UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente Carrera de Medicina Veterinaria Tema: ANÁLISIS COMPARATIVO DEL EFECTO CICATRIZANTE DE LA ACHUPALLA (Puya glomerifera) Y PROPÓLEO APLICADO A HERIDAS POST-QUIRÚRGICAS EN CANINOS Proyecto de investigación, previo a la obtención del título de Médica Veterinaria, otorgado por la Universidad Estatal de Bolívar a través de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y Medio Ambiente, Carrera de Medicina Veterinaria. Autora: Mayra Elizabeth Chango Cunalata Tutor: Dr. Jorge Jagger Segura Ochoa PhD. Guaranda – Ecuador 2025 IV DEDICATORIA La presente investigación la dedico, en primer lugar, a Dios y a mi Virgen de Guadalupe, por ser mi guía espiritual y brindarme fortaleza en cada momento del camino. Con todo mi amor, a mis queridas hijas Génesis, Mykeily y Arleth Freire, quienes son mi mayor inspiración y el motor fundamental de mi vida; gracias a ellas he aprendido a ser perseverante y mantenerme firme en la búsqueda de mis sueños. A mi padre Germánico Chango (+), cuya memoria vive siempre en mi corazón y cuya enseñanza y ejemplo me acompañan en cada paso de mi vida. A mi madre, Fanny Cunalata, y a mi hermana Jazmine Chango, por su apoyo incondicional, su amor y compañía que han sido pilares fundamentales para alcanzar este logro profesional. V AGRADECIMIENTO Quiero expresar mi más sincero agradecimiento, en primer lugar, a Dios por darme la vida, guiarme en cada paso y llenarme de sabiduría y fortaleza para culminar mis estudios. Con profundo amor y gratitud, a mis padres: a la memoria de mi padre Germánico Chango (+), cuyo ejemplo y enseñanzas continúan iluminando mi camino, y a mi madre Fanny Cunalata, por su apoyo incondicional. De igual manera, a mi hermana Jazmín Chango, por sus palabras de aliento y compañía constante en los momentos más difíciles. Extiendo mi agradecimiento a la Universidad Estatal de Bolívar, institución que me abrió sus puertas y, a través de sus docentes, me brindó una formación profesional de calidad. De manera especial, expreso mi gratitud a mi tutor, el Dr. Jorge Jagger Segura Ochoa, PhD., por compartir generosamente sus conocimientos, por su amistad y por el apoyo incondicional que me permitió culminar con éxito esta investigación. Finalmente, agradezco al tribunal evaluador: Dra. Jenny Marcela Martínez Moreira y al Dr. Washington Rolando Carrasco Mancero, MSc., por el tiempo, la dedicación y los valiosos aportes que enriquecieron el desarrollo de este trabajo. VI ÍNDICE DE CONTENIDO N° DETALLE PÁG. CAPÍTULO I 1 1.1. INTRODUCCIÓN 1 1.2. PROBLEMA 3 1.3. OBJETIVOS 4 1.3.1. Objetivo general 4 1.3.2. Objetivos específicos 4 1.4. HIPÓTESIS 5 CAPÍTULO II 6 2. MARCO TEÓRICO 6 2.1 Anatomía de la piel 6 2.1.1 Epidermis 6 2.1.2 Dermis 6 2.1.3 Tejido muscular 6 2.1.4 Heridas de la piel 7 2.1.5 Tipo de heridas 7 2.1.6 Clasificación de las heridas quirúrgicas 7 2.1.7 Heridas limpias 7 2.1.8 Heridas limpias-contaminadas 8 2.1.9 Heridas contaminadas 8 2.1.10 Heridas sucias 8 2.1.11 Cicatrización 8 2.1.12 Fases de la cicatrización 9 2.1.13 Proceso de no cicatrización 9 VII 2.1.14 Tipos de cicatrización 10 2.1.15 Factores que influyen en la cicatrización 11 2.1.16 Factores que alteran la cicatrización 11 2.1.17 Grado de cicatrización (GC) 11 2.1.18 Dolor 12 2.1.19 Inflamación 13 2.2 Fitoterapia 13 2.3 Achupalla 14 2.3.1 Clasificación taxonómica de la achupalla 14 2.3.2 Origen 15 2.3.3 Composición 15 2.3.4 Función 16 2.4 Propóleo 16 2.4.1 Origen 16 2.4.2 Composición 16 2.4.3 Función 17 2.4.4 Propiedades 17 2.4.5 Utilización del propóleo 17 2.4.6 Espectrometría 18 2.5 Espectrometría liquida 18 2.6 Evaluación del dolor 19 2.6.1 Marcadores fisiológicos y neurológicos 19 2.6.2 Evaluación del dolor agudo preoperatorio 19 2.6.3 Escalas unidimensionales 19 2.7 Protocolo Anestésico 21 VIII 2.7.1 Inducción 22 2.7.2 Anestésicos inyectables 22 2.7.3 Mantenimiento 23 2.8 Protocolo de cirugía del aparato genital y reproductor 25 2.8.1 Ovariohisterectomía en caninas 25 CAPÍTULO III 28 3. MARCO METODOLÓGICO 28 3.1 Ubicación de la investigación 28 3.2 Metodología 28 3.2.1 Material en estudio 28 3.2.2. Factores en estudio 29 3.2.3. Tratamientos 29 3.2.4. Descripción técnica del ensayo 29 3.2.5. Tipo de diseño experimental o estadístico 29 3.2.6. Manejo de la investigación 30 3.2.7. Métodos de evaluación y datos tomados 31 CAPÍTULO IV 33 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 33 4.1. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS 33 CAPÍTULO V 55 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 55 5.1 CONCLUSIONES 55 5.2. RECOMENDACIONES 56 BIBLIOGRAFÍA 57 ANEXOS IX ÍNDICE DE TABLAS N° Detalle Pág. 1. Escala de Byung 12 2. Categorías de dolor según la escala de Glasgow 12 3. Composición del propóleo 17 4. Anova 30 5. Edad caninas domesticas 33 6. Categorización de los cánidos en grupos en unción de rangos de peso 34 7. Evolución de la longitud de la herida en unción del tiempo (1-15 días) 36 8. Prueba de Tukey (5 % de error) tamaño de la herida en el día 3 38 9. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 5 39 10. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 7 40 11. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 9 42 12. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 11 43 13. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 13 44 14. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 15 45 15. Escala de dolor en el primer y tercer día de medición 50 16. Escala de inflamación 52 X ÍNDICE DE FIGURAS N° Detalle Pág. 1. Edad caninas domesticas 33 2. Categorización de los cánidos en grupos en unción de rangos de peso 35 3. Gráfico de barras de la longitud promedio de la herida en función del tiempo 37 4. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 3 38 5. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 5 39 6. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 7 41 7. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 9 42 8. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 11 43 9. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 13 44 10. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 15 45 11. Tiempo de cicatrización 46 12. IC sobre los cm. heridas al día 15, variables edad/tratamiento 48 13. IC sobre los cm. heridas al día 15, variables peso/tratamiento 49 14. Evaluación de la escala del dolor primer y tercer día 50 15. Escala de inflamación 51 XI ANEXOS N° Detalle 1. Ubicación de la investigación 2. Croquis del ensayo 3. Base de datos 4. Cromatografía achupalla 5. Fichas clínicas 6. Fotografías 7. Glosario de términos técnicos XII RESUMEN La presente investigación se realizó en la provincia de Tungurahua, en la parroquia de huachi grande a 2350 msnm con los siguientes objetivos 1) Conocer la composición química de la achupalla (Puya glomerifera). (espectrometría de masas) 2)Determinar el efecto de los extractos en la cicatrización en heridas postquirúrgicas 3) Evaluar el efecto analgésico de la achupalla.: la cicatrización de heridas postoperatorias en 30 perras sometidas a ovariohisterectomía. Donde se evaluó la eficacia de extractos de achupalla y propóleo frente a un grupo testigo. La mayoría de las pacientes eran jóvenes, de entre 6 y 11 meses (66,67%), y de peso ligero, con un 40% en el rango de 2 a 7 kg. El seguimiento de la herida durante 15 días reveló una evolución diferenciada. Inicialmente (días 3 y 5), la achupalla mostró la mayor reducción del tamaño de la herida. Sin embargo, a partir del día 7 y hasta el final del estudio, el propóleo demostró una eficacia superior y estadísticamente significativa, alcanzando el menor tamaño de herida promedio (0,30 cm) al día 15, en comparación con la achupalla (0,47 cm) y el grupo testigo (0,58 cm). Este patrón sugiere que, si bien la achupalla es efectiva en las fases tempranas, el propóleo acelera la cicatrización de manera más pronunciada y sostenida a largo plazo. Adicionalmente, se evaluó el dolor postoperatorio. En el primer día, todas las perras presentaron dolor intenso. Para el tercer día, los grupos tratados con achupalla y propóleo mostraron una remisión completa a dolor leve, mientras que en el grupo testigo un 10% de las pacientes aún manifestaba dolor moderado. Estos hallazgos, respaldados por la literatura citada, confirman el potencial de ambos extractos naturales, destacando la superioridad del propóleo en las fases avanzadas de la regeneración tisular. Palabras claves: Caninas, Achupalla,Propoleo, Ovariohisterectomía (OVH) XIII SUCMARY The present research was conducted in the province of Tungurahua, in the parish of Huachi Grande at an altitude of 2,350 meters above sea level, with the following objectives: 1) To determine the chemical composition of achupalla (Puya glomerifera) using mass spectrometry, 2) To assess the effect of its extracts on wound healing in postsurgical wounds, and 3) To evaluate the analgesic effect of achupalla. The study focused on the healing of postoperative wounds in 30 female dogs that underwent ovariohysterectomy, evaluating the efficacy of achupalla and propolis extracts compared to a control group. Most of the subjects were young, between 6 and 11 months old (66.67%), and of low body weight, with 40% ranging from 2 to 7 kg. Wound follow-up over 15 days revealed differentiated healing patterns. Initially (on days 3 and 5), achupalla showed the greatest reduction in wound size. However, from day 7 to the end of the study, propolis demonstrated superior and statistically significant efficacy, achieving the smallest average wound size (0.30 cm) by day 15, compared to achupalla (0.47 cm) and the control group (0.58 cm). This pattern suggests that while achupalla is effective in the early stages, propolis promotes more pronounced and sustained long-term healing. Additionally, postoperative pain was evaluated. On the first day, all dogs experienced intense pain. By the third day, the groups treated with achupalla and propolis showed complete remission to mild pain, while 10% of the control group still exhibited moderate pain. These findings, supported by the cited literature, confirm the potential of both natural extracts, highlighting the superiority of propolis in the advanced phases of tissue regeneration. Keywords: Canines, Achupalla,Propolis, Ovariohysterectomy (OVH) 1 CAPÍTULO I 1.1. INTRODUCCIÓN Para la presente investigación se realizó con el fin de determinar si la achupalla tiene efectos cicatrizantes sobre las heridas post-quirurgicas para así hacer frente al aumento desproporcionado de la población canina, la esterilización quirúrgica, específicamente la ovariohisterectomía en hembras, se ha consolidado como una herramienta esencial para el control poblacional, especialmente en áreas urbanas. La cicatrización es un proceso biológico complejo y dinámico que se desarrolla en fases sucesivas: inflamación, proliferación y maduración. Una cicatrización exitosa es vital para la recuperación completa del animal. Sin embargo, las heridas postquirúrgicas son vulnerables a complicaciones, principalmente infecciones bacterianas, que pueden interrumpir el proceso de curación y comprometer la salud del canino. Esta problemática impulsa la búsqueda constante de tratamientos que sean eficaces, seguros y que favorezcan una recuperación óptima de nuevas alternativas terapéuticas, se ha revalorizado el potencial de agentes de origen natural con bioactividad comprobada. Específicamente, la Puya glomerifera (comúnmente denominada Achupalla) y el propóleo han demostrado una notable eficacia en la promoción de la cicatrización de heridas. La Puya glomerifera , una especie vegetal endémica de Ecuador, contiene en su estructura compuestos bioactivos como el timol y el ácido láurico, los cuales le confieren una significativa actividad antimicrobiana. Por su parte, el propóleo, una mezcla resinosa elaborada por las abejas, exhibe un espectro de propiedades que incluyen efectos antibacterianos, antiinflamatorios y antifúngicos. Además, estudios como el de (Pugll y Rubio, 2022) indican que el propóleo acelera la fase de granulación del tejido y estimula la regeneración tisular, procesos celulares fundamentales para una reparación dérmica eficiente. Por ello, se consideró crucial explorar alternativas terapéuticas seguras y eficaces que pudieran mejorar el proceso de cicatrización y minimizar el riesgo de estas complicaciones. Este estudio buscó precisamente evaluar el potencial de la Achupalla y el Propóleo, dos agentes naturales con propiedades medicinales 2 reconocidas, como coadyuvantes en la curación de heridas postquirúrgicas, ofreciendo así una contribución valiosa a la salud canina y a las prácticas de tenencia responsable de mascotas. 3 1.2. PROBLEMA La superpoblación de perros, causada por una alta tasa de reproducción y dueños irresponsables, ha generado serios problemas económicos y de salud pública. Para controlar esto, se realizan muchas esterilizaciones quirúrgicas en hembras (ovariohisterectomías). Sin embargo, los tratamientos después de estas cirugías a menudo pasan por alto un problema grave: la resistencia de las bacterias a los antibióticos. Este problema de resistencia a los antibióticos es cada vez mayor. Hay menos antibióticos nuevos en desarrollo, y el uso excesivo o incorrecto de los actuales ha hecho que las bacterias se vuelvan más fuertes y los medicamentos dejen de funcionar. Aunque necesitamos antibióticos y desinfectantes para evitar infecciones después de las cirugías, estos son caros. Su alto costo dificulta su uso, lo que causa más sufrimiento al animal y aumenta el riesgo de que se enfermen, especialmente si sus defensas están bajas. Por todo esto, es urgente buscar y probar alternativas naturales que nos ayuden a depender menos de los antibióticos tradicionales y a frenar la resistencia bacteriana. Nuestra investigación se enfoca en comparar qué tan bien funcionan los extractos de Achupalla (Puya glomerifera) y Propóleo en la cicatrización de heridas de perras esterilizadas. Queremos medir cuánto tardan en cicatrizar y si el dolor se reduce. Con esto, esperamos ofrecer pruebas científicas sólidas para crear tratamientos veterinarios más efectivos, seguros y naturales. 4 1.3. OBJETIVOS 1.3.1. Objetivo general • Comparar el efecto cicatrizante de la achupalla (Puya glomerifera) y del propóleo aplicado a heridas post-quirúrgicas en caninos. 1.3.2. Objetivos específicos • Conocer la composición química de la achupalla (Puya glomerifera). (espectrometría de masas). • Determinar el efecto de los extractos en la cicatrización en heridas postquirúrgicas. • Evaluar el efecto analgésico de la achupalla. 5 1.4. HIPÓTESIS Ho: No existe diferencia en la actividad cicatrizante de la achupalla (Puya glomerifera) con el propóleo en heridas post-quirurgicas en caminos HI. Existe diferencia en la actividad cicatrizante de la achupalla (Puya glomerifera) con el propóleo en heridas post-quinurgicas en caninos 6 CAPÍTULO II 2. MARCO TEÓRICO 2.1 Anatomía de la piel La piel es un órgano extenso en el cuerpo animal que desempeña diversas funciones esenciales. Actúa como un órgano de percepción, regula la evaporación, participa en la termorregulación y absorbe sustancias, incluida la vitamina D (Alvarado et al., 2020). Para llevar a cabo estas funciones, la piel está compuesta por diversas estructuras. 2.1.1 Epidermis La capa más externa de la piel, conocida como epidermis, se compone principalmente por queratinocitos (85%). Además, contiene células de Langerhans (rango del 3-8%), melanocitos (aproximadamente un 5%) y células de Merkel. Tanto los queratinocitos como las células de Langerhans forman parte del sistema inmunitario de la piel. Los queratinocitos actúan como la primera línea de defensa contra agentes infecciosos oportunistas que pueden colonizar las heridas de la piel (Betancourt & Chicaiza, 2020). 2.1.2 Dermis Los vasos sanguíneos, que se encuentran en la Dermis, cumplen la función vital de suministrar nutrientes a todo el organismo. Además, desempeñan varias funciones importantes, entre las que se encuentran la secreción de colágeno (proteína esencial para nutrir la epidermis), termorregulación del cuerpo, albergue de nervios motores y sensoriales, y contienen folículos pilosos. También poseen células inmunes que defienden al organismo contra agentes infecciosos que atraviesan la epidermis. Esta estructura también responde a diversas sensaciones o estímulos externos, como picazón, dolor, calor y frío (Loaiza et al., 2020). 2.1.3 Tejido muscular El tejido muscular está compuesto por células especializadas llamadas miocitos o fibras musculares, de origen mesodérmico (miotomo) especializadas en la contracción. Estas células dependen de la agrupación de filamentos formados por proteínas presentes en el citoesqueleto, los cuales poseen capacidad contráctil. Los 7 miocitos son responsables del movimiento del cuerpo (Lorente, 2020). La capacidad de regeneración del tejido muscular es limitada. Existen tres variedades: el músculo estriado esquelético (formado por células alargadas llamadas miocitos o fibras musculares, con numerosos núcleos en posición periférica (subsarcolémica), músculo cardiaco (tejido muscular cardiaco donde se diferencian dos tipos de células, las miocárdicas y las células del sistema autónomo o cardionector) y el músculo liso (constituido por células fusiformes con un núcleo central y miofibrillas en el citoplasma, no organizadas en estrías transversales) (UCM, 2020). 2.1.4 Heridas de la piel Las heridas se definen como la discontinuidad de la piel y pueden presentarse como alteraciones, abrasiones, laceraciones, avulsiones, necrosis por presión y desgarros en la estructura del tejido, causados por daños físicos, químicos o térmicos (Velásquez & Valencia, 2020). Una herida implica la pérdida anatómica y funcional de las células de los tejidos del cuerpo, resultando de la apertura o ruptura de la piel. La curación de estas heridas se basa en un proceso biológico y en una serie de eventos que conducen al crecimiento y regeneración de los tejidos (Padilla et al., 2020). 2.1.5 Tipo de heridas Existen varios tipos de heridas en caninos, entre las más comunes se encuentran las heridas quirúrgicas, las heridas accidentales, las heridas por mordeduras, las heridas venenosas o tóxicas, las heridas contusas, las heridas penetrantes y las heridas por arrancamiento, entre otras (Velásquez & Valencia, 2020). 2.1.6 Clasificación de las heridas quirúrgicas Las heridas quirúrgicas son consideradas delicadas y cicatrizan por primera intención. Estas heridas tienen un proceso de retroceso espontáneo que se completa dentro de un plazo previsible (Padilla et al., 2020). 2.1.7 Heridas limpias Las heridas limpias son aquellas operatorias o quirúrgicas que no presentan 8 infección y se realizan mediante técnicas asépticas sin signos de inflamación. Estas heridas se cierran de forma primaria y, si es necesario, se canalizan con drenaje cerrado para evitar la exposición de la herida al exterior (Chávez & Zambrano, 2020). Las heridas quirúrgicas pueden presentar complicaciones postoperatorias, como infecciones que pueden evolucionar hasta desarrollar sepsis o una inflamación severa. Las bacterias y microorganismos que invaden el tejido vivo producen signos característicos de una infección local, como el calor, olor, eritema, edema, rubor y exudado, las cuales pueden convertirse en complicaciones que prolongan el tiempo de cicatrización (Cevallos, M. 2020). 2.1.8 Heridas limpias-contaminadas Las heridas limpias-contaminadas son las que se producen cuando el procedimiento operatorio involucra la entrada a un órgano o cavidad bajo condiciones controladas. Los contaminantes de este tipo de heridas suelen ser bacterias endógenas del propio paciente (Peñafiel, 2020). 2.1.9 Heridas contaminadas Las heridas contaminadas, ya sean abiertas o accidentales, son aquellas que ocurren debido a incumplimiento en las normas de asepsia. Esto incluye también la penetración de vísceras huecas con derrame de su contenido y las heridas traumáticas recientes con rápida evolución (Espín, J. F. 2020.). 2.1.10 Heridas sucias Las heridas sucias son aquellas traumáticas antiguas con tejidos desvitalizados, así como los sitios quirúrgicos donde existe una infección, como en los casos de peritonitis bacteriana y abscesos intraabdominales. Estas heridas también pueden contener gérmenes multirresistentes (Moposita, J. D. 2020). 2.1.11 Cicatrización La cicatrización es un proceso activo que involucra proteínas solubles y células especializadas en la proliferación celular para restaurar el tejido dañado. Este proceso de curación de heridas combina varios procesos celulares y moleculares destinados a reintegrar los tejidos lesionados (Fernández et al., 2020). 9 2.1.12 Fases de la cicatrización Fase de coagulación Inmediatamente después de una lesión, se inicia el proceso de hemostasia y coagulación, cuyo primer objetivo es prevenir la hemorragia en el tejido lesionado y proteger el sistema vascular, asegurando el buen funcionamiento de los órganos vitales. El segundo objetivo es proporcionar una matriz celular necesaria para el proceso de curación del tejido (Fernández et al., 2020). Fase inflamatoria La fase inflamatoria se caracteriza por la quimiotaxis y un aumento de la permeabilidad, lo cual limita daños adicionales, elimina desechos celulares y bacterias de la herida, y promueve la migración celular. Esta fase tiene una duración de varios días (Román ., 2020). Fase proliferativa o de granulación En la etapa proliferativa o de granulación, los fibroblastos son las células más importantes, ya que producen la matriz dérmica. Una vez en el lugar de la lesión, los fibroblastos migran activamente sobre una matriz laxa de fibronectina e interactúan con receptores de crecimiento. Los macrófagos producen y secretan factores angiogénicos, facilitando la migración de células endoteliales que forman brotes capilares. Además, los receptores de integrina se integran para la formación de nuevos vasos sanguíneos (Rojas., 2020). Fase de maduración o remodelación Durante la fase de maduración o remodelación, aumenta la actividad de la colagenasa, que rompe el exceso de colágeno para crear un equilibrio. La disminución del flujo sanguíneo incrementa la pérdida de colágeno, debilitando la cicatriz. El exceso de depósitos durante la cicatrización conduce a una epitelización, fortaleciendo progresivamente la piel para una mejor cicatrización. Si este proceso se interrumpe por causas internas o externas, se produce una falla en la cicatrización, resultando en heridas crónicas (Restrepo., 2020). 2.1.13 Proceso de no cicatrización El proceso de cicatrización o curación de heridas está determinado por la 10 continuidad de cada una de las fases que lo caracterizan. Cuando se presenta alguna alteración que dificulta su desarrollo en el tiempo considerado normal, se genera una lesión crónica. Esta lesión puede detenerse o retrasarse en la fase de inflamación o en la fase proliferativa (Vargas, 2021). La respuesta humoral ante estas lesiones refleja un exceso en la producción de metaloproteinasas, factores de crecimiento y citoquinas. Las metaloproteinasas son proteínas adhesivas necesarias para el proceso normal de curación de una herida, y son importantes en la degradación y remodelación del tejido en cicatrización. Un factor común es la presencia de microorganismos que colonizan y retardan el proceso de cicatrización (Artiga, 2021). En las heridas crónicas, la remodelación de la matriz celular no ocurre de la misma forma que en una herida aguda. El aumento del proceso proteolítico produce una degradación incontrolada del tejido, lo que conduce a una herida que no cicatriza debido al aumento de metaloproteinasas, que generan una disminución en la proliferación celular y en la angiogénesis (Velasquez, 2021). 2.1.14 Tipos de cicatrización Cicatrización primaria o de primera intención La cicatrización primaria o de primera intensión son heridas limpias, no infectadas, por incisión quirúrgica aproximada por sutura quirúrgica, se cierra con sutura, cintas adhesivas o grapas, la reparación de las heridas se realiza en el plazo de 6 a 8 horas desde la lesión (Córdova & Yocalca, 2020). Cicatrización secundaria o de segunda intención La cicatrización secundaria o de segunda intención se caracteriza por no alcanzar a generar la arquitectura normal de la piel debido a la pérdida de tejido por un trauma severo o quemadura. El tiempo de resolución dependerá de la extensión de la herida. Durante este proceso, hay formación de tejido de granulación con miofibroblastos, y la herida se cierra por contracción, dejando cicatrizar el tejido. El cierre por segunda intención se distingue porque la herida quirúrgica se sutura hasta la aponeurosis, dejando la piel abierta (Prieto, 2020). 11 Cicatrización terciaria o de tercera intención El método de cierre primario diferido es una técnica segura de reparación para heridas muy contaminadas o en tejidos altamente traumatizados. El profesional debe realizar un aseo meticuloso de la lesión y posponer el cierre por un período que oscila entre el tercer y el séptimo día desde que se produjo la herida, según la evolución local, asegurando así un cierre sin complicaciones (Ferrer, 2020). 2.1.15 Factores que influyen en la cicatrización El oxígeno es uno de los elementos más cruciales en el proceso de cicatrización. La temperatura de la herida debe mantenerse cerca de 38 °C, ya que una disminución de la misma puede inducir una falta de aporte de leucocitos, oxígeno y nutrientes esenciales para la curación adecuada (Cevallos, 2020). Al igual que el oxígeno, la nutrición es un factor crucial que influye en la curación de las heridas. El déficit de macronutrientes como las proteínas, y de vitaminas como la vitamina C y E, puede impedir la síntesis de colágeno. Además, el estado metabólico del paciente puede alterar el proceso de curación de la herida. Hormonas como los glucocorticoides y los antiinflamatorios también pueden interferir en la inflamación y la fibroplasia, afectando negativamente la síntesis de colágeno (Ferrer, 2020). 2.1.16 Factores que alteran la cicatrización Cuando se rompe la integridad de un tejido, el paciente se vuelve vulnerable y el proceso de cicatrización puede verse afectado. Por lo tanto, es crucial evitar cualquier factor negativo que pueda influir en la cicatrización para prevenir complicaciones futuras. Durante la fase de inflamación, la contaminación crítica aumenta la carga bacteriana en la herida, lo que incrementa el número de glóbulos blancos (Fernández et al., 2020). 2.1.17 Grado de cicatrización (GC) El grado de cicatrización de las heridas postquirúrgicas será identificado por medio de la escala Byung Joo. 12 Tabla 1. Escala de Byung para la evaluación del grado de cicatrización en heridas post quirúrgicas Escala Byung Joo 1 Bordes frescos, exudado sanguinolento, ligero aumento de volumen de tejido y herida abierta 2 Bordes ligeramente adosados, costra húmeda, libre de exudado, aumento del volumen del tejido y contracción de la herida. 3 Bordes adosados, libre de exudado, formación de costra, sin inflamación aparente. 4 Bordes firmes, costra seca, tejido ligeramente flexible. 5 Bordes gruesos, cicatriz perceptible. 2.1.18 Dolor Las categorías de la variable dolor se localizan y definen mediante la tabla del dolor de Glasgow. Tabla 2. Categorías de dolor según la escala de Glasgow. Fuente: Universidad de Glasgow (2020) Condición Categoría Características Tranquilo 0 Ignora las heridas o las zonas dolorosas Llora o gime 1 Se mira la herida o la zona dolorosa Se queja 2 Se lame la herida o la zona dolorosa Aúlla 3 Se frota la herida o la zona dolorosa Se muerde la herida 4 En la zona dolorosa 13 2.1.19 Inflamación El proceso de reparación tisular se inicia inmediatamente después de la lesión. El primer cambio detectable es la hemorragia local, caracterizada por la extravasación de proteínas plasmáticas y plaquetas hacia las matrices extracelulares y el espacio intersticial. Rápidamente, los eritrocitos, proteínas y plaquetas forman un coágulo que, junto con el tejido dañado, libera mediadores de inflamación y citoquinas. Estos mediadores actúan como quimioatrayentes para los neutrófilos, que en menos de 60 minutos migran, junto con plaquetas y proteínas, desde el espacio vascular hacia el espacio extracelular (Valencia, 2020). Cerca de 48 horas después de la lesión, se pueden observar macrófagos, los cuales, junto con los neutrófilos, fagocitan los restos celulares producidos por el daño tisular. A partir de las 72 horas después del daño, y debido a la secreción local de factores de proliferación celular, comienzan a producirse células mesenquimales como fibroblastos, angioblastos y mioblastos. Estas tres especies de células participan en la reparación y cicatrización a través de la fibrosis, angiogénesis y retracción tisular (Valencia, 2020). 2.2 Fitoterapia Las plantas de origen natural constituyen una auténtica armería química. Hasta la fecha, solo se conoce un tercio de ellas, teniendo en cuenta la diversidad de especies a nivel mundial (Odani et al., 2022). La fitoterapia es una práctica terapéutica que utiliza plantas y sus derivados para tratar enfermedades. Se emplean extractos vegetales combinados con disolventes para concentrar los compuestos activos y facilitar su administración. Estos preparados, llamados matrices vegetales complejas, contienen una variedad de compuestos químicos que desempeñan funciones importantes en la defensa contra patógenos y la protección contra la radiación ultravioleta, entre otros procesos vegetales (Blanco, 2022). 14 Según Martínez-Valverde et al. (2020) en fitoterapia, se pueden encontrar diversos compuestos químicos, tales como: • Familia fenólica: flavonoides. • Alcaloides: cafeína. • Esteroides: cardiotónicos y fitohormonas. • Terpenos: saponinas y aceites esenciales. • Polímeros heterogéneos. Los compuestos químicos juegan roles importantes en la actividad terapéutica de las plantas. Numerosos estudios mencionan la actividad antimicrobiana, antiinflamatoria y cicatrizante de diversas plantas, aunque muchos aún requieren confirmación mediante ensayos in vitro. Existen numerosas plantas nativas con propiedades medicinales, particularmente para la cicatrización de heridas debido a sus compuestos beneficiosos. Un ejemplo destacado es la achupalla (Escalante y Moreno, 2020). 2.3 Achupalla 2.3.1 Clasificación taxonómica de la achupalla Reino Plantae Phylum Tracheophyta Clase Liliopsida Orden Bromeliates Familia Bromeliaceae Género Puya Especie Glomerifera Nombre científico Puya glomerifera Mez & Sodiro Fuente: Esquivel (2020). 15 2.3.2 Origen La achupalla es una planta que se encuentra ampliamente distribuida en la región interandina de Ecuador. Su hábitat abarca desde los páramos húmedos hasta los matorrales secos, en un rango altitudinal que va aproximadamente desde los 1500 hasta los 4500 msnm. Es especialmente común en las provincias de Azuay, Chimborazo, Cotopaxi, Imbabura, Loja, Pichincha y Tungurahua. Esta planta forma densos grupos unidos por tallos ramificados, generalmente en quebradas y linderos, donde sus fuertes espinas crean una barrera natural que impide el paso de animales. Además, es muy resistente a las quemas durante el verano, lo que la convierte en una especie especialmente robusta en su entorno natural (Peñafiel, 2020). Según el Instituto Misael Acosta (2021) la achupalla es una planta que crece en las zonas altas de la sierra ecuatoriana, entre los 3200 y 3850 msnm. Puede alcanzar los 3 metros de altura y tiene hojas lanceoladas con espinas en los bordes, de color verde oscuro por el anverso y cubiertas de un polvo blanco por el reverso. La mayor diversidad de achupalla se encuentra en Perú (73 especies) y Bolivia (57 especies), con presencia también en Colombia (35), Ecuador (22), Chile (11) y Venezuela (8). Se utiliza en ensaladas con la base tierna de las hojas, como leña, y medicinalmente para curar quemaduras, heridas y bajar la fiebre. Tiene propiedades cicatrizantes y antibióticas. La dosis comúnmente usada de estigmas en ensayos clínicos es de 30 mg/día de extracto hidroalcohólico. 2.3.3 Composición La destrucción del hábitat es la única amenaza conocida para esta especie. Se trata de plantas que alcanzan entre 1,50 y 3 metros de altura, con ramificaciones y un follaje coriáceo, cuyos márgenes están provistos de espinas antrorsas y retrorsas. Sus hojas son triangulares, con márgenes cerrados y espinas a ambos lados. La inflorescencia es cilíndrica, mide entre 50 y 80 cm de largo, y su eje queda cubierto por las ramificaciones de la planta. Las flores son de color verde, con estambres y pistilos visibles (Esquivel, 2020). Los ácidos grasos de cadena media ejercen efectos sobre diversas bacterias y virus debido a su estructura química y su interacción con las membranas lipídicas de estos microorganismos. Sin embargo, la actividad específica de estos compuestos no ha sido completamente caracterizada desde un punto de vista fisicoquímico, lo que 16 indica la necesidad de estudios más detallados para comprender su mecanismo de acción (Kabara, 2020). 2.3.4 Función La achupalla ofrece buenos resultados dependiendo del tipo de cicatrización deseada. No es particularmente efectiva en la reducción del tamaño de las heridas en una cicatrización de primera intención. Sin embargo, su eficacia es mayor en casos de cicatrización de segunda intención. Este proyecto representa el comienzo de futuras investigaciones sobre esta planta, ya que hemos identificado los componentes químicos presentes en ella y hemos determinado que existen 37 compuestos distintos que inhiben la acción microbiana (Esquivel, 2020). 2.4 Propóleo Es considera como un material resinoso, viscoso, translucido y adherente que las abejas recogen de las yemas, brotes y cortezas de algunos árboles que es mezclado con ciertas secreciones de las glándulas salivares (Vílchez y Cervantes, 2021). 2.4.1 Origen Según Checalla y Sánchez-Tito (2021) existen dos teorías sobre la procedencia del propóleo elaborado por las abejas: 1. Las abejas mayores de 15 días recolectan partículas resinosas de las yemas y flores de diversas plantas, como el álamo, sauce, abedul, aliso, castaño silvestre, pino y algunas herbáceas. Utilizan sus mandíbulas para recoger estas partículas y las almacenan en sus corbículas hasta llegar a la colmena, donde las desprenden. 2. Es un producto que resulta de la digestión del polen en el proventrículo, una estructura que las abejas tienen entre el buche y el intestino. 2.4.2 Composición Según Moposita (2020) el propóleo está compuesto de resinas y bálsamos (50% - 55%), cera (30% - 40%), aceites volátiles (5% - 10%), polen (5%), materiales diversos orgánicos y minerales (5%). 17 Tabla 3. Composición del propóleo Flavonoides Ácidos aromáticos no saturados Vitaminas Ácido benzoico Ácido hidroxi-benzóico Ca, K, Mg Ácido protocatéquico Ácidogálico Fuente: Moposita (2020). 2.4.3 Función En la colmena, las abejas utilizan el propóleo para diversas funciones esenciales: cerrar grietas, mantener la sanidad interna, estabilizar el microclima, adherir piezas móviles y recubrir cuerpos muertos dentro de la colonia para evitar su descomposición (Cayo y Cervantes, 2020). 2.4.4 Propiedades El propóleo posee múltiples propiedades beneficiosas: antiinflamatorio, antibacterial, antimicótico, antiviral, antiparasitario, antiséptico, antitumoral, antiulceroso, antioxidante, analgésico y cicatrizante (Cayo y Ganoza, 2020). 2.4.5 Utilización del propóleo Diversas investigaciones han demostrado las propiedades del propóleo, en especial su acción antibacterial. El propóleo muestra actividad contra una amplia gama de bacterias, incluyendo Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus mutans, Enterococcus fecalis, Bacillus cereus, Listeria Flavonas Flavonoles Flavononas Ácido cinámico Kaempferol Quercetina Pinostrobina Ácido p-cumárico Crisina Butelenol Sakuranetina Ácido isoferúlico Galangina Isalpinina Rhamnacina Dimetoxiflavona Ácido ceféico 18 monocytógenes, Enterobacter aerogenes, Echerichia coli, Klebsiella neumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium y Micrococcus (Arias, 2020). Román (2020) investigó los efectos cicatrizantes del propóleo y obtuvo buenos resultados al aplicarlo sobre diferentes heridas en perros y lechones. El estudio demostró que el propóleo reduce la inflamación y acelera la cicatrización en comparación con el tratamiento con sulfadiazina de plata. Además Sehn et al. (2009) demostraron que la aplicación de formulaciones de propóleo tiene un efecto trófico sobre la epidermis, estimulando la mitosis en los queratinocitos. 2.4.6 Espectrometría En 1912, J. J. Thomson (Premio Nobel en 1906), impulsado por su deseo de desentrañar los secretos de la química, creó el primer espectrómetro de masa y obtuvo los primeros espectros de elementos como oxígeno (O₂), nitrógeno molecular (N₂), monóxido de carbono (CO) y cloruro de cobalto II (CoCl₂). Sin embargo, el mérito no fue solo suyo, ya que la espectrometría de masas empezó en 1886 cuando Goldstein descubrió los iones positivos. La técnica avanzó en 1898 con W. Wien, quien los analizó mediante deflexión magnética, y en 1901 con W. Kaufmann, quien utilizó campos eléctricos y magnéticos paralelos para analizar los rayos catódicos. Estos avances culminaron con la invención del primer espectrómetro de masas por Thomson (Skoog et al., 1992). 2.5 Espectrometría liquida La espectrometría líquida es una técnica analítica que separa, identifica y cuantifica componentes en una muestra líquida. En este método, una muestra líquida se inyecta en un sistema de separación, como la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), donde los componentes se separan según sus propiedades químicas. Posteriormente, estos componentes se analizan mediante un espectrómetro que detecta y mide las señales características de cada sustancia. Esta técnica es valiosa en la química analítica, bioquímica y ciencias ambientales (ThermoFisherSCIENTIFIC, 2020). 19 2.6 Evaluación del dolor El dolor a menudo se considera la quinta constante vital, junto con la temperatura corporal, la frecuencia del pulso, la frecuencia respiratoria y la presión arterial. El reconocimiento y control del dolor en animales ha adquirido gran importancia en las últimas décadas, ya que un buen manejo del dolor mejora el bienestar del paciente, reduce la incidencia del dolor crónico y acelera la recuperación. Los veterinarios evalúan el dolor con métodos subjetivos, como escalas de puntuación del dolor, o con mediciones objetivas que se correlacionan con el dolor. Las herramientas de evaluación del dolor se validan para poblaciones animales específicas y pueden no ser tan fiables para otros tipos de dolor o poblaciones. 2.6.1 Marcadores fisiológicos y neurológicos La frecuencia cardíaca y respiratoria, así como la presión arterial, pueden utilizarse para evaluar el dolor agudo. El análisis de estas variables es útil en pacientes conscientes o anestesiados para reconocer estímulos nociceptivos. Sin embargo, estos cambios no son específicos para diferenciar el dolor de la ansiedad o el miedo en pacientes conscientes. 2.6.2 Evaluación del dolor agudo preoperatorio No existe un método de referencia para evaluar el dolor en animales, ni para comparar diferentes escalas o instrumentos de medición. Estos métodos son subjetivos y propensos a errores, lo que puede llevar a subestimar o sobrestimar el dolor, y a variabilidad entre observadores. 2.6.3 Escalas unidimensionales La escala descriptiva simple La escala descriptiva simple incluye generalmente cuatro o cinco categorías, como sin dolor, leve, moderado y grave. Es intuitiva y fácil de usar, pero no especifica lo que constituye cada categoría ni es lo suficientemente sensible para detectar pequeños cambios en el dolor. Tampoco ha sido validada para especies específicas. Escala de calificación numérica 20 Es una escala ordinal en la que el observador asigna una puntuación numérica a la intensidad global del dolor. Tiene mejor resolución cuando incluye más niveles, como de 0 a 10. Sin embargo, no ha sido validada en cuanto a linealidad, por lo que una duplicación de la puntuación no significa que el dolor sea dos veces más intenso. Escala visual analógica Esta escala consiste en una línea horizontal de 100 cm, con "sin dolor" en el extremo izquierdo y "dolor insoportable" en el derecho. Muy utilizada en humanos, es el paciente quien la rellena. En veterinaria, el observador traza una marca en la línea indicando la cantidad de dolor percibido y se mide la distancia desde el extremo sin dolor. Es fácil de usar para seguir la tendencia del dolor, pero tiene mayor variabilidad entre observadores que la escala descriptiva simple, por lo que la evaluación debe ser realizada por un observador experimentado. Escala de dolor compuestas multidimensionales La mayoría de las escalas previamente descritas se diseñaron para evaluar el dolor agudo y solo consideran el componente sensorial descriptivo. Estas escalas no investigan las posibles dimensiones afectivas y cognitivas de la experiencia del dolor en los animales. Las herramientas que evalúan la experiencia multidimensional del dolor suponen una mejora significativa respecto a las escalas unidimensionales simples. Uno de los principales objetivos de la validación de estas escalas es determinar un punto de corte en el que la mayoría de los veterinarios coincidan en que un paciente requiere analgesia de rescate adicional. Escala de dolor de la Universidad de Melbourne La escala de dolor de la Universidad de Melbourne se desarrolló como una escala de calificación numérica multidimensional para evaluar el dolor postoperatorio en perros, basándose en evaluaciones del comportamiento y signos fisiológicos. La escala consta de seis categorías derivadas de la revisión de la literatura sobre la medición del dolor en perros: variables fisiológicas, respuestas a la palpación, actividad, estado mental, postura y valoración. El evaluador indica qué elemento de la escala de calificación numérica en cada 21 categoría describe mejor al animal, y se asigna una ponderación a cada elemento según la percepción subjetiva de la cantidad de dolor que implica. Algunos comportamientos o parámetros se consideran más importantes. Esta escala es mucho más precisa que la escala visual análoga, la escala descriptiva simple y la escala de calificación numérica, y su precisión se debe a los numerosos factores evaluados. El uso de esta escala requiere conocer el comportamiento del paciente antes de la anestesia y la cirugía. Escala del dolor agudo en caninos La Universidad de Colorado ha desarrollado escalas específicas para gatos y perros. En estas escalas, el observador selecciona los descriptores más adecuados en cuanto a signos psicológicos y de comportamiento, y la respuesta a la palpación. Un tercer componente, la atención al cuerpo, se evalúa con una escala descriptiva simple. La disminución de las casillas marcadas sugiere una valoración global del dolor entre 0 y 4, que puede aumentarse o moderarse en un cuarto o medio punto si la distribución de las casillas marcadas se superpone a dos puntuaciones de dolor. 2.7 Protocolo Anestésico La anestesia siempre conlleva un riesgo para el paciente, siendo mayor en el campo veterinario comparado con la anestesiología humana. Para reducir la tasa de morbi- mortalidad asociada a la anestesia, es crucial evaluar a los pacientes antes del procedimiento y determinar cuál protocolo anestésico proporcionará los mejores resultados, qué tipo de monitoreo es necesario y prever posibles complicaciones. Los protocolos en las clínicas veterinarias son un conjunto de normas y medidas de bioseguridad diseñadas para proteger al personal, al paciente y a otras personas (Luna, 2020). Algunas razones por lo que los protocolos deben estar por escrito son: • Estructurar el protocolo: Facilita a todo el equipo tener claro cómo actuar en situaciones determinadas y evita improvisaciones. • Organización previa: Asegura que las actividades planificadas se realicen de manera adecuada. 22 • Compromiso del equipo: Un protocolo establecido genera compromiso y aumenta la probabilidad de que se cumpla. • Facilidad de actualización: Un protocolo escrito es más fácil de modificar en el futuro, permitiendo ajustes según las necesidades prácticas (Philippe et al., 2022). 2.7.1 Inducción El principal objetivo de la medicación preanestésica es calmar o inmovilizar a un animal lo suficiente como para permitir procedimientos como la canalización intravenosa, reduciendo al máximo el estrés antes y durante la inducción a la anestesia. Además, contribuye a una anestesia equilibrada, disminuyendo la dosis de otros agentes anestésicos necesarios para la inducción y el mantenimiento de la anestesia. Maleato de Acepromacina La acepromacina es la única fenotiazina autorizada como medicación preanestésica en la clínica de pequeños animales. Se metaboliza en el hígado y tiene una acción prolongada de al menos 6 horas, por lo que no se recomienda su uso en animales con función hepática alterada. El inicio de la acción después de la administración de acepromacina es relativamente lento en comparación con los agonistas alfa-2 adrenérgicos. El animal debe permanecer en reposo durante 30 a 40 minutos después de la administración intramuscular, o 10 a 15 minutos después de la inyección intravenosa. La inducción se realiza con una dosis de maleato de acepromacina al 1% (0.055 a 0.11 mg/kg IM). 2.7.2 Anestésicos inyectables Los anestésicos inyectables se utilizan para la inducción de la anestesia, seguida de mantenimiento con un agente anestésico inhalatorio, o como agente único para inducir y mantener la anestesia general. Para procedimientos menores y de corta duración, una sola inyección es suficiente. La administración repetida de bolos o la infusión de un anestésico en combinación con analgésicos define la anestesia totalmente intravenosa. La infusión de ciertos anestésicos también puede utilizarse para controlar convulsiones y espasmos musculares, o para proporcionar sedación a largo plazo 23 en unidades de cuidados intensivos. Con algunos analgésicos inyectables, hay una transición dependiente de la dosis desde la sedación hasta la anestesia general. Las dosis de anestésicos requeridas para la inducción y mantenimiento dependen de la medicación preanestésica administrada y de la sensibilidad del paciente. Para evitar la sobredosis, se recomienda administrar una dosis lenta y gradual de la cantidad calculada de anestesia. Para una correcta administración de anestésicos potentes, es crucial elegir una jeringa del tamaño apropiado; utilizar pequeños volúmenes en una jeringa grande inevitablemente conduce a una sobredosificación. 2.7.3 Mantenimiento Agentes disociativos • Hidrocloruro de ketamina Es un derivado de la fenciclidina, es un polvo cristalino blanco. La ketamina atraviesa rápidamente la barrera hematoencefálica. Después de la inyección intravenosa, tiene un inicio de acción de 30 a 90 segundos en gatos y perros. Tras la inyección intramuscular, se distribuye rápidamente a los tejidos del organismo, alcanzando el pico del efecto anestésico en 10 a 15 minutos. La ketamina induce una alteración dependiente de la dosis en la actividad del sistema nervioso central, llevando a un estado disociativo caracterizado por analgesia profunda y amnesia, con mantenimiento de los reflejos ocular, laríngeo, faríngeo, auricular y podal, y un aumento del tono muscular. Este estado de catalepsia se debe a la inhibición de las vías talamocorticales y la estimulación del sistema límbico. Tras un bolo intravenoso, la ketamina se distribuye rápidamente y presenta una semivida de eliminación de aproximadamente 60 minutos en perros y 80 minutos en gatos. La recuperación después de una dosis única se produce principalmente por redistribución. La ketamina tiene una alta extracción hepática y se metaboliza rápidamente en el hígado. El metabolito principal, la norketamina, tiene entre un 10% y un 30% de la potencia anestésica de la ketamina. La ketamina tiene efectos cardiovasculares específicos. A diferencia de otros anestésicos intravenosos, estimula el sistema cardiovascular, resultando en un 24 aumento de la frecuencia cardíaca, la presión arterial y el gasto cardíaco. Estos cambios hemodinámicos se asocian a un aumento del trabajo miocárdico y del consumo de oxígeno. En un corazón sano, el suministro de oxígeno al miocardio puede aumentar a través de la vasodilatación coronaria y el aumento del gasto cardíaco. La ketamina tiene efectos mínimos sobre el impulso respiratorio central. Después de la administración en bolo de una dosis de inducción, se produce una depresión respiratoria inicial, a menudo seguida de un patrón respiratorio llamado apneústico, caracterizado por una retención periódica de la respiración en la inspiración. La dosis de ketamina es de 5 a 10 mg por kilogramo de peso, combinada con xilacina a 1 mg por kilogramo de peso, mezclados en una misma jeringa, proporcionando una duración de la intervención quirúrgica de 20 a 30 minutos. • Xilacina La xilacina pertenece al grupo químico de las 1,3-tiacinas. Es un potente sedante, ansiolítico, analgésico no narcótico y relajante muscular. Se absorbe, metaboliza y elimina rápidamente; el 70% de su excreción es renal y el 30% restante se inactiva en el hígado. Inhibe la hormona antidiurética, produciendo marcada diuresis. Provoca emesis en un 90% de los gatos y un 50% de los perros entre 2 y 5 minutos después de su administración intramuscular, siempre que haya contenido estomacal y que no se haya administrado previamente un fenotiazínico. La actividad sedante y analgésica de la xilacina se relaciona con la depresión del sistema nervioso central. El efecto relajante muscular se debe a la inhibición de la transmisión intraneural de impulsos en el sistema nervioso central. Estos efectos se manifiestan a los 10 a 15 minutos después de la aplicación intramuscular y a los 3 a 5 minutos después de la aplicación intravenosa. Genera un estado de sueño cuya profundidad depende de la dosis, manteniéndose generalmente durante 1 a 2 horas, mientras que la analgesia dura de 15 a 30 minutos. El efecto relajante muscular de acción central causa la relajación de la musculatura esquelética, complementándose con la sedación y la analgesia. Bajo la influencia de la xilacina, la frecuencia respiratoria se reduce de forma similar a lo que ocurre en el sueño natural. Igualmente, se disminuye la frecuencia 25 cardíaca y se puede producir un cambio transitorio en la conductividad del músculo cardíaco (bloqueo aurículo-ventricular parcial), similar al observado en condiciones sin medicamentos. La administración intravenosa de xilacina provoca un aumento transitorio de la presión arterial, seguido de una ligera disminución. Para intervenciones dolorosas, es conveniente utilizar anestesia por infiltración regional. En estos casos, el animal difícilmente puede mantenerse de pie. Algunos ejemplos de estas intervenciones incluyen la amputación de cuernos, pezones y pezones accesorios, suturas de ubre, castración, exploración y tratamiento del pene, amputación de pezuñas, cauterizaciones cutáneas, cesárea con el animal derribado, enucleaciones y extracciones dentarias. • Atropina La atropina es un agente anticolinérgico utilizado en la anestesiología para reducir las secreciones salivales y bronquiales, prevenir la bradicardia y disminuir el riesgo de broncoespasmo. Además, la atropina puede mejorar la estabilidad hemodinámica durante la anestesia, al bloquear los efectos del sistema nervioso parasimpático. Su administración se realiza antes del procedimiento anestésico para preparar al paciente y minimizar posibles complicaciones. 2.8 Protocolo de cirugía del aparato genital y reproductor La cirugía reproductiva abarca una variedad de técnicas diseñadas para alterar la capacidad del animal de reproducirse, ayudar en el parto o tratar enfermedades de los órganos reproductores. Las principales indicaciones de estas cirugías incluyen limitar la reproducción, tratar o prevenir tumores inducidos por hormonas reproductoras. La esterilización también se realiza para evitar o alterar conductas anómalas y reconstruir tejidos traumatizados, enfermos o malformados. El diagnóstico del aparato reproductor se basa en la anamnesis, signos clínicos, exámenes físicos, diagnóstico por imagen, endoscopia, citología, microbiología, ensayos hormonales, hematología, perfil bioquímico sérico, uroanálisis y otras pruebas de laboratorio. 2.8.1 Ovariohisterectomía en caninas La razón más común para realizar una ovariohisterectomía es evitar el estro y la 26 descendencia no deseada. Otras razones incluyen la prevención de tumores mamarios, anomalías congénitas y el tratamiento de piometras, metritis, neoplasias, traumatismos, torsión uterina, prolapso uterino, involución placentaria, prolapso vaginal e hiperplasia vaginal. La ovariohisterectomía es un procedimiento quirúrgico que implica la extracción de los ovarios y el útero. Gracias a los avances científicos en la medicina veterinaria, hoy en día existen diversos métodos para realizar la esterilización de mascotas. Las cirugías pueden realizarse de manera abierta o tradicional, o mediante técnicas mínimamente invasivas como la laparoscopia. Estos procedimientos se llevan a cabo bajo anestesia general y generalmente se recomienda realizarlos a los 6 meses de edad, aunque pueden efectuarse en cualquier etapa reproductiva del animal. Procedimiento Quirúrgico: 1. Rasurar y preparar el abdomen ventral desde el xifoides hasta el pubis. 2. Identificar el ombligo y dividir visualmente el abdomen en tercios. 3. Hacer una incisión caudal al ombligo en el tercio craneal del abdomen caudal. 4. En perros con tórax profundo o útero agrandado, extender la incisión craneal o caudalmente. 5. En cachorros prepúberes, realizar la incisión en el tercio medio del abdomen caudal para facilitar la ligadura del cuerpo uterino. 6. Pincelar la línea alba o la fascia del recto ventral, y realizar una incisión punzante en la cavidad abdominal. 7. Extender la incisión craneal y caudalmente con tijera de Mayo. 8. Elevar la pared abdominal izquierda sujetando la línea alba o la fascia del recto externo con pinzas atraumáticas. 9. Deslizar el gancho para ovariohisterectomía medialmente para alcanzar el cuerpo uterino con ligamento ancho o redondo, y elevar el abdomen suavemente. 10. Confirmar anatómicamente la identificación del cuerpo uterino siguiendo hasta la bifurcación uterina o hasta el ovario. 27 11. Mediante tracción caudal y medial sobre el cuerpo uterino, identificar el ligamento suspensor. 12. Estirar o romper el ligamento suspensor cerca del riñón sin dañar los ovarios para permitir la extirpación del ovario. 13. Hacer un orificio en el ligamento ancho, caudal al pedículo ovárico. 14. Colocar una o dos pinzas de Rochester a través del pedículo ovárico proximales al ovario y una a través del ligamento propio del ovario. 15. Realizar una ligadura en ocho proximal a las pinzas del pedículo ovárico usando sutura reabsorbible. 16. Retirar una pinza o abrirla para permitir la compresión del pedículo, y realizar una segunda ligadura circular proximal a la primera para verificar la hemostasia. 28 CAPÍTULO III 3. MARCO METODOLÓGICO 3.1 Ubicación de la investigación • Localización de la investigación La investigación se realizó en el sector el Centro parroquia Huachi Grande perteneciente al cantón Ambato provincia de Tungurahua • Situación geográfica y edafoclimática Altitud 2530 msnm Latitud 01° 39' 00'' S Longitud 78° 58' 60'' W Temperatura máxima 18 ºC Temperatura mínima 10 ºC Temperatura media anual 14 °C Humedad relativa media anual 75% Precipitación media anual 632 cm • Zona de vida De acuerdo con el sistema de clasificación de zonas de vida según Leslie Holdridge (1978) el sitio del experimento corresponde a bosque húmedo montano bajo (bh- MB). 3.2 Metodología 3.2.1 Material en estudio 30 caninas domesticas Extracto etílico de la achupalla (EEA). Extracto etílico de propóleo (EEP). 29 3.2.2. Factores en estudio Factor A: A1: 30 caninas domesticas Factor B: Extracto etílico de la achupalla y propóleo B1: Extracto etílico de la achupalla (EEA). B2: Extracto etílico de propóleo (EEP). B3: Testigo absoluto 3.2.3. Tratamientos Tratamientos objeto en estudio. Tratamientos Descripción T1 Extracto etílico de la achupalla (EEA). T2 Extracto etílico de propóleo (EEP). T3 Testigo o control (TC). 3.2.4. Descripción técnica del ensayo Número de localidades: 1 Número de tratamientos: 3 Número de repeticiones: 1 Número de unidades experimentales: 10 Número de animales en total: 30 3.2.5. Tipo de diseño experimental o estadístico Para el desarrollo del estudio de tipo experimental se aplicó un Diseño Completamente al Azar (DCA 3x10) con tres tratamientos replicados 10 veces cada 30 uno y distribuidos de forma completamente al azar en las unidades experimentales (caninos hembras para esterilización). Por otro lado, también se analizó el efecto generado por la variable “Edad” de los cánidos evaluados, para ello se aplicó un análisis ANOVA-de 2 vías o 2 factores para conocer la significancia de los efectos individuales y de la interacción entre el tratamiento y la variable edad. Tabla 4. ANOVA de un factor intergrupos utilizado para determinar la presencia o no de diferencias estadísticas significativas entre tratamientos en función de las variables medidas. Fuente de variación Suma de Cuadrados GL Sumas de Cuadrados medios F p-valor Tratamientos Error Tratamientos Error k-1 n-k CMTratamientos CMError SCTr/CM Error Total SCTotal n-1 CMTotal 3.2.6. Manejo de la investigación Obtención del material vegetal Primeramente, se obtuvo el material vegetal de la planta Achupalla y el propóleo de colmenas de abejas nativas de la zona de estudio, los cuales fueron lavados cuidadosamente con agua destilada. Posteriormente, se realizó un raspado de la planta de Achupalla; luego, se pesó este contenido similar al de alcohol etílico considerando que un mililitro de alcohol etílico equivale 0,73 g (Benavidez, 2020). Se efectuó maceración del contenido obtenido por un tiempo de 15 días, con el uso de un recipiente de color ámbar, luego, se procedió a realizar la filtración utilizando papel Whatman, que permitió separar las impurezas. Finalmente, se colocó en frascos de 50 ml con aspersores para facilitar la aplicación en las heridas de los pacientes (caninas hembras en proceso posterior a la esterilización). 31 Las muestras del macerado, adicionalmente, fueron enviadas a la red de Laboratorios de Investigación y Vinculación de la Universidad Estatal de Bolivar para la realización de la prueba espectrometría de masas. Obtención de las unidades experimentales Las unidades experimentales fueron dadas por un (1) canino; en cada grupo experimental se dispuso de 10 hembras (30 en total), los cuales fueron sometidos a esterilización en el cantón Ambato, en la parroquia Huachi Grande. Aplicación de los tratamientos Los extractos etílicos de la achupalla y de propóleo fueron aplicados en apósitos (gasas) impregnados de dichos extractos y fueron cambiados dos veces al día, una por la mañana y otra, en la tarde. Protocolo de dosificación de los tratamientos Se dividieron las 30 hembras Caninas en tres grupos de diez (10) animales cada uno. El primer grupo de 10 (diez) animales fueron sometidos a adición al postoperatorio el extracto etílico de achupalla. En el grupo número dos (2) se aplican el postoperatorio más la adición del extracto etílico de propóleo y finalmente en tercer grupo únicamente se aplicó postoperatorio. 3.2.7. Métodos de evaluación y datos tomados • Edad: Es una variable cuantitativa que nos sirve para delimitar las siguientes categorías. 6 – 11 meses 12 – 17 meses 18 – 24 meses Peso: Esta variable cuantitativa nos sirve para delimitar en categorías el peso de los pacientes evaluados. 14kg-20 kg 8kg-13kg 32 2 kg-7 kg • Longitud de la herida: Fue determinada con la ayuda un calibrador de Vernier, tomándose desde un extremo al otro extremo de la incisión de la cirugía realizada • Tiempo de cicatrización: Se determinó mediante el seguimiento de la herida quirúrgica realizada, variable que fue medida cada 48 horas, hasta el cierre completo de la herida. • Dolor: Es una escala que permite medir la intensidad de dolor en las caninas. Variable cualitativa aplicada a la escala del dolor de acuerdo al comportamiento de tensión del paciente. • Inflamación: Los primeros 3-7-9-11 días son la fase de retraso de la cicatrización, ya que predominan la inflamación, desbridamiento y la herida no logra una resistencia apreciable. 33 80 70 60 50 40 30 6 - 11 12 - 17 18-24 CAPÍTULO IV 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Tabla 5. Unidades experimentales (cánidos) clasificados en base a su edad Edad (meses) Frecuencia Frecuencia Porcentual(%) 6-11 (Grupo 1) 20 66,67 12-17 (Grupo 2) 4 12,33 18-24 (Grupo 3) 6 20 TOTAL 30 100 Nota: Los datos se analizaron agrupando los cánidos en grupos Figura 1. Gráfico de barras de la edad de las unidades experimentales Nota: La población mayoritaria está entre 6-11meses Análisis e Interpretación Al analizar la edad de los pacientes en el presente estudio, se observó que la 34 categoría más frecuente correspondió a animales de 6 a 11 meses, con un total de 20 individuos, lo que representó el 66,67 % de la población experimental. La siguiente categoría más común fue la de 18 a 24 meses, con 6 animales (20 %), mientras que la menor frecuencia se registró en el grupo de 12 a 17 meses, con 4 animales (12,33 %). En total, se trabajó con 30 animales experimentales, cuya edad promedio fue de 10,78 meses, con una desviación estándar de 3,69 meses. La edad mínima registrada fue de 6 meses y la máxima de 24 meses. Cabe destacar que, en los animales de menor edad, la cicatrización de las heridas resultó más rápida, efecto que se atribuye a la aplicación de la achupalla, evidenciando su eficacia en la recuperación de los pacientes más jóvenes. Valarezo, (2023) en su investigación titulada “Uso de propóleo como cicatrizante en ovariohisterectomías de hembras caninas (Canis familiaris)” concluye que la ovariohisterectomia a una edad temprana, es el mejor método preventivo, donde las de mayor presentación son piometra, quistes ováricos y tumores mamarios, a diferencia de los trastornos congénitos que se presentan en pocos casos clínicos. En la investigación citada, se evidencia una analogía en el grupo etario de los pacientes probados. Existe una tendencia común entre los propietarios de realizar la (OVH) a una edad temprana, probablemente originados por la preocupación de prevenir diversas patologías. Tabla 6. Categorización de los cánidos en grupos en unción de rangos de peso PORCENTAJE DE FRECUENCIA Pesos/kg Frecuencia Frecuencia Porcentual (%) 14-20 (Grupo C) 10 33,40 8-13 (Grupo B) 8 26,67 2 -7 .(Grupo A) 12 40,00 TOTAL 30 100 35 45 40 35 30 25 20 15 14 - 20 8 - 13 2- 7 Figura 2. Gráfico de barras de la distribución de pesos de los cánidos de estudio Nota: La población predominante está entre los 2-7 kg de PV Análisis e Interpretación El análisis de la frecuencia porcentual del peso en los pacientes muestra que la categoría más representada fue la de 2-7 kg, con un 40% del total, lo que indica una alta proporción de pacientes de peso ligero. Le sigue la categoría de 14-20 kg con un 33,4%, reflejando una presencia considerable de pacientes de mayor peso. Por último, la categoría intermedia de 8-13 kg representó el 26,67%, siendo la menos frecuente en la muestra. Cabe destacar que en estos animales de menor peso se observó una respuesta más favorable a la aplicación del aceite de achupalla, manifestándose en una cicatrización más rápida y eficiente de las heridas. Chonillo, (2020), en su investigación titulada “Eficacia del ozono en la cicatrización de heridas postquirúrgicas no contaminadas en perros y gatos de la ciudad de Guayaquil”, reportó que los pacientes sometidos a ovariosterectomía presentaron un peso entre 3 y 37 kilogramos, evaluándose además la eficacia analgésica de infusiones intraoperatorias en el posoperatorio. De forma similar, Gómez et al. (2020) registraron que el 37,2 % de las perras analizadas en su estudio pesaban menos de 10 kg. Estos hallazgos coinciden con los resultados obtenidos en el presente trabajo, donde se destaca que el rango de peso, en relación con la edad de cada canina, constituye 36 un factor relevante. Este patrón sugiere que dicho rango varía conforme al desarrollo físico de las pacientes, lo que resulta fundamental para optimizar su atención clínica y el manejo postquirúrgico. Tabla 7. Evolución de la longitud de la herida en unción del tiempo (1-15dias) Día de Extractos n Media (cm) Desviación CV (%) medición etílicos estándar Achupalla 10 2,1 0 0 Día 1 Propóleo 10 2,1 0 0 Testigo 10 2,1 0 0 Achupalla 10 1,08 0,16 14,69 Día 7 Propóleo 10 0,81 0,26 32,19 Testigo 10 1,05 0,29 27,66 Achupalla 10 0,77 0,08 10,69 Día 11 Propóleo 10 0,56 0,16 29,03 Testigo 10 0,87 0,10 10,94 Achupalla 10 0,47 0,14 30,55 Día 15 Propóleo 10 0,30 0,10 32,40 Testigo 10 0,58 0,09 15,61 37 2,5 2 1,5 1 0,5 0 Día 1 Día 7 Día 11 Día 15 Figura 3. Gráfico de barras de la longitud promedio de la herida en función del tiempo Análisis e Interpretación De acuerdo a los datos obtenidos se determinó en el día 1, todos los tratamientos (Achupalla, Propóleo y Testigo) presentaron un tamaño inicial de herida promedio idéntico (2,1 cm), sin variabilidad entre los datos demostrando una distribución homogénea inicial y condiciones controladas. A partir del día 7, se observa una reducción progresiva del tamaño de la herida en los tres grupos, con diferencias en la eficacia cicatrizante de cada tratamiento, achupalla mostró una disminución constante del tamaño de la herida, alcanzando una media de 0,47 cm al día 15, lo que indica una cicatrización progresiva pero más lenta en comparación con Propóleo el cual presentó el mayor efecto cicatrizante, con una disminución más pronunciada del tamaño de la herida. Al día 15, registró un tamaño promedio de 0,30 cm, el más bajo entre los tratamientos. Este comportamiento sugiere una mayor efectividad del propóleo en la regeneración del tejido. El grupo Testigo mostró una reducción intermedia del tamaño de la herida, alcanzando 0,58 cm al día 15, evidenciando una cicatrización más lenta que en los tratamientos con extractos naturales. En cuanto al coeficiente de variación (CV), se observó un aumento en la dispersión de los datos con el paso de los días, especialmente en el grupo Propóleo, que en días como el 7, 11 y 15 presenta CV superiores al 30%, lo cual sugiere una mayor variabilidad en la respuesta individual de los animales al tratamiento, a pesar de su mayor eficacia promedio. 38 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 T1 T2 T3 Ramos, 2020 en su investigación denominada “Comparación del efecto de cicatrización en caninos (canis lupus familiaris) sometidos a ovariohisterectomía utilizando citrato de plata, propóleo y savia de huampo (Croton lechleri)” reporto un tamaño de herida inicial promedio de 3 cm y su promedio final al día de cicatrización fue en el día 15 con el tratamiento a base de savia de huampo. Tabla 8. Prueba de Tukey (5 % de error) tamaño de la herida en el día 3 Semana de medición Figura 4. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 3 Análisis e Interpretación Para el tercer día de medición, el extracto etílico de achupalla demostró ser el tratamiento más eficaz en la reducción de la longitud de la herida. Como se muestra en la Tabla 8, la longitud promedio de la herida en el grupo de achupalla fue de 1,39 cm, una reducción significativa frente al grupo testigo (1,81 cm) y al grupo de propóleo (1,73 cm). Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 1,39 a Día 3 Propóleo 1,73 b Testigo 1,81 b Promedio 1,64 39 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 T1 T2 T3 Fernández, (2021) en su investigación sobre las “Técnicas de ovariohisterectomía en la especie canina (Canis lupus familiaris)” en el día 3 de su estudio reporto un promedio de herida de (1,92) un valor similar al de la investigación expuesta estos hallazgos indican que la achupalla actúa de manera más efectiva en las etapas iniciales de la cicatrización, mientras que el propóleo ejerce su efecto beneficioso de forma más gradual y sostenida a lo largo del tiempo. Tabla 9. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 5 Semana de medición Figura 5. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 5 Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 1,22 a Día 5 Propóleo 1,42 b Testigo 1,54 b 40 Análisis e Interpretación En el quinto día de medición el tamaño de la herida evaluado en los tres grupos de perras tratadas con distintos extractos etílicos (achupalla, propóleo y testigo) muestra que el tratamiento con Achupalla (1,22 cm) resultó en una reducción significativa del tamaño de la herida en comparación con los otros dos grupos (Propóleo: 1,42 cm y Testigo: 1,54 cm). El menor tamaño de la herida en el grupo tratado con Achupalla (1,22 cm) indica que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con Propóleo y el testigo al quinto día de medición. Guzmán, (2020) en su estudio sobre la aplicación de fitoterapéuticos en heridas cutáneas en caninos, los extractos vegetales mostraron una reducción significativa en el tamaño de la herida hacia el quinto día, alcanzando promedios entre 1,40 y 1,60 cm. En el presente estudio, tanto el propóleo (1,42 cm) como la achupalla (1,22 cm) presentan valores acordes a lo reportado por Guzmán, lo que sugiere que en esta etapa ambos tratamientos comienzan a mostrar efectos visibles, siendo la achupalla más efectiva en esta fase inicial del proceso de reparación tisular Tabla 10. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 7 Semana de medición Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 1,08 b Día 7 Propóleo 0,81 a Testigo 1,25 b 41 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 T1 T2 T3 Figura 6. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 7 Análisis e Interpretación A los siete días posoperación los valores del tamaño de la herida (Propóleo: 0,81 cm, Achupalla: 1,08 cm, Testigo: 1,25 cm) sugiere que el tratamiento con Propóleo resultó en una reducción significativa del tamaño de la herida en comparación con los demás grupos. El menor tamaño de la herida en el grupo tratado con Propóleo (0,81 cm) indica que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con Achupalla y el grupo Testigo. Martínez, (2020) al evaluar productos naturales en la cicatrización de heridas quirúrgicas en pequeños animales, destacaron que el día 7 marco un punto de inflexión, donde los productos con propiedades antiinflamatorias a base de matico comienzan a destacar por su efecto sostenido con un promedio de reducción de herida de (0,75 cm) este resultado se debe a los efectos Fito terapéuticos que contiene el matico en la aplicación de heridas. 42 1,2 1 0,8 0,6 T1 T2 T3 Tabla 11. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 9 Semana medición Figura 7. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 9 Análisis e Interpretación Los resultados obtenidos a los nueve días posoperación muestra los valores del tamaño de la herida (propóleo: 0,70 cm, achupalla: 1,00 cm, testigo: 1,06 cm) donde se evidencia que el tratamiento con propóleo resultó en una reducción significativa del tamaño de la herida en comparación con los otros dos grupos. El menor tamaño de la herida en el grupo tratado con Propóleo (0,70 cm) indica que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con achupalla y el testigo. Ramos, (2020) en su investigación sobre bioproductos de origen apícola, señaló que Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 1,22 a Día 5 Propóleo 1,42 b Testigo 1,54 b Promedio 1,39 43 5 4 3 T1 T2 T3 entre los días 7 y 10 de tratamiento, el propóleo alcanza su mayor efectividad al favorecer la proliferación celular y la revitalización. En comparación el presente estudio registró el valor más bajo en el grupo tratado con propóleo (0,70 cm), comparado con achupalla (1,00 cm) y testigo (1,06 cm), lo que refuerza su potencial como cicatrizante de acción progresiva. Estos resultados coinciden con los postulados de Ramos, quienes atribuyen estas propiedades a los flavonoides y compuestos fenólicos presentes en el propóleo. Tabla 12. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 11 Semana Figura 8. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 11 Análisis e Interpretación A los 11 días de la operación de perras, los valores de la longitud de la herida (propóleo: 0,56 cm, achupalla: 0,77 cm, testigo: 0,87 cm) demuestran que el tratamiento con Propóleo resultó en una reducción significativa del tamaño de la herida en comparación con los otros dos grupos (achupalla y testigo). El menor Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 0,78 b Día 11 Propóleo 0,56 a Testigo 0,87 b 44 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 T1 T2 T3 tamaño de la herida en el grupo tratado con propóleo (0,56 cm) confirman que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con achupalla y el testigo. López & Herrera, (2022) en un estudio sobre agentes antimicrobianos naturales aplicados a la medicina veterinaria, concluyeron que el día 11 de tratamiento, los extractos con efectos combinados antimicrobianos y antiinflamatorios del propóleo enriquecido logran una aceleración marcada en la contracción de la herida. Estos hallazgos similares con la investigación expuesta respaldan la fitoterapia del propóleo siendo particularmente efectiva en etapas intermedias de la cicatrización. Tabla 13. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 13 Semana Figura 9. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 13 Análisis e Interpretación Los resultados a los 13 días posoperación del tamaño de la herida en los extractos etílicos (propóleo: 0,45 cm, achupalla: 0,69 cm, testigo: 0,73 cm) evidencia que el tratamiento con propóleo resultó en una reducción significativa del tamaño de la Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla 0,70 b Día 13 Propóleo 0,45 a Testigo 0,73 b 45 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 T1 T2 T3 herida en comparación con los otros dos grupos. El menor tamaño de la herida en el grupo tratado con propóleo (0,45 cm) indica que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con achupalla y el testigo. Según Guzmán (2020), en su estudio sobre el uso de fitoterapéuticos en heridas cutáneas en caninos con extractos vegetales de la cúrcuma mostraron una reducción significativa en el tamaño de la herida hacia el día 14, con un promedios de 0,80 cm este resultado demuestra que la cúrcuma actúa de forma más efectiva en esta fase inicial del proceso de reparación tisular, posiblemente gracias a sus compuestos antiinflamatorios como la curcumina. Tabla 14. Prueba de Tukey al 5 % longitud de la herida en el día 15 Semana de medición Figura 10. Promedio de la variable longitud de la herida en el día 15 Extractos etílicos Longitud de la herida (cm) Letras Achupalla Día 15 Propóleo 0,47 0,30 b a Testigo 0,58 b 46 Análisis e Interpretación De acuerdo a los datos obtenidos del día 15 los valores del tamaño de la herida (propóleo: 0,30 cm, achupalla: 0,47 cm, testigo: 0,58 cm) demuestran que, el tratamiento con Propóleo resultó en una reducción significativa del tamaño de la herida en comparación con los otros dos grupos (achupalla y testigo). El menor tamaño de la herida en el grupo tratado con propóleo (0,30 cm) confirman que este extracto etílico tiene una mayor eficacia en la reducción del tamaño de la herida en comparación con achupalla y el testigo. Morales.C, (2021) reportaron que en el día 15, los extractos naturales con propiedades regenerativas prolongadas, como la sábila, mantienen una acción constante hasta las últimas fases de cicatrización, con mínimas formaciones cicatriciales este comportamiento sugiere que la sábila no solo acelera la reparación del tejido, sino que también mejora la calidad de la cicatrización final, similar a la investigación expuesta. Figura 11. Tiempo de cicatrización Análisis e Interpretación La Figura 11 revela una tendencia decreciente en el tamaño de las heridas a lo largo de 15 días para los tres grupos de tratamiento. Notablemente, el grupo tratado con 47 extracto etílico de propóleo exhibió la reducción más rápida y consistente, sugiriendo una eficacia superior en la aceleración del proceso de cicatrización. A partir del día 5, la ventaja del propóleo se hizo más evidente, culminando en el menor tamaño de herida al final del período de estudio. El extracto de achupalla también demostró ser eficaz, logrando una reducción significativa. Estos hallazgos se alinean con diversas investigaciones que respaldan las propiedades cicatrizantes del propóleo. Un estudio de Benavides-Wolmers et al. (2020) reportó que extractos etílicos de propóleo al 30% y 50% lograron la cicatrización completa de heridas en cabras en 28 días. De manera similar, Espín (2020) concluyó que una preparación a base de manzanilla, propóleo y clavo de olor favorecía la sanación en caninos, destacando al propóleo como un producto natural seguro y sin efectos secundarios adversos. Asimismo, una investigación de Puglla y Rubio (2022) encontró que una pomada de matico y propóleo obtenía excelentes resultados en la reducción del tiempo y tamaño de la herida, aunque sin diferencias estadísticamente significativas entre ambos componentes. Por otro lado, la literatura presenta resultados mixtos. Un estudio de Moposita (2020) sobre la cicatrización en perros post-ovariohisterectomía no encontró diferencias significativas entre distintas concentraciones de tintura de propóleo (10%, 20% y 30%) y el grupo control en cuanto a tamaño de herida o tiempo de cicatrización. Además, una investigación en Guatemala realizada por Orellana (2020) observó un efecto ligeramente más favorable de la miel (0,63 cm²) en comparación con el propóleo (0,57 cm²) en la reducción de heridas en perros. En cuanto a la achupalla, los resultados del presente estudio son respaldados por la investigación de Esquivel (2020), quien evidenció que un ungüento a base de esta planta mejoraba notablemente la cicatrización en conejos post-castración, reduciendo eficazmente el rubor y la lesión de las heridas. 48 Figura 12 Intervalos de confianza de las heridas al día 15 en relación con las variables edad y el tratamiento Análisis e Interpretación Al realizar el estadístico de ANOVA-2 factores, no se evidenció un efecto significativo de la variable “Edad” (P<0,05) en relación a los resultados obtenidos en el proceso de cicatrización al día 15 del estudio, al igual que una ausencia de significancia en la interacción entre la variable edad y los tratamientos (p-value 0.8053), de esta manera se pudiese interpretar que la edad de los cánidos evaluados en la presente investigación (de 1, 2 y 3 años) no influye directamente en el proceso de remodelación tisular a la hora de reestablecer la pérdida de continuidad del tegumento común como consecuencia de una herida quirúrgica, por lo que se recomendaría analizar el mismo proceso inflamatorio en edades más tempranas o más avanzadas para evidenciar la influencia de un sistema inmunológico inmaduro o deteriorado por la edad. Los resultados estadísticos son corroborarles en la figura 12, donde los intervalos permanecen superpuestos, interpretándose como ausencia de diferencia significativa, no obstante, las cicatrices presentes a los 15 días en el grupo de los cánidos de 3 años parecen mostrar una menor variabilidad en la evolución del tamaño de la herida. 49 Figura 13 Intervalos de confianza de las heridas al día 15 en relación con las variables peso y el tratamiento Análisis e Interpretación Al realizar el estadístico de ANOVA-2factores, no se evidenció un efecto significativo de la variable “Peso” (p-value 0.2550) en relación a los resultados obtenidos en el proceso de cicatrización al día 15 del estudio, al igual que una ausencia de significancia en la interacción entre la variable peso y los tratamientos (p-value 0.4375), de esta manera se pudiese interpretar que el peso de los cánidos evaluados en la presente investigación (A: 0-4.99kg; B: 5-9.99kg; C: 10-14.99kg; D: 15-20kg) no tienen un efecto significativo en el proceso de cicatrización ni tampoco se evidencia que la variable tratamiento, en conjunto con el peso de los cánidos, interactúan de tal manera que mejora o empeora el proceso de cicatrización. 50 Tabla 15. Escala de dolor en el primer y tercer día de medición Escala de medición (categorías) (%) Achupalla Intenso 100 Día 1 Propóleo Intenso 100 Testigo Intenso 100 Achupalla Leve 100 Día 3 Propóleo Leve 100 Testigo Leve 90 Testigo Moderado 10 Figura 14 Frecuencia del dolor en perras en bajo el efecto de extractos etílicos al primer y tercer días de efectuada la cirugía. El propóleo, conocido por sus múltiples propiedades terapéuticas y biológicas, se ha utilizado ampliamente en la medicina veterinaria, producto natural que se destaca como aditivo nutricional beneficioso que promueve la salud general de los animales (Montenegro, 2024) y que contribuyen a disminuir el dolor de perras en 51 proceso de postoperatorio, resultado similar a lo alcanzado en el presente investigación. Cromatograma Análisis e Interpretación Como se puede observar en el Anexo 14, en el cromatograma se pudieron identificar 29 compuestos presentes en el macerado de Achupalla, de los cuales, uno de ellos ha sido caracterizado ampliamente por sus propiedades antiinflamatorias como lo es el compuesto Eucalyptol, también descrito como 1,8- cineole. Este compuesto ha sido descrito por sus propiedades antioxidantes y antiinflamatorias, permitiendo atenuar la pancreatitis aguda (PA) utilizando un modelo murino, mediante la modulación de citosinas proinflamatorias (Lima et al., 2013). Adicional a esto, sin cabida a dudas, la principal propiedad antiinflamatoria de este compuesto ha sido mucho más estudiada en los procesos inflamatorios del sistema respiratorio. En las revisiones de Jurgens (2014) y Juergens et al., (2020), se destaca los beneficios terapéuticos del 1,8-cineol en la prevención de exacerbaciones de la EPOC y para mejorar el control del asma, así como de las propiedades mucolíticas. Este mismo compuesto ha sido descrito como el más abundante dentro de los aceites esenciales de las hojas del eucalipto rojo, y en estos mismos estudios se ha observado una actividad antimicrobiana moderadamente alta contra S. aureus, S. pyogenes (Sabo y Knezevic, 2020), no obstante cabe destacar que la actividad antimicrobiana no está ligada exclusivamente al 1,8-cineol, sino al espectro completo de los aceites esenciales, esto debido a la evidencia propuesta por Sabo Knezevic (2020), donde al hacer una revisión bibliográfica, se evidencia que los aceites esenciales de distintas especies de eucaliptos , pese a tener una gran proporción de 1,8-cineol en la composición, hay variaciones en el efecto antimicrobiano. También se observa una detección de un alto porcentaje de Ácido hexanedoico y Ácido 1, 4-Benzenedicarboxylic, los cuales ha n sido descritos como ftalatos que pueden liberarse de manera accidental de los materiales de envasado de los cuales forman parte ya que estos se usan masivamente como plastificantes en la industria PVC de hogar, envases de alimento, mangueras y dispositivos médicos (Giuliani et al., 2020 y Goverment of Canada, 2021). De esta manera la presencia de estos compuestos, pudiesen representar contaminación de la muestra, resultante de 52 utilización de recipientes plásticos para contener alcohol con que se realizó la maceración, puesto que, los ftalatos en presencia de solventes pueden desprenderse con mayor facilidad de los recipientes plásticos contaminando la muestra. Tabla 16. Escala de inflamación Semana de medición Extractos etílicos Escala inflamación Porcentaje (%) Día 1 Achupalla Intenso 100 Propóleo Intenso 100 Testigo Intenso 100 Día 7 Achupalla Leve 100 Propóleo Leve 100 Testigo Leve 90 Dia 9 Achupalla Leve 100 Propóleo Leve 100 Testigo Moderado 80 Dia 15 Achupalla Leve 100 Propóleo Leve 100 Testigo Leve 100 53 120 100 80 60 40 20 0 Achupalla Propoleo Testigo Día 1 Día 7 Día 9 Día 15 Tabla 16. Escala de inflamación En el día 1, todos los grupos (Achupalla, Propóleo y Testigo) presentaron inflamación intensa (100%), lo cual indica que la lesión o estímulo inflamatorio fue efectivo y homogéneo en todos los tratamientos. Para el día 7, tanto los extractos etílicos de Achupalla como de Propóleo mostraron una reducción de la inflamación hacia un nivel leve (100%), mientras que el grupo Testigo mantuvo el mismo nivel leve pero en un 90% de los individuos, lo que indica una recuperación más lenta sin tratamiento. En el día 9, se mantiene la respuesta de los tratamientos (Achupalla y Propóleo), con inflamación leve (100%), mientras que en el grupo Testigo la inflamación se intensifica hacia un nivel moderado (80%), sugiriendo que sin la intervención de extractos, el proceso inflamatorio puede prolongarse o intensificarse. Finalmente, en el día 15, todos los grupos (Achupalla, Propóleo y Testigo) alcanzan un nivel de inflamación leve (100%), reflejando que con el paso del tiempo existe una tendencia natural de resolución de la inflamación. Los extractos etílicos de Achupalla y Propóleo demostraron una acción positiva en la reducción y control de la inflamación, logrando mantenerla en niveles leves desde el día 7, mientras que el grupo Testigo mostró una evolución más irregular, con persistencia de inflamación moderada hasta el día 9. 54 4.2 COMPROBACIÓN DE LA HIPÓTESIS Una vez concluida la investigación se determinó que existió diferencias significativas en las variables medidas en función de los extractos etílicos como fueron las variables de inflamación, dolor, longitud de la herida y tiempo de cicatrización mediante la aplicación de achupalla por lo que se acepta la hipótesis alterna la misma que menciona “Existe diferencia en la actividad cicatrizante de la achupalla (Puya glomerifera) con el propóleo en heridas post-quinurgicas en caninos” y se rechaza la hipótesis nula. 55 CAPÍTULO V 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 5.1 CONCLUSIONES • La composición química de achupaya (Puya glomerifera), analizado mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC- MS). El análisis identificó 29 compuestos volátiles, siendo los más abundantes el éster bis(2-etilhexílico) del ácido 1,4-bencenodicarboxílico (17.62%) y el éster bis(2-etilhexílico) del ácido hexanodioico (16.02%). Otros compuestos relevantes incluyen el etil palmitato (6.20%), el etil linoleato (5.61%) y el etil oleato (4.11%). • El extracto de achupalla demostró tener un efecto beneficioso en el post- operatorio. En cuanto a la cicatrización, fue el tratamiento más eficaz en las etapas iniciales, logrando una reducción de herida significativamente mayor que el propóleo y el grupo testigo en los días 3 y 5. Sin embargo, el propóleo mostró una eficacia superior a largo plazo, consiguiendo la menor longitud de herida al día 15 (0,30 cm frente a los 0,47 cm de la achupalla). • La achupalla exhibió un notable efecto analgésico, reduciendo el dolor de "Intenso" a "Leve" en el 100% de los sujetos al tercer día, un resultado comparable al del propóleo y superior al del grupo testigo. 56 5.2. RECOMENDACIONES • Se recomienda seguir investigando los principios activos de la Achupalla (Puya glomerifera) para determinar cuál es el principio activo que actúa como cicatrizante ya que en esta investigación se consideró en conjunto todos sus componentes. • Se recomienda la utilización de la achupalla en heridas abierta o en laceraciones para promover la cicatrización por segunda intención en animales de domésticos debido a que las medicinas naturales. 57 BIBLIOGRAFÍA Arias, Y. (2020). 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