento que existe contacto con la piel del cuerpo huésped o mediante la ingestión, en el caso que las larvas sean ingeridas, en su mayoría invaden las glándulas gástricas, permaneciendo varios en ellas y posteriormente regresan a la luz intestinal. Si toman la vía percutánea el ingreso se da por los tejidos, mediante la vía sanguínea o linfática llega a los pulmones en donde muda a L4, luego migran por el árbol respiratorio hasta llegar a la faringe para seguir por el tracto digestivo para terminar en su hábitat final, la mucosa del intestino delgado y convertirse en adulto empezando a producir huevos. Algunas larvas penetran hasta llegar al interior del cuerpo iniciando una migración a través de los distintos órganos (larva migrans), en el trascurso de esta migración puede enquistarse en los músculos, grasa u otros tejidos y permanecer en dormancia por un tiempo indeterminado (Bonilla, 2015).  Manifestaciones clínicas Ordinariamente la infestación se puede ser subclínica o asintomática. En el caso de perros y gatos, la anquilostomiasis tiende a causar dolor abdominal, diarrea (pudiendo ser sanguinolenta), encías pálidas (signos de anemia o pérdida de sangre), vómitos, pérdida de peso; llegan a ser mortales en cachorros de perros, al penetrar por la piel dejan a su paso tractos o líneas sobre elevadas y enrojecidas. En casos sintomáticos, se puede observar en el cachorro pérdida del apetito, conjuntivitis purulenta, tos y a veces bronconeumonía. Cuando se llega a la fase de penetración de larvas, se puede presentar prurito intenso, eritema, alopecia; en casos graves se puede observar deshidratación, emaciación, diarrea con sangre, anemia e incluso la muerte (Garaycoa, 2015). 14  Diagnóstico Diagnóstico de laboratorio: el cuadro clínico hace sospechar de ancylostomiasis en las zonas donde el problema es enzoótico, por otra parte, la observación de huevos en las heces, la relación con el cuadro anémico permiten establecerlo, por lo que se aconseja la coprología por método de flotación, determinar el valor de hematocrito, grado de anemia, el estado general. Diagnóstico diferencial: anemia en perros de cualquier edad, anemia aguda o muerte súbita en cachorros, dermatitis, parasitosis que presenten los mismos síntomas como Toxocara spp. (Bonilla, 2015).  Tratamiento El tratamiento más eficaz contra el Ancylostoma son los antihelmínticos de amplio espectro como: los bencimidazoles (albendazol, febantel, fenbendazol); el levamisol; los endectocidas (ivermectina, milbemicina oxima, moxidectina, selamectina) y la emodepsida. En relación a los tetrahidropirimidinas (pirantel, morantel) poseen un espectro menor pero también son eficaces contra estos nematodos; ordinariamente estos preparados no tienen efecto contra las larvas migratorias, razón por la cual es recomendable volver a realizar el tratamiento a las 2 y 4 semanas, pues se piensa que en el trascurso de este tiempo en su mayoría las larvas se vuelven más sensibles al antihelmíntico (Garaycoa, 2015).  Control y Prevención Los estados pre-infestante no son resistentes a la desecación de forma que los terrenos y locales que frecuentan los animales susceptibles deben mantenerse lo más secos posible; las heces deben eliminarse a cortos intervalos; los suelos de las perreras deben mantenerse a tratamiento con sal común o borato sódico 2 kg/10 m², que ayuda a matar las larvas (Azpiazu, 2015). 15 Ascáridos spp. Es un nematodo tubular, de colores tradicionales como blanquecino amarillento o rosado, está cubierto externamente por una membrana, una capa aún más externa llamada epicuticula; el macho, en su estado adulto posee una longitud de 15 a 30 cm, con un diámetro de 2 a 4 mm su extremo posterior está incurvado ventralmente, presenta un par de espículas para dilatar la vulva de la hembra, facilitando la copulación. Posee un aparato reproductor sumamente desarrollado, que ocupa casi 2/3 de la cavidad corporal del parásito, tiene un testículo filiforme que rodea al intestino, un conducto deferente que desemboca en la vesícula seminal de la cual nace el conducto eyaculador que termina en la cloaca donde se hallan las espículas, en la extremidad posterior del parásito. La hembra adulta mide de 25 a 35 cm de longitud con un diámetro de 3 a 6 mm su extremo posterior es cónico, posee un aparato reproductor muy desarrollado que, al igual que en el macho, ocupa casi la totalidad de su cuerpo, consta de 2 ovarios filiformes, que circundan al intestino, 2 oviductos, 2 úteros que se unen y continúan con la vagina que desemboca en la vulva (Proaño, 2015). Toxocariosis La toxocariosis en perros es una infestación parasitaria debido a la presencia y acción de varias especies de nematodos del género Toxocara, la misma, que se caracterizan por disturbios entéricos provocados por el estado adulto. La transmisión se realiza por vía oral mediante ingestión de los huevos, por la leche y por la vía transplacentaria; existe presencia de larva migrans en varios animales y en el hombre (Huamani, 2014). Toxocara canis  Ciclo evolutivo Los huevos de Toxocara se eliminan en la materia fecal; son muy resistentes a los factores ambientales como la temperatura, humedad y aireación. Este parásito 16 permanece en estado latente en el cuerpo del perro y/o gato; las hembras en estado de gestación, invade a los cachorros antes de su nacimiento, cuando un cachorro ingiere los huevos con larvas infectantes, estas emergen en el intestino, atraviesan la pared intestinal, entran en la circulación para llegar al hígado y a los pulmones, allí rompen los capilares, los alveolos, los bronquiolos, bronquios y tráquea hasta la faringe, donde son deglutidos, llegan de nuevo al intestino para ahí terminan de desarrollarse al estadio adulto (Guerra, Pereira, & Pérez, 2017).  Patogenia Las manifestaciones clínicas y patológicas se deben: a la lesión mecánica del tejido durante la migración; a la respuesta inflamatoria del hospedero; al grado de invasión hística; al número de larvas, en un inicio la inflamación alrededor de la larva es mínima, posteriormente hay una reacción granulomatosa inflamatoria eosinofílica intensa, seguida por encapsulación fibrosa de la larva y en ocasiones calcificación. Los órganos afectados con mayor frecuencia son: hígado, pulmones, cerebro, ojos, ganglios, riñones, corazón y bazo, entre otros. El hígado se encuentra aumentado de tamaño y en la biopsia muestra nódulos grises pequeños; en los pulmones existen áreas con exudado inflamatorio y consolidación; en el cerebro las larvas producen tumores de tamaño reducido; las localizaciones oculares son en el segmento posterior, puede producirse endoftalmitis; lesiones granulomatosas que simulan una retinoblastoma; abscesos eosinofílicos, entre otras afecciones; puede llegar a causar opacidad del humor vítreo con desprendimiento de la retina y pérdida total de la visión (Campos , 2015).  Manifestación Clínica Las manifestaciones clínicas pueden ser variables y van a depender de factores como: el número de huevos infectantes ingeridos o transmitidos; cantidad de larvas migrantes, tejido u órgano afectado; frecuencia de reinfecciones y respuesta inmunológica inducida por el hospedero ( Requena, 2015). 17 La infección con unos pocos gusanos en perros adultos no muestran síntoma alguno; en caso de infecciones masivas en el intestino se puede observar: apatía, inapetencia, pelo insurto, debilidad, oclusiones intestinales, obstrucción de las vías biliares, diarrea o estreñimiento, vómitos, sangre en las heces, anemia; estos daños pueden darse también en los cachorros, que a menudo muestran un vientre hinchado; los parásitos adultos pueden obturar y perforar el intestino del cachorro (Aucay, 2015).  Diagnóstico Diagnóstico clínico: tener en consideración la edad; el aspecto físico de los caninos como son: el brillo del pelaje, el grado de dilatación del abdomen, la ocurrencia o no de vómitos después de las comidas y observar la presencia de helmintos en las heces. Diagnóstico en laboratorio: la identificación del agente causal mediante análisis coprológico, se usan las técnica de sedimentación: de Teleman; flotación en soluciones densas; método de Baermann; Si el análisis coprológico es negativo y presenta sintomatología, posiblemente el paciente esté atravesando la fase de pre patencia; exámenes complementarios como rayos X, análisis de sangre y necropsia de los cachorros muertos (Tuasa, 2015).  Control y tratamiento Todos los cachorros deberán ser tratados cuando tengan dos semanas de edad, repetir 2-3 semanas más tarde, para eliminar la infección adquirida vía prenatal, láctea e ingestión. Se recomienda que se trate a la madre al mismo tiempo que a los cachorros. Los cachorros deben recibir una nueva dosis cuando tengan dos meses, para eliminar cualquier infección adquirida por la leche o de un incremento en la producción de huevos fecales; los cachorros recién adquiridos deberán de ser tratados dos veces en un intervalo de 14 días, aunque es probable que haya unos pocos vermes en los perros adultos, a pesar de la migración de la mayoría de las 18 larvas a los tejidos somáticos, el perro adulto deberá ser tratado cada 3-6 meses a lo largo de su vida. Se ha demostrado que las altas dosis de fenbendazol administrado diariamente a la madre desde tres semanas antes del parto hasta dos días después del parto, eliminan la infección lactogénica, prenatal de los cachorros, aunque puede mantenerse una infección residual en los tejidos. Este régimen puede ser útil en los albergues caninos; es necesario eliminar las deyecciones caninas, con limpieza frecuente y a fondo (Contreras, 2017). Trichuris vulpis  Etiología y morfología. Es un nemátodo del orden Enoplida, que se encuentra distribuido en todo el mundo. El cuerpo del adulto tiene forma de látigo, con el extremo anterior muy fino, como un pelo, incrustado en la pared del intestino grueso, un extremo posterior grueso que se encuentra libre en la luz; el huevo tiene forma de limón y contiene una única célula se expulsa con las heces (Peñafiel, 2016). Trichuris (cola capilar) es el género más importante de la familia Trichuridae, subfamilia trichurinae, son gusanos blancos o rosados, de 3 a 7 cm de largo, son fáciles de identificar porque los 2/3 anteriores del cuerpo son filiformes, de ahí el nombre de “gusanos látigos” su parte filiforme incluye la parte cefálica, el esófago con esticosoma, en la parte caudal, mucho más gruesa y enrollada; están el intestino y los órganos reproductores (Franco, 2014).  Ciclo evolutivo El ciclo evolutivo es de tipo directo. Los huevos eliminados con la materia fecal evolucionan en el ambiente en aproximadamente en 1 mes (dependiendo de las condiciones de temperatura y humedad) hasta el estadio de larva infectante que permanece dentro del huevo; la forma infectante (huevo larvado) ingresa por vía oral, eclosiona en el trayecto del intestino, realiza las correspondientes mudas hasta adulto, parasitando la profundidad de la mucosa del ciego y cólon; luego de 19 la cópula comienza la ovoposición. El período prepatente es de alrededor de 2.5-3 meses, la patencia puede durar unos 5 meses (Morales, 2015).  Vías de infestación. “La vía de infestación es la ingestión por vía oral de huevos que contiene larvas; los huevos de Trichuris v., son capaces de sobrevivir en el suelo durante mucho tiempo, por lo que los perros pueden reinfectarse después del tratamiento” (Peñafiel, 2016).  Signos clínicos La trichurosis se manifiesta con sintomatología intestinal, principalmente diarrea de intestino grueso (pastosa, mucosa, etc.), suele ser crónica lo que conlleva a los animales al desmejoramiento progresivo con pérdida de peso y anemia leve a moderada; si bien los hábitos hematofágicos de los adultos son escasos (Morales, 2015).  Patogenia Se aloja en el intestino grueso, en el ciego de perros y caninos salvajes, la infección puede causar pérdida de peso, diarrea profusa que en muchos casos puede ser sanguinolenta (Latorre & Nápoles, 2014). Ocasionalmente la infección se perpetúa en el tiempo debido a la ingesta permanente de formas infectantes desde el medio, los adultos de Trichuris vulpis son difíciles de combatir con una sola dosis de antiparasitario, teniendo en cuenta la dificultad para eliminar los huevos del ambiente. En infecciones graves las larvas pueden llegar a penetrar a través de la pared intestinal, resultando en inflamación, causando adherencias peritoneales, en estas condiciones los animales frecuentemente se lamen la zona en el cual ha ocurrido la adherencia; ocasionalmente en casos severos se puede alterar los electrolitos del potasio y el sodio, causando problemas en el sistema nervioso central, produciendo ataques (Morales, 2015). 20  Diagnóstico El aspecto más importante del diagnóstico es la detección de huevos de T. vulpis de color parduzco, en forma de barril (Peñafiel, 2016). Al ser la eliminación de los huevos de forma intermitente se requieren al menos tres exámenes negativos en un período de tres a seis días para que la infección se descarte; en la necropsia se pueden observar los vermes sobre la mucosa del ciego y colon (Robelledo, 2016).  Prevención Los huevos de Trichuris vulpis resisten mucho las condiciones adversas ambientales, así como a los desinfectantes químicos normales, pero sucumben pronto a la luz directa del sol y la desecación; mantener las medidas higiénicas en las perreras, en zonas de parque, con suelos que permitan la limpieza y desinfección correcta, contribuye al mejor control. Los análisis coprológicos para descubrir los portadores, tratándolos convenientemente completarán la profilaxis (Franco, 2014).  Tratamiento “El éxito del tratamiento se basa en la terapia antihelmíntica adecuada y repetida con fenbendazol en dosis de 50 mg /kg, vía oral, cada 24 horas por 3 días; mebendazol 20 mg /kg, durante 2 días vía oral” (Robelledo, 2016). Strongyloides spp.  Ciclo Biológico y Patogenia El género Strongyloides es el único entre los parásitos de los animales domésticos capaz de alterar generaciones de vida libre y parasitaria. Los machos y hembras rabditiforme de vida libre copulan para producir larvas rabditiformes heterogónicas, que son escasas excepciones, se desarrollan hasta larvas filariformes infectantes, penetra por el tejido celular subcutáneo, ingresa a un capilar venoso, va hasta el pulmón, rompe la pared alveolar, para ascender por los bronquios ayudada por el mecanismo de expulsión de los cilios, al parecer no 21 todas las larvas logran completar el ciclo. Al final de este ciclo se hacen dos mudas y se obtiene la hembra adulta. Con esto se inicia la producción de huevos por medio de partenogénesis. Este ciclo puede durar entre 12 y 28 días; cada hembra adulta produce entre 15 a 50 huevos diarios, los huevos eclosionan rápidamente para dar origen a la larva rabditiforme, por esta razón los huevos no se encuentran en la materia fecal, a no ser que se presenten cuadros diarreicos severos. Por mecanismos no bien comprendidos algunas larvas rabditiformes antes de salir al exterior, pueden mudar a larvas filariformes; inicia entonces un nuevo ciclo en algún sitio del intestino o a través de la piel perianal; las otras larvas que salen al exterior pueden tener dos tipos de desarrollo, de acuerdo con las condiciones de temperatura: el homogónico y el heterogónico; el desarrollo homogónico o ciclo directo, en este ciclo la larva rabditiforme muda dos veces para formar la larva filariforme, permanece en la parte más superficial del suelo en espera del próximo contacto con la piel de un huésped; mientras que en el desarrollo heterogónico o ciclo indirecto, la larva rabditiforme después de cuatro mudas genéticamente determinadas, se diferencia en gusanos de vida libre, machos y hembras, en esta etapa no son parásitos. Por reproducción sexual inician la producción de huevos que eclosionan y forman larvas rabditiformes, que pueden optar por el desarrollo homogónico o heterogónico. Esto le permite al parásito, si las condiciones ambientales son adecuadas, mantener su existencia indefinidamente para preservar la especie (Tuasa, 2015).  Manifestaciones clínicas Puede producir trastornos respiratorios como: tos, disnea, taquipnea, sibilancias, hemoptisis, neumotórax, asma bronquial, bronconeumonía, abscesos y alcalosis respiratoria; a nivel digestivo suele presentarse: dolor abdominal, diarrea acuosa, constipación, anorexia, pérdida de peso, náusea, vómito, sangrado gastrointestinal, malabsorción intestinal, peristalsis, obstrucción intestinal, trastornos electrolíticos, además, se han encontrado casos de colitis seudomembranosa, proctitis y apendicitis (Granda & Bueno, 2018). 22  Diagnóstico “Existen diversos métodos para el diagnóstico de la enfermedad como son: examen directo en fresco; PCR; ELISA; Inmunofuorescencia Indirecta” (Estrella, 2015).  Tratamiento En perros con infecciones experimentales de Strongyloides stercoralis, el tratamiento con ivermectina a la dosis de 0.8 mg/kg no logro eliminar las larvas de los tejidos de los perros. En la actualidad hay tres fármacos para manejar esta parasitosis: el albendazol, el tiabendazol y la ivermectina (Tuasa, 2015).  Cestodos (Platelmintos) Los cestodos son helmintos que en estado adulto tienen un cuerpo aplanado dorsoventralmente, en forma de cinta sin cavidad corporal, ni tubo digestivo y se localiza en el intestino; su tamaño oscila de unos pocos milímetros a varios metros de longitud, sus estadios larvarios se localizan en diferentes tejidos u órganos de los hospedadores intermediarios (Cruz & Muñoz, 2016). Dipylidiosis Dipylidiosis es una enfermedad parasitaria, causada por el gusano plano Dipylidium caninum, cestodo que se aloja en el intestino delgado de los perros, gatos y humanos. El hospedador intermediario de Dipylidium caninum en perros y gatos, suelen ser los ectoparásitos (pulgas o piojos masticadores) por lo que su presencia se asocia a ellos (Miranda, 2018).  Ciclo evolutivo. El ciclo biológico es diheteroxeno. El perro, alberga en su intestino al ejemplar, adulto de este cestodo, que elimina por las heces proglótides grávidas con huevos en su interior, al medio ambiente exterior, estos huevos que ya son infectantes al momento de la postura. Un medio de trasmisión puede ser por larvas de pulgas del perro o del gato, en cuyo interior se desarrollará el estadio larvario: larva 23 cisticercoide de Dipylidium caninum; la pulga adulta contiene la larva cisticercoide que se conservó durante la metamorfosis. El perro cuando ingiere esta pulga, adquiere la parasitosis, desarrollando en su intestino, en unos 10 a 15 días, un ejemplar adulto, cerrando de esta manera el ciclo. En la pulga, el embrión hexacanto desarrolla a cisticercoide, estado larvario que será infectante para los perros y los gatos que lo ingieran accidentalmente. El tiempo de desarrollo está condicionado por la temperatura ambiental y la temperatura corporal del hospedador. La pulga se infecta como larva, sin embargo, hasta que la pulga adulta haya emergido desde su pupa, el embrión hexacanto no desarrolla a un cisticercoide infectante (Chávez, 2015).  Patogenia y manifestaciones clínicas Los efectos traumáticos están ligados a la fijación del escólex en la mucosa intestinal, con un efecto irritativo directo sobre la misma; la lesión es una enteritis crónica, especialmente en duodeno y en el yeyuno; la mucosa aparece engrosada, con una intensa infiltración celular, cubierta en abundante secreción mucosa en la cual pueden observarse los vermes adultos. El síntoma más común en los perros es el prurito anal, consecutivo a la irritación que provoca la salida de los proglótides grávidos a través del ano, causando depilaciones e inflamaciones cutáneas de la zona peri anal y en ocasiones dermatitis crónicas, así como la inflamación de las glándulas anales (Chimborazo, 2014 ). Las infecciones con Dipylidium caninum son benignas, a menudo sin síntomas clínicos, tanto para las mascotas como para los seres humanos. Si el número de tenías aumenta, pueden producir diarrea o estreñimiento, pérdida de peso, inquietud, dolores abdominales y picor anal (Vacacela, 2017).  Diagnóstico Diagnóstico de laboratorio: se realiza mediante un análisis coprológico seriado para la detección de las cápsulas ovigenas (120x200um) también se pueden encontrar los huevos en las heces por técnica de flotación o sedimentación. 24 Diagnóstico post morten: el diagnóstico post morten es sencillo al observar las lesiones intestinales y la presencia de numerosos adultos (Robelledo, 2016).  Control y Tratamiento Esta patología no presenta demasiada gravedad y es fácilmente tratable con antihelmínticos orales como: praziquantel o niclosamida; se debe necesariamente completar el tratamiento con la eliminación de los ectoparásitos del animal, de igual manera, se puede prevenir manteniendo a las mascotas domésticas libres de pulgas; es recomendable la administración de un antiparásito interno de amplio espectro de manera rutinaria (Figueredo & Figueredo, 2014). Taenia spp. La familia Taeniidae está conformada por una variedad de cestodos parásitos de mamíferos domésticos y silvestres, esta familia es el único grupo de cestodos que utilizan dos mamíferos en su ciclo de vida, los estadios adultos parasitan exclusivamente a mamíferos carnívoros. Muchas de la especie de Taenia spp., tienen algunas discrepancias respecto a su nomenclatura, esto debido a la morfología peculiar de sus estadios larvarios o metacestodos (Gómez, 2017).  Ciclo Biológico Los huevos son directamente infectivos tras la excreción, pueden sobrevivir durante meses en el exterior, según las condiciones ambientales; el hospedador intermediario ingiere los huevos con alimento o agua contaminada, en su intestino se liberan las larvas, que atraviesan la pared intestinal, alcanzan el flujo sanguíneo, se dejan llevar por la sangre hasta sus órganos predilectos, donde se desarrollan a cisticercos, permanecer infectivos durante años; producen daños mayores o menores según la especie y el grado de infestación. El hospedador definitivo se contagia a su vez al ingerir carne u otros órganos contaminados de los hospedadores intermediarios infectados. En el intestino se liberan las cabezas (una o más) contenidas en los cisticercos que se desarrollan a adultos, se fijan a la pared intestinal, comienzan a producir segmentos que van madurando y empiezan a poner huevos (Tuasa, 2015). 25  Diagnóstico El diagnóstico ante mortem de estas teniasis se puede realizar por la observación de proglotis en las heces frescas; si se desea identificar de la especie, se debe remitir la muestra en alcohol 70% a un laboratorio de parasitología; debido a que pueden encontrarse huevos mezclados en las heces, se pueden efectuar exámenes coproparasitoscópicos convencionales que emplean técnicas de tanto de flotación Faust y cuantitativas de Mc Master (Romero & Pérez, 2014).  Tratamiento El tratamiento de elección para los cestodos del perro; praziquantel 5 mg /kg tiene un amplio índice terapéutico, es muy eficaz frente a los estadios maduros y adultos. Epsiprantel 5-5,7mg/kg se recomienda su administración cada 45 días en animales con riesgo de adquirir dicho parásito (colectividades con elevada incidencia de endo y ectoparásitos); diclorofeno 0,3 mg/kg para el perro (Robelledo, 2016). Para el tratamiento se recomienda el praziquantel, epsiprantel, niclosamida, nitroscanato y el mebendazol, principalmente (Romero & Pérez, 2014).  Control y prevención Para desarrollar estas estrategias se necesita conocer los factores culturales, socioeconómicos, sanitarios de las personas involucrados en esta zoonosis, así como el ciclo biológico y las características del parásito. Además, no todas las estrategias funcionan en todos los países, ni en todas las regiones de un mismo país, por ello, es importante estudiar la situación de cada lugar, así como sus limitaciones y fortalezas. Existen estrategias que podrían ser efectivas, pero económicamente no viable. Por ejemplo, la implementación de radiación gamma en el camal ha demostrado ser útil a una dosis de 0.3 kg, para inhibir la forma larvaria de la Taenia spp., sin embargo, el costo de la maquinaria y su mantenimiento va más allá de lo disponible por la mayoría de mataderos rurales y urbanos de países en desarrollo (Vargas, 2018). 26 3.5 Técnicas de Diagnóstico de parásitos gastrointestinales “Los parásitos gastrointestinales pueden ser investigados al examinar muestras fecales con las diferentes técnicas, tanto cualitativas como son: frotis directo; sedimentación; flotación, esta última técnica es la más utilizada en la práctica de clínica en animales de compañía y las cuantitativas o Mc Master” (Salinas, 2018). 3.5.1 Examen microscópico Al realizar el estudio de una laminilla con un frotis directo de heces, una flotación, o un extendido de sangre, es conveniente hacerlo a profundidad para obtener un diagnóstico confiable. Una laminilla fecal preparada es tridimensional: tiene largo, ancho y profundidad; los parásitos más pequeños como Giardia o Coccidias pequeñas, se encontrarán en la primera capa; la siguiente capa hacia abajo contendrá los huevos grandes, ooquistes y larvas en caso de estar presente (Azpiazu, 2015). 3.5.2 Método de flotación Este método tiene como fundamento, la flotación de los elementos parasitarios contenidos en las heces mediante una solución saturada con una densidad mayor a la de los parásitos; los huevos son separados del material fecal y concentrado por medio de un fluido de flotación con una gravedad específica apropiada, por lo general los huevos y quistes suelen tener una densidad entre 1.05 y 1.15 y flotan a una temperatura de 20°C. Entre las soluciones de concentración empleadas están: la solución salina saturada; la solución azucarada (Sheather); la solución de sulfato de zinc (Faust), entre otras; las dos primeras soluciones mencionadas son las más utilizadas y tienen una densidad promedio de entre 1.20–1.27; se emplea para observar huevos de cestodos, nematodos y quistes de algunos protozoos, no es adecuado para huevos de trematodos, porque suelen alterar los trofozoitos y/o quistes dificultando su identificación (Freire, 2015). 27 3.6 Tratamiento convencional 3.6.1 Albendazol  Descripción El albendazol es un carbamato benzoimidazólico con efectos antihelmínticos y antiprotozoarios frente a los parásitos tisulares e intestinales; muestra actividad larvicida, ovicida y vermicida, se cree que ejerce el efecto antihelmíntico inhibiendo la polimerización de la tubulina, esto causa disrupción del metabolismo del helminto, incluyendo la disminución de energía, que inmoviliza y después mata el helminto sensible (Reyes, 2017). Es un antihelmíntico de amplio espectro de administración oral, el nombre químico es metil-5-(propiltio)-2-benzimidazol carbamato. Es un polvo blanco a blanquecino, soluble en dimetilsulfóxido, ácidos fuertes y bases fuertes, ligeramente soluble en metanol, cloroformo, acetato de etilo y acetonitrilo, es prácticamente insoluble en agua (Freire, 2015).  Farmacodinamia El mecanismo de acción antihelmíntica del albendazol es principalmente intra- intestinal; se resalta que, a dosis mayores de albendazol, la absorción y metabolismo se completa al obtener el metabolito sulfóxido activo, lo que demuestra sus efectos terapéuticos contra parásitos tisulares, además se cree que actúa inhibiendo de la polimerización de la tubulina desencadenando una cascada de variaciones metabólicas, incluyen depresión de energía, la cual inmoviliza y luego mata a los helmintos susceptibles (Coburger , 2017).  Farmacocinética El albendazol es poco absorbido desde el tracto gastrointestinal debido a su baja solubilidad acuosa, las concentraciones son mínimas o no detectables en el plasma a medida que se convierte rápidamente en el metabolito sulfóxido antes de alcanzar la circulación sistémica. La actividad antihelmíntica sistémica se ha atribuido al principal metabolito del albendazol que es el sulfóxido. 28 La biodisponibilidad oral parece aumentar cuando albendazol se administra junto con una comida rica en grasas por su mayor concentración plasmática de sulfóxido de albendazol en comparación con el estado de ayuno; es metabolizado con rapidez en el hígado; su semivida plasmática es de 8,5 horas y se une un 70% a proteínas plasmáticas; se elimina principalmente por la bilis y una pequeña cantidad aparece excretada en la orina (Anchayhua, 2016).  Dosis “En caninos se debe administrar cada 12 horas en dosis de 25 mg/kg de peso vivo por vía oral” (Hurtado, 2018).  Efectos adversos a) El albendazol puede tener efector teratogénicos, sobre todo en bovinos y ovinos. b) En perras preñadas, el tratamiento con albendazol puede provocar una reducción del peso de las crías al parto y palatoquisis (paladar hendido). c) En aves el tratamiento con albendazol puede disminuir el rendimiento ponedor y el porcentaje de eclosión de los huevos. d) No debe administrarse a animales con problemas hepáticos, ni a hembras preñadas (Coburger, 2017). 3.7 Tratamiento alternativo 3.7.1 Ajo El ajo es una planta de nombre científico Allium sativum, el término Allium procede de la palabra All, que significa “ardiente o caliente” mientras que el nombre “sativum” procede del latín que significa “cultivado”. Tiene origen en Asia Central, desde este punto, a través de Asia Menor y Egipto; se difundió por toda Europa, de donde pasó a África y luego del descubrimiento a América (González, Guerra, Maza, & Cruz, 2014). El género Allium contiene más de 300 especies de plantas; entre ellas se encuentra Allium sativum (ajo); el bulbo del ajo está compuesto por varios bulbillos, 29 denominados dientes, unidos a una base; el número de dientes en un bulbo no es igual para las diferentes variedades; los organismos de normalización han establecido dos grandes grupos de ajo: comunes y comerciales como: rosado, violeta, morados, blancos, colorados, castaños, cabe recalcar que las variedades "rojas o coloradas" son de sabor más fuerte, también existen ajos de sabores muy suaves (castaño), grades (unión), blancos (perla) y pigmentadas (morado) (Ramírez, Castro, & Martínez, 2016).  Taxonomía Tabla 3 Clasificación taxonómica del ajo Taxonomía del ajo Dominio : Eukarya Reino : Plantae División : Magnoliophyta Clase : Liliopsida Orden : Asparagales Familia : Amaryllidaceae Subfamilia : Allioideae Tribu : Allieae Género : Allium Especie : Allium Sativum Nombre Científico: Allium Sativum Nombre Común : Ajo, Ajos Fuente: (Ñahuincopa, 2017) 30  Composición nutricional Tabla 4 Componentes nutricionales del ajo Composición nutricional del ajo COMPOSICIÓN UNIDADES CANTIDAD Agua G 58.58 Energía Kcal 159 Proteína G 6.36 Lípidos totales G 0.5 Carbohidratos (por diferencia) G 33.06 Fibra total dietética G 2.1 LÍPIDOS Ácidos grasos saturados G 0.069 Ácidos grasos insaturados G 0.011 Ácidos grasos poli-insaturados G 0.249 Colesterol Mg 0 VITAMINAS Vitamina C Mg 31.2 Tiamina Mg 0.2 Rivoflavina Mg 0.11 Niacina Mg 0.7 Vitamina B6 Mg 1.235 Folato Ug 3 Vitamina A Ul 9 Vitamina E Mg 0.08 Vitamina K Ug 1.7 MINERALES Calcio Mg 181 Hierro Mg 1.7 Magnesio Mg 25 Fosforo Mg 153 Potasio Mg 401 Sodio Mg 17 Zinc Mg 116 Fuente: (Garzón, 2018) 31  Composición Química En el ajo se encuentran hormonas que actúan de manera similar a las hormonas sexuales masculinas y femeninas; fermentos: colina, yodo, ácido hidrorodánico, además se han aislado hasta 17 aminoácidos entre los cuales se encuentran: ácido aspártico, asparagina, alanina, arginina, histidina, metionina, fenilalanina, leucina, serina, treonina, prolina, triptófano y valina (Ramírez, Martínez, & Castro, 2016). Los compuestos sulfurados (azufrados) son solubles en agua, representados en el ajo fresco por la aliína (sulfóxido de S-alil-cisteína), como el principal sustrato para la enzima alinasa (activa a pH 4-5,8), que una vez liberada de su comportamiento intracelular por daño o lisis (corte o molturación del bulbo de ajo), transforma a la aliína en alicina (dialiltiosulfonato). La alicina es un compuesto inestable, incoloro, siendo el responsable del olor característico del ajo y el principal componente de los extractos acuosos, posee una vida media a temperatura ambiente de 2,4 días, descomponiéndose rápidamente, dando lugar a la formación de mono-di-y trisulfuros, así como de otros derivados azufrados como el ajoeno (Panchi, 2016). La aliícina es un sulfóxido alifático básico de peso molecular 177 es cristal, blanco, inodoro, soluble en agua y metanol, insoluble en etanol absoluto; el ajoene es un potente inhibidor del metabolismo del araquidonato, particularmente por inhibición de la prostaglandinsintetasa y 5-lipoxigenasa. Es un aceite incoloro, inodoro, de peso molecular 234 (Palala, 2015). 32  Según el proceso al que sean sometidos los bulbos del ajo, obtendremos diferentes componentes naturales, siendo los siguientes: Tabla 5 Procesos de obtención de componentes del ajo Procesos de obtención de componentes del ajo PROCESO COMPONENTE Molturación Alicina Decocción Ajoeno-Sulfuro de alilo Destilado (aceite) DADS y DATS Extracción acuosa Alicina Extracción alcohólica Ajoeno Extracción hidroalcohólica de ajo envejecido SAC y SAMC DADS: Disulfuro de dialilo, DATS: trisulfuro de dialilo, SAC: S-alil- cisteína, SAMC: S-alil-mercapto-cisteína. Fuente: (Panchi, 2016)  Propiedades terapéuticas del ajo Estudios antimicrobianos demuestran actividad desde tiempos de Pasteur: antibacteriana (bactericida y bacteriostático; gram positivo y gram negativo); antiviral (herpes, influenza B, parainfluenza, estomatitis vesicular); antifúngica (C. albicans y dermatofitos); antiprotozoaria (E. histolytica, T. vaginalis); antihelmíntica; antiséptica; antihepatotóxica; diurética; fibrinolítica; espasmolítica; fortalece el sistema inmunológico; el ajo disminuye notablemente la absorción del colesterol por el organismo; es un hipotensor suave, fluidifica la sangre, actúa como antiagregante plaquetario y fibrinógeno, es por lo tanto un antitrombótico; tiene efecto hipoglucemiante, normaliza los niveles de glucosa en sangre, tiene efecto antioxidante; el ajo tiene propiedades antitumorales por lo que su consumo habitual previene el desarrollo de determinados canceres (Marca, 2018), (Panchi, 2016).  Actividad Antiparasitaria Se usa el bulbo, sobre todo para tratar las lombrices intestinales, en menor medida otros helmintos (ascaris, tenias, tricocéfalos). El ajo por su contenido alto de 33 alicina describe tener propiedades antiparasitarias que inhiben el metabolismo de crecimiento hasta en un 50% (Baiza, 2014). En lo referente a la actividad antiparasitaria, la literatura revisada se centra principalmente en parásitos protozoos como: African Trypanosomiasis, Amebiasis Giardia y Acanthamoeba trophozoites; en varios estudios se afirma su acción sobre Opalina ranarum, O. dimidicita, Balantidium entozoon, Entamoeba histolytica, Trypanosomes, Leishmania, Leptomonas y Crithidia, además se presume posee efecto inhibitorio de la alicina en el crecimiento de Babesia y Theileria equi.; otros autores reportan que el aceite de ajo es efectivo contra Boophilus annulatus (Garrapata); debido a estos resultados alentadores, se desarrolló un ensayo clínico en pacientes con giardiasis donde se estableció como un antigiardiásico, debido a la eliminación de los síntomas de todos los pacientes durante las 24 horas posteriores al tratamiento y la supresión total de cualquier indicio de giardiasis en las heces, dentro de las siguientes 72 horas (Corrales & Reyes, 2014), (Sánchez , Rojas, & Agüero, 2016).  Farmacodinamia El ajo inhibe la síntesis del colesterol, actuando sobre el grupo sulfhidrilo del acetil CoASH; la alicina y sus productos de transformación son capaces de: inhibir un gran número de enzimas sulfhidrilos que contienen cisteína en sus lugares activos; también posee actividad antirradicalaria, lo cual permite contrarrestar el proceso oxidativo de las LDL, relacionado con la aterogénesis y la formación de trombos. Las fructosanas producen una acción diurética. Otro de los principales productos de transformación metabólica es la S-alilcisteína (SAC), que al administrarse oralmente en: ratas; ratones; perros es rápidamente absorbido en el tracto gastrointestinal y se distribuido principalmente en el plasma, hígado y riñones (Palala, 2015).  Farmacocinética Los estudios sobre animales de experimentación, según los cuales la aliína, principal componente del bulbo de ajo íntegro, alcanza la máxima concentración en sangre a los 10 minutos de su administración, mientras que en el caso de la 34 alicina el pico máximo se observa entre los 30-60 minutos; la principal vía de eliminación es la renal; la S-alil-cisteína (SAC), administrada por vía oral a distintos animales de experimentación (ratones, ratas y perros), es rápidamente absorbida, con una alta biodisponibilidad al igual que los derivados liposolubles, se elimina fundamentalmente por vía renal en forma de derivados acetilados (Álvarez, 2014).  Dosis El equivalente a 6-10 mg de aliína (aproximadamente 3-5 mg de alicina) al día, estas cantidades son las contenidas habitualmente en un diente de ajo o en 0.5-1g de ajo desecado o procesado; en cuanto a los preparados elaborados con polvo de ajo desecado, las dosis aconsejadas son de 25-300 mg de dicho polvo (normalizado bien en aliína (1.3%), bien en alicina (0.6%), 2-3 veces al día; en el caso del extracto de ajo, la dosificación recomendada es de 7.2 g/día, dosis empleada en la mayoría de ensayos clínicos realizados con este preparado (Baiza, 2014).  Toxicidad La seguridad con el uso prolongado de extractos de ajo no ha sido claramente determinada, en términos generales, el consumo de ajo es considerado como seguro. Una dosis única de 25 ml de extractos de ajo fresco ha causado: ardor en el esófago, estómago, náusea, vómito, diarrea, olor fuertemente característico de este vegetal en el aliento y piel. Exposiciones repetidas a polvos pueden causar reacciones asmáticas; altas concentraciones usadas externamente pueden causar necrosis, alergias; a pesar del amplio uso del bulbo de ajo y sus preparados, tan solo se han descrito tres casos en los cuales se observó un alargamiento del tiempo de sangrado; Otros efectos adversos asociados con el ajo son disminución de proteínas séricas, calcio, anemia, asma y dermatitis (Panchi, 2016), (López, 2017). El ajo contiene N-propil disulfuro, los sulfóxidos S-metilcisteína y S- propenilcisteína que oxidan la hemoglobina de los eritrocitos, provocando que el 35 hierro del grupo hemo pase de Fe2+ (ferroso) a Fe3+ (férrico), en este estado se denomina metahemoglobina y da como resultado los característicos cuerpos de heinz, que son inclusiones intracelulares de hemoglobina desnaturalizada en el eritrocito (Sánchez, 2015).  Efectos secundarios En ensayos realizados sobre animales de experimentación se ha puesto de manifiesto que la administración de dosis equivalentes a 0.5 g de bulbo de ajo/kg de peso corporal/día da lugar a alteraciones hepáticas tras 28 días de tratamiento; a dosis inferiores (0.1g y 0.25 g/kg/día) no se han observado modificaciones en la glándula hepática, salivación, irritación a nivel de boca, disminución en los valores de hematocrito y viscosidad plasmática. En la investigación realizada en perros al administrar 1.25 ml/kg de extracto de ajo una vez al día por 7 días, se encontró un descenso comparado con los valores iniciales de conteo de concentración de glóbulos rojos, hematocrito y hemoglobina en un valor mínimo; se encontró en aumento cuerpos de heinz y eccentrocitos, sin embargo, ningún perro desarrollo anemia hemolítica (Baiza, 2014). “El consumo de ajo es considerado como seguro, sin embargo, el consumo excesivo de sus derivados, pueden ocasionar efectos indeseables como: diarrea, irritación de las mucosas, sensación de ardor y molestias digestivas” (Panchi, 2016). 3.7.2 Chochos  Características botánicas El tarwi, chocho o lupino es una leguminosa originaria de los Andes de Bolivia, Ecuador y el Perú; tiene relevancia en la gastronomía de esos países desde la época prehispánica, el alto contenido de proteínas, mayor que el de la soja, lo hacen una planta de interés para la nutrición humana y animal. Es una leguminosa herbácea erecta de tallos robustos, algo leñosa, alcanza una altura de 0.8-2.0 m, se cultiva principalmente entre los 2000 y 3800 m de altitud, en climas templados y fríos (Yánez, 2015). 36  Clasificación taxonómica Tabla 6 Clasificación taxonómica del chocho Taxonomía del chocho Reino: Plantae Clase: Magnoliopsida Orden: Fabales Familia: Fabaceae Subfamilia: Faboideae Género: Lupinus Especie: Lupinus mutabilis Nombre binominal Lupinus mutabilis Sweet Fuente: (Yánez, 2015)  Valor nutritivo Tabla 7 Análisis bromatológico del chocho amargo y desamargado Análisis bromatológico del chocho amargo y desamargado COMPONENTES CHOCHO AMARGO CHOCHO DES AMARGADO Proteína (%) 47.80 54.05 Grasa (%) 18.90 21.22 Fibra (%) 11.07 10.37 Cenizas (%) 4.52 2.54 Humedad (%) 10.13 77.05 Alcaloides (%) 3.26 0.03 Azucares totales (%) 1.95 0.73 Azucares reductores (%) 0.42 0.61 Almidón total (%) 4.34 2.88 K (%) 1.22 0.02 Mg (%) 0.24 0.07 Ca (%) 0.12 0.48 P 0.60 0.43 Fe 78.45 74.25 Zn (ppm) 42.84 63.21 Mn (ppm) 36.72 18.47 Cu (ppm) 12.65 7.99 Fuente: (Méndez, Minchala, & Sánchez, 2014) 37  Dosis “En varios artículos de revisión sobre el contenido de alcaloides quinolizidínicos en proteínas aisladas, para determinar la concentración permitida de dichos alcaloides para consumo humano; se considera la dosis terapéutica 200-400 mg/día y la dosis tóxica mayor a 25 mg/kg/día” (Saltos, 2014).  Principio activo Los componentes que intervienen en la actividad antiparasitaria del chocho son los alcaloides los mismos que toman este nombre debido a la presencia de nitrógeno básico formando por lo general núcleos heterocíclicos, entre estos: la lupanina (C15H24N2O) en un 46% y la esparteína (C15H26N2) en un 14%. Estos en forma libre son insolubles en agua, poco solubles en alcohol; solubles en éter y cloroformo; la mayoría posee oxígeno en su estructura y son sólidos no volátiles, a excepción de la esparteína, siendo líquida a temperatura ambiente (Yánez, 2015). “Los alcaloides (esparteína, lupinina, lupanidin, etc.) se emplean para control de ectoparásitos, parásitos intestinales de los animales” (Yucailla, 2013).  Alcaloides “En diversos estudios mediante procesos químicos analíticos se ha definido claramente que la semilla de Lupinus tiene una gran cantidad de alcaloides quinolizidínicos que varía de 0,02 a 4,45%; dichos alcaloides reportados son: la lupanina, esparteína, isolupanina, entre otros componentes secundarios como esteroides y saponinas” (Saltos, 2014). Las plantas del género Lupinus concentran hasta 6% de alcaloides en sus hojas, tallos y semillas, como una estrategia de defensa contra plagas y herbívoros, la mayoría de los Lupinus contienen alcaloides derivados de aminoácidos alifáticos del tipo quinolizidínicos, que también han sido encontrados en anfibios, plantas de mar y hongos terrestres (Chiguachi, 2017). 38  Toxicidad Los síntomas de intoxicación son: midriasis, calambres, cianosis, dolor abdominal, vómito. Los alcaloides quinolizidínicos como la lupanina es más activa y su acción farmacológica es inmediata en comparación con la esparteína; esto demuestra que dichos alcaloides puros o en forma de sales administrados en dosis altas actúan como tóxicos, pero cuando se administran en dosis moderadas actúan como medicamento (Saltos, 2014). 3.7.3 Orégano  Características El nombre botánico del orégano es Origanum vulgare en termino griego, alude “esplendor de la montaña”, originaria de Europa Central, Meridional y Asia Central, siendo usado por los griegos como un aperitivo, muy útil como desinfectante de las herida; en la antigua roma es considerada como una planta de felicidad y paz que resulta ser un vegetal introducido por los españoles al país (Ordóñez, Del Carpio, & Cayo, 2018). Es una pequeña planta de 45cm de altura, a menudo los tallos tienen una coloración rojiza, se ramifican en la zona alta, tienden a desojarse en las partes más inferiores. Las hojas surgen opuestas, ovales, anchas, con bordes enteros ligeramente dentados, con vellosidades en el haz, posee unas pequeñas glándulas donde está contenida la esencia aromática (Mosquera, 2016). 39  Taxonomía Tabla 8 Clasificación taxonómica del orégano Taxonomía del orégano Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: Lamiales Familia: Lamiaceae Subfamilia: Nepetoideae Tribu: Mentheae Género: Origanum Fuente: (Loeza, y otros, 2020)  Propiedades y usos Es un antioxidante; antimicrobiano; antimutagénico; antiparasitario; tiene capacidad para ligar progesterona; ligera actividad estrogénica; aumenta la actividad de la enzima glutatión α-transferasa, lo que sugiere un potencial anticarcinogénico; analgésico; antiinflamatorio; antipirético; antidiarreico; antifúngico; antiprotozoario; contra desórdenes hepáticos; diurético; antihipertensivo; antiesparmódico; actúa frente a enfermedades respiratorias, sífilis, gonorrea, y abortivo. Los usos adicionales son los siguientes:  En perfumería, jabonería y cosmética.  En la preparación de linimentos antirreumáticos.  En pomadas contra dermatitis (pediculosis).  Como desinfectante y cicatrizante.  Se utiliza en la industria alimentaria como: condimento, conservante y aromatizante de alimentos, carnes, embutidos, salsas, ensaladas (Tayan, 2015).  Dosis “(Origanum vulgare): se utilizó hojas y tallos de orégano secos al ambiente por 15 días, bajo sombra y triturados manualmente. Este producto se aplicó 40 directamente en el balaceado de los caninos; en una cantidad de 100g/animal/día V.O., por un tiempo de 15 días” (Mosquera, 2016).  Composición Química El aceite esencial de orégano es rico en: timol, beta- bisaboleno, cariofileno, p- cimeno, borneol, lianalol, ecetato de linalilo, alfa y beta-pinenos, alfa-terpineno, ácidos fenolcaboxílico, caféico, clorogénico, rosmarínico; contiene flavonoides como: derivados de apigenol, luteolol, kenferol y diosmetol; algunos triterpenos como: derivado de los ácidos ursólicos y olenaolicos (Loeza, et al., 2019). En el orégano también que se encontró la presencia de componentes no menos importantes como los ácidos cafeícos con propiedades antioxidantes, por otra parte mencionaron que haciendo uso de los aceites esenciales y de los extractos acuosos se ha podido identificar flavonoides: “apigenina, luteolina, alcoholes alifáticos, compuestos terpénicos y derivados fenilpropano” (Chamba, 2015).  Composición nutricional Tabla 9 Composición nutricional por cada 100 gr de orégano seco Composición nutricional por cada 100 gr de orégano seco COMPOSICIÓN CANTIDAD (GR) CDR (%) K calorías 308. 16.1 Carbohidratos 21.63 7 Proteínas 11 23 Fibra 42.8 142.7 Grasas 10.25 19.3 Sodio 15 0.9 Calcio 1576 131.3 Hierro 44 550 Fósforo 200 28.6 Potasio 1669 83.5 Vitamina B3 6.22 0 Vitamina B12 0 0 Vitamina C 50 6 Fuente: (Loeza, et al., 2020) 41  Efecto antiparasitario Se encontró que al administrar oralmente 600 µg/ml de aceite emulsificado por día, por el lapso de 6 semanas en pacientes que dieron positivo para Blastocystis hominis y se obtuvó una efectividad antiparasitaria del 50%; actúa frente endoparásitos redondos, protozoos, ectoparásitos como pulgas, piojos; bloqueando las características adhesivas del parásito, sus extractos poseen actividad antigiardia elevada, con una mortalidad de los trofozoitos del 90%, mayor que la causada por timidazol (79%), la droga tradicional usada para el tratamiento de la giardiosis (Mosquera, 2016). El aceite esencial de orégano ha demostrado ser efectivo en el control de Trypanosoma cruzi, en cualquier estado de su desarrollo, siendo los trypomastigotes más sensibles al AEO que los epimastigotes, el principal componente del AEO fue 3-cyclohen-1-ol (26,2%), la muerte del patógeno se atribuye a la característica del AEO hidrofobicidad que le permite penetrar la membrana celular y matar al parásito afectando la vía metabólica citoplasmática similar mecanismo observado en la actividad contra bacterias (Teneda, 2015). 3.8 Preparación de extractos Extraer los principios activos de raíz, hojas, flores y tallos, de acuerdo a los antecedentes encontrados, de la manera más sencilla, como puede ser por medio de una infusión, decocción y maceración. En cambio, para analizar las propiedades medicinales de una droga vegetal, en muchos casos se recurrirá a métodos de extracción más complejos, que permitan obtener métodos reproductibles, con cuantificación de principio activo en lo posible los métodos extractivos más empleados son: maceración, frio en calor, lixiviación, soxhlet y arrastre por vapor de agua (Rivas, 2016). 3.8.1 Extracción por decocción “La extracción por decocción tiene lugar al hacer hervir la planta o partes de la misma en agua durante diez a quince minutos, dejándola posteriormente macerar 42 otro periodo antes de proceder a la filtración; algunos autores aconsejan una maceración en agua fría, previa a la ebullición” (Santana, 2014). “Extracción por decocción identificada también por cocimiento, consiste en llevar la droga más el disolvente a la temperatura de ebullición del agua, manteniéndola durante un periodo de tiempo variable que suele oscilar de 15 a 30 minutos” (Torres, 2018). 3.8.2 Extracción por infusión Producto líquido obtenido por la acción de extraer de plantas y hierbas las partes solubles en agua a una temperatura mayor que la del medio ambiente y menor que la del agua hirviendo. Este método permite, al contrario que la decocción, obtener una gran parte de los principios volátiles que de otro modo se pierden, en cambio impide la extracción de los que requieren un grado de calor elevado y continuo (Santana, 2014). Es el proceso en cual se somete a la droga previamente humedecida al contacto con el solvente a una temperatura igual a la de ebullición del agua por diez a cinco minutos, se deja enfriar hasta temperatura ambiente; la infusión, es claramente el método más idóneo para obtener los principios activos cuando las partes de la planta empleada sean blandas y frágiles, como en el caso de hojas, yemas o flores (Torres, 2018). 3.8.3 Maceración Es un proceso de extracción de sólido a líquido, el producto sólido (materia prima) posee una serie de compuestos solubles en el líquido exactamente que son los que se pretende extraer, en la industria química se suele mencionar el termino de extracciones, en cambio cuando se trata de alimentos, hierbas y otros productos, para consumo humano se emplea el término maceración, en este caso el agente exactamente (la fase líquida) suele ser el agua, pero también se emplean otros líquidos como vinagre, jugos, alcoholes o aceites aderezados con diferentes ingredientes que modificarán las propiedades de extracción del medio líquido (Santana, 2014). 43 IV. MARCO METODOLÓGICO 4.1 Materiales 4.1.1 Ubicación de la investigación La investigación se desarrolló en el albergue canino municipal Guaranda ubicado en el Parque Industrial, en el sector de Negroyacu de la parroquia Guanujo. 4.1.2 Localización de la investigación Tabla 10 Localización de la investigación Localización de la Investigación UBICACIÓN LOCALIDAD País Ecuador Provincia Bolívar Cantón Guaranda Parroquia Guanujo Sector Negroyacu-Planta Industrial 4.1.3 Situación geográfica y climática Tabla 11 Condiciones meteorológicas Condiciones Meteorológicas PARÁMETRO VALOR Altitud 2668 msnm Latitud 1°56ʹ67ʺ Longitud 79°01ʹ67ʺ Temperatura máxima 18°C Temperatura mínima 8°C Temperatura promedio 12°C Humedad anual relativa 75% Precipitación anual promedio 900mm/año Fuente: Estación Meteorológica Laguacoto II, 2018 44 4.1.4