UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente Carrera de Medicina Veterinaria Tema: Proyecto de Investigación previo a la obtención del título de Médico Veterinario otorgado por la Universidad Estatal de Bolívar a través de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, Carrera de Medicina Veterinaria. Autor Tutor Dr. Jorge Jagger Segura Ochoa PhD. Guaranda – Ecuador 2025 EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIMICROBIANO Y CICATRIZANTE DEL ACEITE DE COPAIBA (Copaifera officinalis) EN HERIDAS CUTÁNEAS NO LINEALES OCASIONADAS EN CONEJOS. Bryan Alexander Paredes Pico III DEDICATORIA La presente investigación está dedicada primeramente a Dios, quien ha sido mi guía y fortaleza durante todo el trayecto de mi vida, fue el impulso de continuar adelante y mantenerme firme en mis objetivos, sin perder nunca la fé y cumplir una de mis metas. Mi más sincero agradecimiento a la doctora Cynthia Ramos quien fue una pieza clave en la búsqueda y desarrollo de mi tema de investigación. Sin su apoyo, no estaría aquí; le estoy eternamente agradecido. A mi tutor de tesis Dr. Jagger Segura Ochoa. PhD, por su invaluable guía, su paciencia y por compartir sus conocimientos. Su respaldo ha sido crucial para realizar este trabajo. A todos mis docentes de la carrera de Medicina Veterinaria, quienes han sido mis orientadores con sus enseñanzas y experiencias que contribuyeron a mi formación académica y profesional. IV AGRADECIMIENTO Primero que todo, agradezco, a Dios, por ser mi refugio y fortaleza en todos los días de mi vida. Gracias por todas las bendiciones, que derramaste por ayudarme a mantenerme aquí, y no dejarme caer y cumplir un sueño de mi infancia. A mis padres Nelson Paredes y Alicia Pico, quienes han sido un pilar fundamental de mi vida, gracias por ser mi inspiración y mi fuerza, que hicieron un gran esfuerzo por brindarme la posibilidad de estudiar y su amor incondicional. Estoy profundamente agradecido por tenerlos en mi vida, este logro también les pertenece. A mi abuelita Blanca Barrera cuando llegaba los fines de semana a la casa me recibía con un fuerte abraso y me preguntaba cómo estoy, gracias por regalarme todos los momentos que atesoro que me viste crecer desde niño hasta ahora. A mi hermano Diego Paredes, ´que es mi compañero de vida que me brindo su apoyo incondicional, también a mi familia principalmente a mis tíos, por darme una palabra de aliento para no rendirme y continuar. V ÍNDICE DE CONTENIDOS CONTENIDO PÁG. CAPÍTULO I 1 1.1. INTRODUCCIÓN 1 1.2. PROBLEMA 3 1.3. OBJETIVOS 5 1.3.1. Objetivo general 5 1.3.2. Objetivos específicos 5 1.4. HIPÓTESIS 6 CAPÍTULO II 7 2. MARCO TEÓRICO 7 2.1. Generalidades del conejo 7 2.1. Fisiología digestiva 7 2.2. La piel 9 2.3. Capas de la piel 9 2.4. La epidermis está compuesta por otro tipo de células 10 2.5. Funciones de la piel 12 2.6. Disrupción tisular 12 2.7. Manejo de heridas 15 2.8. Cicatrización 16 2.9. Fases de la cicatrización 16 2.11. Tipos de cicatrización 17 2.12. Factores que alteran la cicatrización 17 2.13. Copaifera officinalis 18 2.13.1. Generalidades 18 2.13.2. Clasificación taxonómica 19 2.13.3. Propiedades medicinales 19 2.13.4. Aceite de copaiba 20 2.13.5. Composición química del aceite de copaiba 20 2.13.6. Propiedades del aceite de copaiba 21 2.13.7. Propiedades farmacológicas 21 2.13.8. Usos del aceite de copaiba 21 2.14. Antimicrobiano 22 2.15. Tipos de cultivo 22 VI 2.16. Fármacos 23 3. MARCO METODOLÓGICO 25 3.1. Ubicación de la investigación 25 3.2. Metodología 26 3.2.1. Material en estudio 26 3.2.3. Tratamientos 26 3.2.4. Tipo de diseño experimental 26 3.2.5. Tipo de análisis 27 3.2.6. Manejo de la investigación 27 3.2.7. Métodos de evaluación y datos a tomarse 29 CAPÍTULO IV 31 4.1. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 31 4.1.1. Interpretación de resultados 31 4.2. COMPROBACIÓN DE HIPÓTESIS 51 CAPÍTULO V 52 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 52 5.1. CONCLUSIONES 53 5.2. RECOMENDACIONES 53 BIBLIOGRAFÍA 55 ANEXOS VII ÍNDICE DE TABLAS N Detalle Pág. 1. Sexo 31 2. Peso y condición corporal 32 3. Constantes fisiológicas 33 4. Tamaño de la herida inicial 35 5. Tamaño de la herida 6 36 6. Tamaño de la herida día 10 38 7. Tamaño de la herida día 14 39 8. Tamaño de la herida día 18 40 9. Tiempo de cicatrización día 6 41 10. Tiempo de cicatrización día 6 42 11. Tiempo de cicatrización día 14 43 12. Tamaño de la herida día 18 44 13. Cultivo bacteriano toma 1 45 14. Cultivo bacteriano toma 2 46 15. Cultivo bacteriano toma 3 48 VIII ÍNDICE DE FIGURAS N Detalle Pág. 1. Sexo 31 2. Peso y condición corporal 32 3. Constantes fisiológicas 34 4. Tamaño de la herida inicial 35 5. Tamaño de la herida 6 37 6. Tamaño de la herida día 10 38 7. Tamaño de la herida día 14 39 8. Tamaño de la herida día 18 40 9. Tiempo de cicatrización día 6 41 10. Tiempo de cicatrización día 6 42 11. Tiempo de cicatrización día 14 43 12. Tamaño de la herida día 18 44 13. Cultivo bacteriano toma 1 45 14. Cultivo bacteriano toma 2 46 15. Cultivo bacteriano toma 3 48 IX ANEXOS N° Detalle 1. Mapa de ubicación de la investigación. 2. Croquis del ensayo 3. Base de daos 4. Exámenes de laboratorio 5. Glosario de términos. X RESUMEN El presente estudio evaluó la eficacia cicatrizante y antimicrobiana del aceite de Copaifera officinalis en heridas cutáneas en conejos (Oryctolagus cuniculus), utilizando una muestra balanceada de 18 individuos (50 % machos y 50 % hembras). La variable peso y la condición corporal no mostraron alteraciones significativas entre tratamientos (testigo, aceite de copaiba y tratamiento convencional), evidenciando la inocuidad metabólica del aceite. Las constantes fisiológicas se mantuvieron dentro de rangos fisiológicos normales, sin diferencias clínicas relevantes. La estandarización del tamaño inicial de las heridas (2 cm²) garantizó la validez del análisis comparativo. La evolución del proceso de cicatrización evidenció una reducción progresiva del tamaño de las heridas: al día 6, la disminución fue de 9,08 % a 12,51 %; al día 10, de 27,34 % a 31,66 %; al día 14, de 58,27 % a 60,70 %; y al día 18, se alcanzó una reducción del 81,81 % al 84,32 %, siendo el aceite de copaiba comparable al tratamiento convencional. En el análisis microbiológico, aunque el tratamiento con aceite presentó inicialmente mayor diversidad bacteriana, logró controlar el crecimiento bacteriano de manera eficaz en fases posteriores, sin detección de Escherichia coli y con reducciones importantes en Staphylococcus spp. y Proteus mirabilis. Los resultados permiten rechazar la hipótesis nula, concluyendo que el aceite de Copaifera officinalis posee un efecto cicatrizante significativo y actividad antimicrobiana moderada, constituyéndose en una alternativa natural, eficaz y segura para el tratamiento de heridas cutáneas en medicina veterinaria. Palabras clave: Cicatrización, Copaifera Officinalis,C onejos XI SUMMARY This study evaluated the wound healing and antimicrobial efficacy of Copaifera officinalis oil on cutaneous wounds in rabbits (Oryctolagus cuniculus), using a balanced sample of 18 individuals (50% males and 50% females). Body weight and body condition variables showed no significant differences across treatments (control, copaiba oil, and conventional treatment), demonstrating the oil’s metabolic safety. Physiological constants remained within normal ranges, with no clinically relevant differences observed. The standardization of initial wound size (2 cm²) ensured the validity of comparative analysis. The wound healing process demonstrated a progressive reduction in wound size: on day 6, reduction ranged from 9.08% to 12.51%; on day 10, from 27.34% to 31.66%; on day 14, from 58.27% to 60.70%; and on day 18, from 81.81% to 84.32%, with copaiba oil being comparable to conventional treatment. Microbiological analysis revealed that although the oil treatment initially exhibited greater bacterial diversity, it effectively controlled bacterial growth in later phases, with no detection of Escherichia coli and significant reductions in Staphylococcus spp. and Proteus mirabilis. The results support the rejection of the null hypothesis, concluding that Copaifera officinalis oil exhibits significant wound healing properties and moderate antimicrobial activity, establishing it as a natural, effective, and safe alternative for the treatment of cutaneous wounds in veterinary medicine. Keywords: Wound healing, Copaifera officinalis, Rabbits 1 CAPÍTULO I 1.1. INTRODUCCIÓN La cunicultura en América enfrenta el desafío de contribuir a satisfacer las necesidades nutricionales humanas. La cría de especies animales de interés zootécnico, que se alimentan de materias primas que no compiten directamente con la alimentación humana, es una estrategia para proporcionar proteína de origen animal. La cría de conejos ofrece numerosas ventajas frente a otros animales monogástricos, como cerdos y aves, debido a su capacidad para transformar alimentos fibrosos, no convencionales y de baja calidad en carne. Además, los conejos son animales herbívoros que pueden adaptarse fácilmente a distintos ambientes, con bajos costos de inversión, lo que los convierte en una opción viable para la producción en pequeñas y medianas explotaciones familiares. De hecho, las conejas pueden alcanzar una alta productividad, con hasta 40 crías por año (Baruwa, 2024). La fitoterapia es una disciplina científica que investiga el uso terapéutico de productos de origen vegetal, con el objetivo de prevenir, mitigar o mejorar la curación de diversas enfermedades. Esta práctica se centra en el estudio de las sustancias vegetales utilizadas con propósitos medicinales y sigue siendo relevante en la actualidad. Por tanto, la integración de la terapia herbal en la medicina tiene tantos fundamentos históricos como químicos (Escalante, 2022). Los productos naturales están emergiendo como una fuente innovadora para el desarrollo de medicamentos debido a la presencia de estructuras químicas bioactivas en su composición. Estas estructuras poseen la capacidad de ser absorbidas y metabolizadas por el cuerpo. Muchos de estos productos naturales exhiben notables propiedades analgésicas, cicatrizantes y antiinflamatorias, lo que puede influir de manera beneficiosa en el tratamiento de diversas enfermedades (Iglesias, 2019). La piel ha desempeñado un papel crucial como el principal escudo de los órganos internos del cuerpo. Esta estructura, que constituye el órgano más extenso, se compone de tres estratos distintos: la epidermis, la dermis profunda y la hipodermis, esta última constituyendo la capa subcutánea compuesta principalmente por tejido adiposo. En el ámbito de la Medicina Veterinaria, los avances científicos y 2 farmacológicos han propiciado una amplia gama de productos destinados a facilitar la cicatrización de heridas, lo que ha reducido la dependencia de métodos naturales, aunque estos últimos también han demostrado ser efectivos en dicho proceso (Samaniego y Campos, 2022). El proceso de cicatrización es una serie de eventos diseñados para restaurar adecuadamente el tejido celular dañado. Comienza con la fase inflamatoria, que se desencadena inmediatamente después de la lesión. Durante esta fase, se producen la inflamación vascular y la inflamación celular, cuyo propósito es reducir la pérdida de sangre y formar un coágulo que detenga el sangrado. En la etapa fibroblástica, los fibroblastos son activados y comienzan a producir fibrina y tropocolágeno, los cuales son los precursores del colágeno. Esta última molécula es fundamental para otorgar resistencia y firmeza al área lesionada. La fase final es la etapa de remodelación, en la cual muchas de las fibras de colágeno previamente formadas son reabsorbidas y reemplazadas por nuevas fibras, proporcionando una mayor fortaleza a la herida (Merck & Co, 2025). Este proceso completo puede tomar alrededor de cuatro semanas para completarse. El aceite de copaiba es uno de los remedios naturales más importantes para la población indígena de la región amazónica y su uso está ampliamente difundido debido a sus diversas propiedades farmacológicas: antibacteriano, antiinflamatorio, antifúngico, antitumoral y cicatrizantes de heridas. La oleorresina es un líquido transparente, desde amarillo a amarillo pardo con viscosidad variable, y está constituido por una fracción no volátil compuesta de diterpenos y una fracción volátil compuesta de sesquiterpenos (Bocanegra y Millones, 2020). Diversos estudios han evaluado la actividad antimicrobiana significativa contra algunas cepas bacterianas y un efecto cicatrizante en la curación de heridas. El aceite de copaiba ha sido estudiado por sus propiedades cicatrizantes, demostrando una acción positiva en la curación de úlceras y herida (Quispe, 2021) . 3 1.2. PROBLEMA Las heridas cutáneas no lineales, como úlceras, laceraciones irregulares y heridas traumáticas, son comunes en animales de granja y mascotas, incluidos los conejos. Estas heridas suelen ser más difíciles de tratar debido a su forma irregular, la posibilidad de infección y la mayor demanda de procesos de cicatrización. Las lesiones más comunes surgen de mordeduras tras interacciones con otros animales, seguidas de la apertura de heridas debido a problemas en la cicatrización o a un manejo inapropiado de estas. Aunque existen tratamientos farmacológicos convencionales para su manejo. La creciente preocupación por los efectos secundarios de algunos fármacos antimicrobianos y cicatrizantes ha incentivado la búsqueda de alternativas naturales, como el aceite de copaiba. Este aceite, conocido por sus propiedades antimicrobianas y antiinflamatorias, podría representar una opción terapéutica prometedora. El aceite de copaiba es tradicionalmente utilizado en la medicina popular, especialmente en regiones de América Latina, pero aún falta una evaluación rigurosa en términos de su efectividad en el tratamiento de heridas cutáneas no lineales en conejos. Evaluar su potencial en este contexto puede no solo abrir nuevas posibilidades para el tratamiento de heridas en estos animales, sino también ofrecer una alternativa más natural y accesible frente a los tratamientos convencionales. Durante muchos años, ha sido una prioridad encontrar métodos efectivos para tratar heridas y promover su pronta cicatrización, ya sean de origen quirúrgico o traumático. A lo largo del tiempo, se ha buscado incansablemente alternativas que minimicen el riesgo de infección, dado que la presencia de microorganismos puede obstaculizar el proceso de curación de los tejidos. En este sentido, los profesionales de la salud han explorado diversas técnicas, como el uso de suturas absorbibles, grapas o adhesivos. Sin embargo, aún persiste el desafío de garantizar una recuperación óptima, ya que ninguno de estos métodos proporciona una garantía absoluta de cicatrización satisfactoria. En los siglos últimos, se ha recurrido a las plantas medicinales para abordar una variedad de dolencias, incluyendo las heridas en la piel. Esto se debe a su capacidad para agilizar la cicatrización y mantener un entorno libre de agentes infecciosos. 4 Este efecto beneficioso se atribuye a los metabolitos secundarios que contienen, como los taninos, flavonoides y compuestos fenólicos. Estos componentes no solo promueven la regeneración de tejidos, sino que también poseen propiedades antimicrobianas que contribuyen a la salud de la herida. 5 1.3. OBJETIVOS 1.3.1. Objetivo general Evaluar el efecto antimicrobiano y cicatrizante del aceite de copaiba en heridas cutáneas no lineales en conejos. 1.3.2. Objetivos específicos • Determinar el efecto antimicrobiano del aceite de copaiba en heridas cutáneas no lineales en conejos mediante cultivos bacterianos. • Valorar la respuesta cicatrizante del aceite de copaiba en heridas cutáneas no lineales mediante la escala de Byung joo. • Establecer el tiempo de cicatrización de las heridas cutáneas tratadas con aceite de copaiba. 6 1.4. HIPÓTESIS HO: El aceite de copaiba no tiene efecto antimicrobiano ni cicatrizante en heridas cutáneas no lineales en conejos. H1: El aceite de copaiba tiene efecto antimicrobiano y cicatrizante en heridas cutáneas no lineales en conejos. 7 CAPÍTULO II 2. MARCO TEÓRICO 2.1. Generalidades del conejo El Oryctolagus cuniculus, conocido comúnmente como conejo doméstico, representa una especie animal de gran potencial debido a su relevancia en los hábitos alimentarios de diversas regiones del mundo, aunque su explotación aún no ha alcanzado su máximo desarrollo. La creciente demanda de productos cárnicos ha llevado a la industria a buscar estrategias para optimizar la composición nutricional de la carne de conejo y mejorar su aceptación por parte de los consumidores. Originario del sur de la península ibérica, el conejo europeo e ibérico son los únicos ancestros del conejo doméstico, el cual se ha expandido globalmente a lo largo del tiempo. Actualmente, se ha consolidado su domesticación para diversos usos como la producción de carne, cuero, pieles y como animal de compañía. Su carne destaca por sus cualidades nutricionales, mientras que su elevado potencial reproductivo, rápido crecimiento y facilidad de manejo lo convierten en una opción rentable y accesible para los cunicultores, quienes valoran su rusticidad y simplicidad en la alimentación y cuidados (Alegría, M, 2023). 2.1. Fisiología digestiva El conejo es una especie de organismo herbívoro encargado de la fermentación intestinal. En primer lugar, podemos resaltar que desde su nacimiento, el sistema digestivo del conejo es altamente adaptable. No obstante, a pesar de todo, Es imprescindible tener precaución al momento del destete, ya que es vital para su adaptación. Para los conejos debido a su salud y a su futuro crecimiento. Un destete apropiado se incluye entre un destete. Los 18 y 25 días, ya que de esta manera proporcionamos un balance entre un comienzo seguro de la temporada una dieta equilibrada y el crecimiento sano de los conejos. Que resultará esencial para el crecimiento y evolución durante la etapa de engorde (Senasica, 2019). El proceso fisiológico digestivo del conejo comienza desde que ingiere el alimento es decir la ingesta del forraje o alimento que pasa por la cavidad oral es importante destacar que los conejos por medio de sus sentidos como el olfato escogen su 8 alimento. Principalmente, los conejos son roedores monogástricos que se diferencia de otros por la mandíbula y claramente esto es debido a una modificación por adaptarse al alimento que se basa en forrajes bruscos. El conejo posee 28 dientes donde 6 dientes molares y 5 dientes premolares. Se destaca que un par de los incisivos es rudimentario, conocido como "dientes de clavija”. La lengua es muy larga, tiene aspecto rugoso, una porción rostral móvil y caudal que se llama rodete lingual. Sus cuatro tipos de papilas son foliáceas, fungiformes, filiformes y circunvaladas. Por el contrario, el paladar es duro, formado por 22 a 23 crestas prominentes y desiguales (Sirotkin, 2022). En la boca la masticación es producida por un conjunto de músculos como el temporomandibular, que ayuda al movimiento de la masticación y la saliva es importante ya que contiene amilasa, y esta destruye los carbohidratos. En cuanto al aparato digestivo del Oryctolagus cuniculus propiamente está conformado por órganos tubulares que forman el tracto digestivo con funciones como la digestión y absorción de los nutrientes alimenticios (López, 2020). Al conejo se lo considera un animal completo fisiológica y anatómicamente digestivo a las nueve semanas de edad donde el tubo digestivo ya alcanza una longitud máxima de 4,5 a 5 metros. Se considera que el tubo digestivo alcanza su tamaño máximo en el conejo joven cuando este tiene el 70% de su peso que llegará alcanzar del total y el tránsito gastrointestinal puede durar hasta 6 horas. La anatomía del conejo continua con un esófago corto, un estómago unilocular que puede contener entre 90-100 g de alimento. El bolo en el estómago llega a un pH de 1- 2 y en forma de “J” localizándose en el lado del abdomen izquierdo. El fondo de este tiene características que permiten el buen funcionamiento como una glándula que sus células secretan el ácido provocando la solubilización de numerosas sustancias, como la pepsina que hidroliza proteínas (Sergon, 2022). Consecuente al estómago sigue al intestino delgado que mide alrededor de 3 metros de largo y un aproximado de 1cm de ancho, este tiene partes como el duodeno, yeyuno e ilión y este desemboca a la base del ciego que mide aproximadamente de 50 a 45 cm de largo y de ancho 3 a 4 cm. En la parte del intestino grueso, del Oryctolagus cuniculus está formado por el ciego, que tiene forma sacular y paredes 9 delgadas con pliegues y finalmente él se encuentra el colon con una longitud de 1,5 metro también plisado y liso en su parte terminal. En esta zona por los movimientos antiperistálticos y peristálticos se fracciona el contenido lo cual genera heces duras y blandas que se conoce como cecotrofos (Wamucii, 2024). 2.2. La piel La piel es un tegumento que cubre la superficie corporal del organismo animal, se considera como un manto orgánico de protección sensorial, depósitos de líquidos, excreción y termorregulación. Es una estructura resistente, flexible y el órgano más extenso del cuerpo, su epitelio de revestimiento se continúa con los de los sistemas urinario, respiratorio y digestivo. Es uno de los órganos más grandes del cuerpo, y lo protege contra injurias mecánicas, agentes nocivos. Su grosor depende de la especie animal, edad, sexo y la zona del cuerpo de cada individuo, así mismo colabora con la regulación de la temperatura interna, elabora vitamina D la cual es muy importante para el metabolismo del calcio, fósforo y refleja el estado de salud del organismo (Galarza, 2022). 2.3. Capas de la piel • Epidermis Es la capa más superficial de la piel y por ende mediante la secreción de sustancias es la principal barrera de protección contra agentes externos (Pineda. K , 2020). La epidermis no posee vasos sanguíneos y linfáticos, y su nutrición la realiza a través de difusión gracias a la irrigación de la siguiente capa o dermis. A su vez se compone de células epidérmicas, melanocitos cuyas células desempeñan funciones de protección contra radiación, eliminación de toxinas y producción de coloración; los queratinocitos las cuales reemplazan células muertas cumpliendo la función de dar soporte estructural y defensa al tejido; las células de Langerhans que también poseen funciones de inmunidad; las células de Merkel que actúan como mecanorreceptores, intervienen en la producción del sudor y en el ciclo de crecimiento del pelo. Además, esta capa se encuentra dividida por varios 10 estratos como lo son: estrato basal, espinoso, granuloso, lúcido y estrato córneo) (Pineda, 2020). • Dermis Las fibras dérmicas son el 90% colágeno, adicionalmente, se encuentran fibroblastos, macrófagos, células plasmáticas e histiocitos, cromatóforos y células grasas; adicionalmente, contiene redes capilares, vasos linfáticos, nervios, músculos pilo erectores y estructuras glandulares, la dermis se separa de la epidermis por medio de una membrana basal y a su vez presenta dos zonas, la papilar y la reticular, cuyo nombre se refiere a la distribución de las fibras de colagenasa, la zona papilar posee proyecciones en forma de dedos conocida como papilas dérmicas, las cuales aumentan la superficie de contacto con la epidermis. En su conjunto, tiene una labor primordial al sintetizar mediadores fagocíticos en los procesos de reparación, angiogénesis (formación de nuevos vasos sanguíneos a partir de los existentes), reacciones antigénicas y defensa contra microorganismos(Santa Cruz, 2022). • Hipodermis Es una capa subcutánea de tejido colágeno laxo, une la piel a estructuras profundas y permite la motilidad tegumentaria sobre estas estructuras; cuando hay infiltración de adipocitos se conoce como panículo adiposo, el cual es abundante en los cojinetes digitales el cual favorece el retorno venoso. Posee función meramente protectora, pues amortigua y absorbe la energía de un traumatismo; aunque también aísla y sirve de depósito de energía (Guzmàn, 2023) 2.4. La epidermis está compuesta por otro tipo de células • Melanocitos. Los melanocitos tienen un origen de las células de la cresta neural, especialmente de los melanoblastos que migran a diferentes lugares, después del cierre del tubo neural embrionariamente, estas células emergen de la cresta neural, son células dendríticas derivadas de la cresta neural, están en una proporción de 1 a 10 a 20 queratinocitos (Ruano, 2018). Tienen la función de síntesis de melanina que ocurre en los melanosomas, la cual está comprendida por la migración, proliferación y diferenciación de los 11 melanoblastos en células productoras de melanina, en dependencia de mediadores producidos por el ectodermo y los queratinocitos adyacentes. El comienzo de la producción de melanina tiene inicio con la acumulación del pigmento y finaliza con la perdida de la actividad enzimática de la tirosinasa (López, C, 2019) • Células de Merkel Son células que se encuentras directamente por debajo de la epidermis, las cuales están muy cerca de las terminaciones nerviosas que reciben la sensación del tacto y participan en el sentido del tacto y tiene cierta función endocrina (hormonas que cumplen la función de un mensajero químico del organismo) (NIH, 2022) Son células con función mecanorreceptoras, se encargan de regular el flujo sanguíneo hacia la piel, además, son consideradas como productor de la sudoración y coordinan la proliferación de queratinocitos (Zadwadzka, 2020) . Varias líneas de evidencia sugieren que participarían en la homeostasis de la piel y en desórdenes cutáneos a través de la liberación de neuropéptidos y hormonas, pero muy pocos hallazgos de funciones neuroendocrinas, ya que la piel es capaz de recibir una amplia gama de sensaciones del medio externo y establece una amplia comunicación con el sistema nervioso (MarcadorDePosición2) (Chaparro, 2012). • Células de Langerhans Fueron descritas en 1868 por Paul Langerhans, por sus características tinto riales y prolongaciones dendríticas, fueron considerado como receptores nerviosos, tan solo en 1966 empezaron a ser reconocida como células del sistema inmune, la cual es una presentadora de antígenos profesionales que juegan un papel importante en la respuesta inmune cutánea (Manzo, 2022). Son las responsables de las reacciones inmunes en la piel, es la representante del sistema de células dendríticas en la epidermis, se caracterizan por células redondas, grandes, con una superficie irregular, con un citoplasma basófilo, vacuolas y pequeños gránulos en su interior (Sarmiento, 2022). 12 2.5. Funciones de la piel Son muchas las funciones a continuación exponemos las principales: • Protección contra microorganismos patógenos, rayos solares y lesiones. • Interviene en la termorregulación corporal. • Juega un papel importante en la inmunidad del organismo. • Interviene en los procesos de síntesis de vitamina E. • Posee elasticidad por lo que permite los movimientos. • Posee receptores sensoriales que permiten receptar calor, frío, picazón, ardor, etc. Excreción de sustancias de desecho (Pineda, 2020). 2.6. Disrupción tisular La alteración tisular puede ser resultado de traumatismos provocados por lesiones de contacto mecánico, aplastamiento, frío, quemadura solar e irradiación; también lesiones sónica s, térmicas y eléctricas. En todas las anteriores, se alteran los procesos metabólicos, así como los componentes específicos de las células, en donde se ven rupturas de enlaces y producción de cambios químicos en la célula, con lo cual se pueden alterar los componentes metabólicos o estructurales de la célula. Posterior al daño tisular, se produce la liberación de tromboplastinas que no solamente inicia la coagulación, sino también la trombosis, atrayendo neutrófilos mediante quimiotaxis a través del sistema de complemento, que es activado por los compuestos liberados por células muertas y moribundas; estos mecanismos se potencializan por la acumulación de neutrófilos, los cuales liberan también compuestos quimiotácticos (Vargas, Joya y Arias, 2022). 2.7. Clasificación de las heridas Las heridas se clasifican, depende del origen, disección, forma, lesión de los tejidos, futura cicatrización, contaminación (Sopena, 2019). 13 • De acuerdo con la contaminación microbiana Limpias: No están infectadas, no hay inflamación, ocurrieron en un tiempo menor a seis horas y presentan la zona limpia. Son heridas de cirugía por loque ocurre el cierre por primera intención. Limpias-contaminadas: Implica contacto con la flora normal del tracto respiratorio, digestivo, génito-urinario. Contaminadas: Están infectadas y frescas, hay signos de inflamación aguda no purulenta, ocurridas en un tiempo superior a 6 horas y comprometen el tracto respiratorio, digestivo y génito-urinario. Sucias-infectadas: Cuando el número de bacterias supera 105 microorganismos por gramo de tejido se considera infectada y no contaminada. La infección dificulta la cicatrización (Anguieta, 2023). Es importante mencionar que, en medicina veterinaria, todas las heridas, excepto las quirúrgicas, se consideran contaminadas, es decir que existe la presencia de microorganismos, aunque estos no se han comenzado a multiplicar, lo que las transformaría en infectadas (Zarate, 2020). • De acuerdo con la solución de continuidad de la piel Heridas abiertas: En este tipo de heridas se observa la separación de los tejidos blandos. Son las más susceptibles a la contaminación. Heridas cerradas: Son aquéllas en las que no se observa la separación de los tejidos, generalmente están producidas por golpes; la hemorragia se acumula debajo de la piel (hematoma), en cavidades o en vísceras. Deben tratarse rápidamente porque pueden comprometer la función de un órgano o la circulación sanguínea (Campos, 2021). • De acuerdo con la complejidad Simples: Compromete piel o músculo, sin tener mayor profundidad. Complicadas: Son extensas y profundas con hemorragia abundante, comprometen músculos, tendones, nervios, vasos sanguíneos, órganos internos. Pueden ser perforantes y/o penetrantes comprometiendo compartimentos anatómicos o 14 transfixiones cuando supera el músculo y comunica dos cavidades distintas (Sopena, 2019; Páez, 2019). • De acuerdo con la etiología Contusas: Producidas por objetos duros, sin filo y con bordes romos. La lesión es estrellada e irregular. Hay dolor y formación de hematomas. Cortantes o incisas: Producidas por objetos filosos pudiendo comprometer músculos, tendones y nervios. Los bordes de la herida son limpios y lineales, la hemorragia puede ser escasa o abundante. Punzantes: Producidas por objetos con punta sin filo. La lesión es dolorosa y la hemorragia es escasa. Son peligrosas porque pueden ser profundas, perforar vísceras y provocar hemorragias internas. Su mayor gravedad, es la probabilidad de contaminación con microorganismos del grupo de los anaerobios (Clostridium). Inciso-punzantes: Provocadas por objetos agudos y afilados como tijeras, cuchillos o hueso fracturado. Lacerantes: Producidas por objetos de bordes dentados como serruchos o latas. Hay desgarramiento de tejidos y los bordes de heridas son irregulares. Mordeduras: Producidas por dentaduras, pudiendo ser puntiformes o desgarradas. Son heridas contaminadas o mayormente infectadas. Se recomienda antibioterapia sistemática (Megías & Molist, 2023) . • De acuerdo a la presentación Abrasivas: Se producen por fricción de una superficie dura e irregular sobre la piel. Tienen distintos grados de profundidad. Son contaminadas o infectadas que arrastran tierra y piedras. Netas: Tienen bordes regulares como incisiones quirúrgicas o heridas cortantes. Tienen bordes simétricos con el lado opuesto por lo que al afrontarlos coinciden. Buena cicatrización. Ocasionadas: Se refiere al daño causado por accidentes, caídas, golpes, quemaduras, armas y otras causas. https://medlineplus.gov/spanish/falls.html 15 Heridas en bisel: Heridas contusas de corte oblicuo con bordes irregulares de y no coincidentes. Se deben regularizar bordes para alinearlos y cicatrizar. Heridas con pérdida de tejido o sustancia: Heridas que han perdido parte importante de tejido por lo que no se pueden suturar. Heridas con colgajo: La solución de continuidad compromete la piel, aponeurosis y músculos. La piel queda plegada sobre sí o adherida por un pedículo. Son irregulares y muchas veces con fondo de saco. En ocasiones necesitan plastias para su manejo. Mutilantes: El agente traumático externo destroza la piel y demás tejidos, produciéndose la pérdida de una parte del mismo. Complejas: Afecta la piel, aponeurosis, músculos, tendones, nervios, vasos sanguíneos y huesos (Quiñonez, 2021) 2.7. Manejo de heridas En el manejo de heridas, la limpieza exhaustiva y la eliminación de detritus son esenciales para prevenir infecciones y favorecer la cicatrización. En casos graves, se recomienda el uso de guantes estériles para minimizar el riesgo de infecciones nosocomiales. Las heridas contaminadas deben ser sometidas a desbridamiento, que implica la extracción de suciedad, objetos extraños, tejido dañado y restos celulares. Este proceso, frecuentemente realizado bajo anestesia, se complementa con un lavado cuidadoso para eliminar tejidos desvitalizados, reducir la carga bacteriana y optimizar el entorno para la reparación tisular. (Galarza, 2022). Las lesiones más comunes surgen de mordeduras tras interacciones con otros animales, seguidas de la apertura de heridas debido a problemas en la cicatrización o a un manejo inapropiado de estas. Además, se observan heridas quirúrgicas. Las lesiones abiertas, como las laceraciones, cortaduras, punzadas y excoriaciones, así como las lesiones cerradas, como seromas, cuerpos extraños, contusiones y lesiones por aplastamiento, se registraron con menor frecuencia. También se ha notado que la aparición de estas lesiones guarda una estrecha relación con el entorno y los hábitos de los animales (Medina, 2023). 16 2.8. Cicatrización La cicatrización es un proceso dinámico que combina eventos físicos, químicos y celulares, para restaurar el tejido lesionado, el proceso involucra interacciones complejas entre varios tipos de células y sus mediadores como las citoquinas y los factores de crecimiento, además de la matriz extracelular (Tenesaca, 2021). 2.9. Fases de la cicatrización • Fase inflamatoria Los tejidos del cuerpo sufren un daño y se produce una respuesta protectora es la inflamación, esta se da debido a que se produce una quimiotaxis de las células se liberan citosinas, se incrementa la permeabilidad vasculares se activan neutrófilos, linfocitos, fibroblastos y macrófagos, después de la lesión se produce una hemorragia la cual rellena y limpia la herida; los vasos sanguíneos se contraen y dilatan permitiendo el paso de factores de coagulación y de fibrinógenos al lugar de la herida, luego se forma un coagulo que tiene el objetivo de producir una hemostasia. Dentro de las 24 a 48 horas siguientes, migran monocitos que se convierten en macrófagos activados, que tienen un papel en la fagocitosis, así como la producción de una amplia gama interleucinas y factores de crecimiento que dan paso a la transición a la fase de proliferación (Ramos, 2020). • Fase proliferativa Entre las 12 y 36 horas posteriores a la lesión, comienza una fase caracterizada por la reducción de neutrófilos y el incremento de macrófagos en la herida. Durante este tiempo, los fibroblastos y las células endoteliales empiezan a multiplicarse activamente. Hacia el día 4 o 6, los fibroblastos producen colágeno, y el entorno de la herida se torna favorable para la regeneración. A medida que esta evolución progresa, los macrófagos y neutrófilos disminuyen, y los fibroblastos, junto con las células endoteliales y epiteliales, toman un papel predominante. Estas células se desplazan hacia la herida, proliferan y generan tejido de granulación, una matriz provisional que facilita la adhesión y migración celular necesaria para la reparación del tejido. Este tejido presenta características visuales típicas en heridas abiertas (Galarza, 2022). 17 • Fase de reparación Empieza 5 días después de que se haya producida la herida, en esta fase los fibroblastos producen fibronectina permitiendo la unión celular y el movimiento de los fibroblastos; estos últimos viajan hacia las heridas antes de la formación de nuevos capilares y permiten producir elastina y colágeno en el lugar de la herida para luego transformarse en tejido fibroso. Aumentando la cantidad de colágeno y baja el número de fibroblastos, luego la síntesis de colágeno desciende y se da la fase final de reparación (Guarín, 2020). 2.10. Fase de maduración Se produce un incremento de la resistencia de la herida a causa de los distintos cambios que se dan en el proceso de cicatrización, ocurre una permanencia de fluidos de la herida en crecimiento y enzimas (Urbina y Rider, 2019). 2.11. Tipos de cicatrización • Cierre por primera intención Se observa en las heridas quirúrgicas y las heridas incisas. Se afrontan los tejidos con puntos con una mínima tensión y la menor cantidad posible de puntos (Mason, 2024) . • Cierre por segunda intención En forma lenta y a expensas de un tejido de granulación, dejando una cicatriz antiestética que ocurre cuando hay pérdida de sustancia, dificultad para afrontar los bordes de una herida, presencia de cuerpos extraños o en un proceso infeccioso en la misma (Martínez, 2022). • Cierre por primera demorada Es un método intermedio al que se denomina cicatrización primaria demorada en el cual se realiza la sutura de la herida previo a la formación del tejido de granulación, 4 a 5 días post injuria (Sopena, 2019). 2.12. Factores que alteran la cicatrización El proceso de cicatrización es mucho más lento en los casos en donde los bordes de la piel se separan o se produce una fase inflamatoria prolongada. Los bordes 18 cutáneos pueden incluso empezar a separarse a medida que el líquido inflamatorio desaparece, impidiendo que los bordes se sellen con tejido de granulación y que la piel se repare (Senet, 2020). • Sistémicos Anemia, hipoproteinemia, uremia, estados de choque, fármacos (corticoides, quimioterapia) • Deficiencia proteínica: la cual predispone a edemas y retrasos en la curación debido a no estar presentes los aminoácidos esenciales necesarios para la cicatrización. • Edad del paciente: en animales de edad avanzada puede existir menor riego sanguíneo, la capacidad fibroblástica puede estar reducida, enfermedades como arteriosclerosis, hipovitaminosis, hipoproteinemia. • Enfermedades crónicas, principalmente Diabetes mellitus. • Administración de fármacos y Radiaciones: principalmente el uso de esteroides, los cuales inhiben la reacción inflamatoria, a dosis elevadas limitan el desarrollo de capilares, inhiben la proliferación de fibroblastos y disminuyen la velocidad de epitelización. • Locales: Cuerpos extraños, presencia de tejido necrótico o isquémico, espacio muerto, seromas y hematomas, excesivo o inapropiado material de sutura, número de bacterias presentes y la especie implicada (Sudario & Acaro, 2019). 2.13. Copaifera officinalis 2.13.1. Generalidades El árbol de Copaiba es una especie nativa de la región amazónica, con una amplia presencia en Sudamérica, principalmente en Perú, Brasil, Colombia y Venezuela. También se encuentra en Puerto Rico, Hawái y algunas zonas de África Occidental. Este árbol es reconocido por producir una oleorresina, comúnmente llamada aceite de copaiba, que se extrae de su tronco y ha sido utilizada tradicionalmente como remedio natural para diversas afecciones y enfermedades. Se adapta bien a climas tropicales, tanto húmedos como secos; dado que es una especie de crecimiento lento 19 pero de gran longevidad, pudiendo vivir hasta 400 años. Estos árboles pueden alcanzar dimensiones impresionantes, llegando a medir hasta 40 metros de altura y desarrollar un tronco con un diámetro de 0.80 metros (Barrera, 2022). Su distribución va desde los 50 m.s.n.m. hasta los 1200 m.s.n.m. en un amplio rango de suelos (ácidos y arcillosos) con buen drenaje. En el Perú se encuentra principalmente en las regiones de Loreto, Madre de Dios y Ucayali. El tronco es áspero de color oscuro. Las hojas pecioladas y alternas. Las flores hermafroditas y dispuestas en panículas axilares dan un fruto que contienen una sola semilla. La semilla es de forma ovoide, cubierta dura y color negro. La floración y fructificación de la Copaiba ocurre alrededor de los 5 años (Lombarte, 2020). El aceite de copaiba, cuya denominación correcta es oleorresina de copaiba por ser un exudado compuesto de ácidos resinosos y compuestos volátiles. Esta sustancia resinosa aromática y fluida es extraída del tronco del árbol, a manera de exudado líquido que al contacto con el aire se espesa, y cuya gama de colores según la especie va desde un transparente, amarillo a marrón claro. La forma de extracción es del 2 método tradicional usando un hacha, y que, a manera de incisión en el tronco del árbol, se hace una gran apertura para encontrar los canales longitudinales (Díaz & Quispe, 2019). 2.13.2. Clasificación taxonómica Reino: Plantae División: Magnolophyta Clase: Magnoliopsida Subclase: Rosidae Orden: Fabales Familia: Fabaceae Género: Copaifera Especie: Officinalis Nombre científico: Copaifera officinalis Fuente: Díaz y Quispe (2019) 2.13.3. Propiedades medicinales La Copaiba tiene una amplia gama de indicaciones etnofarmacológicas, como para el tratamiento de cistitis, gonorrea, incontinencia urinaria y sífilis; faringitis estreptocócica, hemoptisis, incluyendo bronquitis respiratorias, sinusitis y 20 neumonía respiratorias, infección de la mucosa y la piel, leishmaniosis, dermatitis, psoriasis, heridas; eccemas, ulceras y lesiones del útero y leucorrea, anemia, mordedura de serpientes y dolor de cabeza. Las personas de Igarape Miri utilizaron para curar heridas, tumores de próstata, y antiparasíticos; la especies de Copaifera también se usaron por sus propiedades, afrodisiacas, anticancerígenas, antirreumáticas, estimulantes, antisépticos, antitetánicas, antiinflamatorias, antiherpéticas, antihelmínticos, antitumorales (Barrera, 2022). 2.13.4. Aceite de copaiba El aceite de copaiba se obtiene del tronco de los árboles del género Copaifera por exudación de un líquido que va desde transparente, amarillo a Marrón claro, lo cual es usada en la superficie de la piel para el proceso de curación normal de las heridas, antiséptico urinario, antiinflamatorio, ulcera y cicatrización, en los últimos años las investigaciones realizadas han permitido la validación de diversos usos tradicionales, el cual destaca efecto cicatrizante evitando la colonización de bacterias demostrando así en los estudios preclínicos de las investigaciones (Arnillas, 2021) 2.13.5. Composición química del aceite de copaiba El aceite de Copaiba se forma como producto de la descomposición de las membranas celulares en el interior del tronco del árbol y se acumulan en cavidades internas denominadas canales longitudinales. En términos biológicos podemos decir que es producto del metabolismo secundario de la planta. La composición química del aceite es de 15% de aceites volátiles y el 85 % restante por resinas y ácidos grasos. Entre las resinas con acción biológica tenemos: sesquiterpenos, diterpenos (ácido Copalico y ácido Kaurenoico) y ácidos terpénicos. En cuanto a los ácidos grasos está formado por un 60% de ácidos grasos insaturados, y un 36% de ácidos grasos saturados como el Vaccenico, Elaídico, Linoleico, Palmítico, 7-10 octadienoico, Behénico y el Lignocerico. El 4 % restante lo conforman: Acido araquidico, 11- eicosano, esqualeno, butil hidorxitolueno y vitamina E (Díaz y Quispe, 2019). 21 2.13.6. Propiedades del aceite de copaiba Al aceite de copaiba se le atribuyen varias propiedades curativas, algunas concedidas de la medicina folklórica de forma empírica, otras, sin embargo, han sido muy estudiadas como: actividad antioxidante, cicatrizante, antiinflamatoria, analgésica, anticancerosa y antiséptica (Díaz y Quispe, 2019). 2.13.7. Propiedades farmacológicas Una serie de estudios realizados a la oleorresina de diferentes especies del género Copaifera, concluyeron que estas tienen una amplia gama de propiedades farmacológicas, entre las que más destacan su actividad antiinflamatoria, antibacteriana, insecticida, antinociceptiva, leishmanicida, ansiolítica. La actividad antimicrobiana de la oleorresina de “copaiba” es una de las propiedades más estudiadas, y en numerosos trabajos han evaluado su actividad antimicrobiana frente a bacterias como: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, S. aureus resistente a meticilina, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes, Bacillus subtilis, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexinerii, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis, Paenibacillus alginolyticus, P.pabuli, P. azotofixans, P. borealis, P. gluconolyticus, P. validus, P. thiaminolyticus y P. larvae; y levaduras Enterobacter cloacae, Citrobacter freundi, como: Candida albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis y C. guilliermondii; y hongos: Aspergillus flavus, A. niger, A. tamari, A. terreus, Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes, Microsporum canis y M. gypseum. (Flores y Huaman, 2022). 2.13.8. Usos del aceite de copaiba El uso tradicional del aceite de copaiba para tratar afecciones y enfermedades, proviene de la observación (por parte de los nativos americanos) del comportamiento de ciertos animales que, al lesionarse, se frotaban sobre los troncos de las copainiferas para curar sus heridas (Francia. J, 2020). El aceite de copaiba tiene en la actualidad aplicación en la industria farmacéutica para la fabricación de jabones, cosméticos y pomadas, pero es en la medicina 22 folklórica que tiene un mayor impacto. Tradicionalmente es usado para: a) curar dolencias de vías respiratorias: bronquitis crónica, asma; b) tratamiento de infecciones urinarias: cistitis; c) para infecciones y de la dermis: psoriasis y d) curar heridas: gastritis, úlceras (Barrera, 2022). 2.14. Antimicrobiano Son utilizados para tratar las infecciones y promover la cicatrización en las heridas, lo que se refiere al uso de agentes que destruyen o inhiben el crecimiento de microorganismos para prevenir y tratar infecciones. Los desinfectantes, los antisépticos y los antibióticos son ejemplos de estos agentes. Los antimicrobianos pueden usarse para prevenir o tratar heridas. Para prevenir la infección y promover la cicatrización, los antisépticos pueden aplicarse tópicamente en la herida. Los antibióticos tópicos deben administrarse en el formato apropiado para la vía tópica y no deben usarse en otras vías de administración. Es crucial evaluar la herida con frecuencia para detectar indicios de infección y modificar el tratamiento según sea necesario (Romero, 2022). 2.15. Tipos de cultivo • Cultivo aeróbico Es un método microbiológico utilizado para el crecimiento de microorganismos que requieren oxígeno molecular (O₂) para su metabolismo. Se realiza en condiciones que aseguran una adecuada oxigenación, ya sea mediante exposición al aire o sistemas controlados de suministro de oxígeno. Este procedimiento se emplea principalmente para identificar bacterias aeróbicas estrictas o facultativas, y su éxito depende de factores como el medio de cultivo, la temperatura, el pH y la concentración de oxígeno disponible (López, 2020). • Cultivo anaeróbico Es un método microbiológico diseñado para el crecimiento de microorganismos que no requieren oxígeno molecular (O₂) y, en muchos casos, su presencia puede ser tóxica. Este cultivo se realiza en condiciones estrictamente anaeróbicas, utilizando 23 técnicas como cámaras anaeróbicas, frascos de cultivo con generadores de gases reductores o medios enriquecidos con agentes que eliminan el oxígeno. Se utiliza principalmente para estudiar bacterias anaerobias estrictas y facultativas, siendo crucial controlar parámetros como pH, temperatura y nutrientes específicos para su desarrollo óptimo (Sergon, 2022). Cultivo mixto Permite detectar tanto bacterias aeróbicas como anaeróbicas en la misma muestra. Útil en heridas complejas o crónicas, como úlceras por presión. • Cultivo de hongos Identifica infecciones fúngicas que pueden complicar la cicatrización de heridas. Ejemplo: Candida albica ns. Relevante en pacientes inmunocomprometidos o con infecciones recurrentes. • Cultivo de micobacterias Detecta micobacterias, como Mycobacterium tuberculosis o Mycobacterium marinum indicado en heridas crónicas de origen desconocido o lesiones sospechosas de tuberculosis cutánea. • Cultivo cuantitativo Determina la cantidad de microorganismos presentes en la herida ayuda a diferenciar entre colonización (presencia sin infección activa) e infección (proliferación dañina) (Aburto, 2020) • Hemocultivo asociado a infecciones de heridas Analiza la sangre para detectar infecciones sistémicas relacionadas con heridas severas, como en casos de sepsis. 2.16. Fármacos Enrofloxacina Un antibiótico de amplio espectro perteneciente al grupo de las fluoroquinolonas, es utilizada en conejos para el tratamiento de infecciones bacterianas sistémicas y 24 localizadas, incluyendo aquellas causadas por patógenos grampositivos y gramnegativos, como Pasteurella multocida, Escherichia coli y Staphylococcus spp.. Su mecanismo de acción consiste en la inhibición de las enzimas bacterianas ADN girasa y topoisomerasa IV, esenciales para la replicación y transcripción del ADN bacteriano, lo que detiene la proliferación del patógeno. La enrofloxacina es particularmente efectiva en el tratamiento de enfermedades respiratorias, gastrointestinales y urinarias, además de abscesos y septicemias, debido a su buena biodisponibilidad oral, rápida distribución tisular y alta concentración intracelular, características que la convierten en una opción terapéutica eficiente en medicina veterinaria para conejos (Monarrez, 2018). Posología Pequeños mamíferos: 5 – 10 mg/kg s.c., p.o. q 12h Mecanismo de acción Es un antibiótico bactericida que actúa directamente sobre el ADN girasa y es activo contra micoplasma y muchos gérmenes bacterias grampositivas y gramnegativas incluyendo Pasteurella spp., Staphylococcus spp., Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli. y Salmonella spp (Monarrez, 2018). Contraindicaciones Se ha descrito anormalidades en el cartílago en animales jóvenes. Se han observado que en altas dosis de enrofloxacina induce lesiones articulares y necrosis muscular (Idrovo, 2024). 25 CAPÍTULO III 3. MARCO METODOLÓGICO 3.1. Ubicación de la investigación La presente investigación se realizó en la Provincia de Tungurahua, Cantón Pelileo en la Parroquia Pelileo grande y en la Comunidad Inapi el Sector Balle Hermoso • Localización de la investigación País Ecuador Provincia Tungurahua Cantón Pelileo Parroquia Pelileo Grande Comunidad Inapi Sector Balle Hermoso • Situación geográfica y edafoclimática Altitud 2825 msnm Latitud 01° 14' 11'' S Longitud 78° 33' 15'' W Temperatura máxima 24 ºC Temperatura mínima 7 ºC Temperatura media anual 13 °C Precipitación media anual 980 mm Humedad relativa 70% Heliofanía promedio 900 horas/luz/año Fuente: (GAD Pelileo, 2022) • Zona de vida De acuerdo con el sistema de clasificación de zonas de vida según Leslie Holdrige (1978) el sitio del experimento donde se realizó la investigación corresponde a bosque húmedo montano bajo(BHMB). 26 3.2. Metodología 3.2.1. Material en estudio En el experimento se empleó 18 conejos criollos (Oryctolagus cuniculus) que se evaluó el efecto antimicrobiano y cicatrizante del aceite de copaiba en heridas cutáneas no lineales. Factores en estudio Factor A: 18 conejos Factor B : Aceite de copaiba 3.2.2. Tratamientos Tratamiento Código Detalle T1 a1 b0 Testigo T2 a1 b1 Aceite de Copaiba T3 a1b2 Tratamiento Convencional 3.2.3. Tipo de diseño experimental Se utilizo el Diseño Experimental de bloques completamente al azar (DBCA). Características del experimento Detalle Número de tratamientos 3 Número de repeticiones 3 Número de unidades experimentales 9 Número de animales por unidad experimental 2 Número total 18 27 3.2.4. Tipo de análisis Prueba de Tukey al 5% 3.2.5. Manejo de la investigación • Limpieza y desinfección del sitio Se realizó la limpieza con un barrido profundo del piso, techos y paredes tanto de la parte interna como de la parte externa. Se uso amonio cuaternario diluido en agua y se desinfecto por medio de aspersión por todo el galpón, complementándolo con el flameado de la instalación. A su vez, se desinfectaron los comederos y bebederos con yodo en una concentración de 10 ml/litro de agua, y al ingreso del galpón se colocó una tina con cal para evitar la contaminación. • Preparación del sitio El experimento se inició con la adecuación del galpón, para cada uno de los tratamientos. Antes del ingreso de los conejos • Identificación de los tratamientos Cada tratamiento se identificó mediante la colocación de rótulos y posteriormente se conformó de manera aleatoria las unidades experimentales. • Adquisición y selección del conejo En el experimento se utilizó 18 conejos criollos, machos y hembras, con un peso promedio de 400 g y características homogéneas. Se distribuyo al azar en jaulas, con 6 animales por jaula, y permanecieron allí durante toda la investigación. Antes de comenzar, se sometió a una etapa de adaptación de 1 a 2 semanas. • Alimentación Se alimento a los 18 conejos durante el proceso de investigación, se priorizo una dieta equilibrada basada en heno de buena calidad como alimento principal (70- 80%), complementado con pellets comerciales (25-30 g por conejo adulto al día) y forraje como la alfalfa. 28 • Procedimiento quirúrgico Para realizar el procedimiento quirúrgico se evaluó las constantes fisiológicas de los pacientes y se realizó una preparación quirúrgica del área a incidir (tricotomía y embrocado). Luego por medio de anestesia local infiltrativa con Lidocaína 2% se insensibilizo la zona de la incisión, con una tijera de mayo curva se realizó un corte en la epidermis de la región cérvico-torácica del animal. • Toma de muestras La herida cutánea no lineal quedó descubierta al ambiente por 6 horas. Se procedió a realizar la primera toma de las muestras se efectuó después de 6 horas de haber realizado el corte, lo cual se obtuvo la muestra a través de un hisopo estéril, que se trasportaron en una hielera a una temperatura de 2º a 8º C, se tuvo cuidado para evitar fugas del material antes de llegar al laboratorio, y así se determinar si existe presencia de algún agente microbiano. • Aplicación de los tratamientos Después dejamos 6 horas al ambiente sin apósito luego tomamos la muestra inicial para cultivo, colocamos el aceite de copaiba 5 gotas que cubra el área a aplicar esperamos algunos minutos para que se seque y colocamos apósito, al siguiente día tomamos la segunda muestra con el hisopo estéril posterior a las 12h y procedemos a aplicar de nuevo el aceite y cubrimos con los apósitos, la 3ra y ultima toma de muestra con el hisopo estéril, pasado las 24 horas del corte volvimos a colocar el aceite de copaiba con los apósitos y de haber transcurrido 36 horas se colocó el aceite de copaiba para que comience a cicatrizar. • Respuesta al tratamiento Se evaluó los resultados conforme a los cultivos bacterianos y se vio el efecto antimicrobiano cada 12, 24 y 36 horas por los 2 días de la aplicación del aceite de copaiba y el proceso de cicatrización de la herida mediante la escala de Byung joo. 29 3.2.6. Métodos de evaluación y datos a tomarse • Sexo (S) Variable cualitativa de tipo nominal que identifica el género biológico de cada ejemplar. Se clasificó en dos categorías: macho y hembra, determinadas mediante inspección visual de los órganos genitales externos. • Edad (E) Variable cuantitativa discreta, se expresó en meses, que corresponde a la edad cronológica de los animales al momento de ser incorporados al estudio. Todos los individuos se encontraban en la fase de adultez temprana, con una edad promedio de 3 meses, según lo indicado por el proveedor y verificado con las características morfológicas. • Peso (P) Variable cuantitativa continua que representa la masa corporal de cada animal. La medición se efectuó al inicio del ensayo experimental utilizando una balanza digital de alta precisión (±0.01 g). Los datos obtenidos se registraron en gramos (g), permitiendo establecer una línea base para la evaluación de cambios ponderales durante el estudio. • Condición corporal Variable cualitativa ordinal que estima la proporción de masa muscular Y grasa del animal mediante la evaluación visual y palpatoria de puntos anatómicos específicos (columna vertebral, costillas, pelvis). Se utilizó una escala estandarizada de 1 a 5, donde: 1: Caquéxico (muy delgado, prominencia ósea evidente) 2: Delgado (ligera prominencia ósea, poca masa muscular) 3: Ideal (estructura ósea no visible, buena cobertura muscular) 4: Gordo (acumulación evidente de grasa, movilidad leve comprometida) 5: Obeso (exceso de grasa, movilidad comprometida) 30 • Constantes fisiológicas (CF) Conjunto de variables cuantitativas que permiten monitorear el estado fisiológico de los animales. Incluyen: • Temperatura corporal (°C): medida con termómetro digital rectal. • Tiempo de Llenado Capilar (TLLC): valor estimado mediante presión en la mucosa oral, evaluando el tiempo que tarda en recuperar el color rosado (normal: <2 segundos). • Frecuencia Cardiaca (lpm): determinada mediante auscultación torácica con estetoscopio, reportada en latidos por minuto. • Frecuencia Respiratoria (rpm): conteo visual del número de ciclos respiratorios por minuto, reportado en respiraciones por minuto. • Tamaño de la herida (TH) Esta variable se la registró en centímetros con ayuda del calibrador de Vernier, desde el inicio hasta el final de la herida, esto en dependencia de la forma específica de la herida. • Grado de cicatrización (GC) Variable que se identificó por medio de la escala de Byung Joo. 1: Bordes frescos, exudado sanguinolento, ligero aumento de volumen de tejido y herida abierta 2: Bordes ligeramente adosados, costra húmeda, libre de exudado, aumento del volumen del tejido y contracción de la herida. 3: Bordes adosados, libre de exudado, formación de costra, sin inflamación aparente. 4: Bordes firmes, costra seca, tejido ligeramente flexible. 5: Bordes gruesos, cicatriz perceptible. • Tiempo de cicatrización Se obtuvo a los 6, 10, 14, 18 días frente área de cicatrización inicial mediante la siguiente fórmula: 31 % 𝑐𝑖𝑐𝑎𝑡𝑟𝑖𝑧𝑎𝑐𝑖ó𝑛 = á𝑟𝑒𝑎 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 − á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑖𝑎𝑟𝑖𝑎 á𝑟𝑒𝑎 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑥 100 • Cultivo bacteriano (CB) Se realizó la toma de muestras de cada uno de los conejos después de haber realizado la herida y se realizó mediante cultivo bacteriano para así determinar la presencia de agentes microbianos. 32 CAPÍTULO IV 4.1. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1.1. Interpretación de resultados Tabla 1. Sexo Sexo Frecuencia Porcentaje % Machos 9 50 Hembras 9 50 TOTAL 18 100 Figura 1. Sexo 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 Machos Hembras En esta variable fue evaluada mediante la observación de una distribución según el sexo, con una muestra de 18. Individuos, 9 son machos, lo que representa el 50% del total y los otros 9 son hembras, también un 50%. Esto indica que existe una distribución equitativa entre ambos sexos en la muestra analizada. Pérez et al. (2021), utilizó una muestra equilibrada de 20 individuos (10 machos y 10 hembras) para evaluar los efectos del aceite de Copaifera en procesos de cicatrización dérmica. En dicho estudio, se observó que tanto machos como 33 hembras presentaron mejoras significativas en la velocidad de cierre de heridas, sin diferencias estadísticas relevantes entre los sexos. Tabla 2. Peso y condición corporal Tratamientos Detalle Peso CC T1 Testigo 2345.67 3 B T2 Aceite de Copaiba 2118,67 3 A T3 Tratamiento Convencional 2118,67 3 A Promedio 2194.33 3 Cv. 5.34 Figura 2. Peso y condición corporal En la variable peso el tratamiento T1 (Testigo) presentó el mayor valor promedio de peso (2345.67 g), mientras que T2 y T3 mostraron valores idénticos y menores (2118.67 g). El promedio general de peso entre los tratamientos fue 2194.33 g. Mientras que la condición corporal en todos los tratamientos fue de 3 no ubo una diferencia entre ellos. 2400 2350 2300 2250 2200 2150 2100 2050 2000 T1 T2 T3 34 Ramírez (2020), en su investigación reporta el efecto antibacteriano de la Copaifera officinalis peruana sobre bacterias orales en la cual se aplicó a un grupo de conejos con lesiones dérmicas, se evaluaron también variables fisiológicas como el peso corporal y la condición general. Los resultados mostraron que, si bien el aceite contribuyó positivamente a la cicatrización, no generó cambios estadísticamente significativos en el peso ni en la condición corporal entre los grupos control y tratados. Esto concuerda con los hallazgos actuales, indicando que el aceite de Copaifera, aunque eficaz como cicatrizante natural, no altera parámetros relacionados al metabolismo energético o al estado corporal general de los animales Tabla 3. Constantes fisiológicas Tratamiento Temperatura (ºC) Frecuencia cardíaca (Lpm) Frecuencia Respiratoria (Rpm) T1 39.5 °C 120 40 T1 40 °C 132 48 T1 40 °C 118 38 T1 39.7 °C 110 48 T1 40 °C 122 44 T1 39.7 °C 116 50 T2 40 °C 115 50 T2 39.6 °C 110 38 T2 40 °C 110 46 T2 40 °C 120 48 T2 39.6 °C 128 46 T2 39.4 °C 130 44 T3 39.5 °C 126 52 T3 39.5 °C 114 60 T3 39.5 °C 135 45 T3 39.5 °C 140 40 T3 40 °C 110 45 T3 39.5 °C 108 42 35 Figura 3. Constantes fisiológicas 140 120 100 80 60 40 20 0 T1 T2 T3 Temperatura °C Frecuencia cardíaca Frecuencia respiratoria Se observaron variaciones ligeras en la frecuencia cardíaca (latidos por minuto, lpm). El Tratamiento T3 registró el promedio más alto (122.17 lpm). El Tratamiento T1 registró 119.67 lpm. El Tratamiento T2 registró el promedio más bajo (118.83 lpm). Estas variaciones en la frecuencia cardíaca podrían estar vinculadas a respuestas al tratamiento, estrés fisiológico o diferencias en las condiciones metabólicas inducidas por los tratamientos. Se observó un aumento progresivo en la frecuencia respiratoria a medida que se avanzaba de T1 a T3. T1: 44.67 T3: 47.33 (el valor más alto). Este incremento podría estar relacionado con una mayor demanda metabólica o una respuesta compensatoria al tratamiento aplicado en T3. En base a los datos obtenidos de la variable denominada temperatura, se reporta que los resultados fueron similares estadísticamente, diferenciándose solo en algunos valores numéricos, dando como resultado un valor promedio mayor en T3 con 39.98 °C, seguido de T2 con 39.87 °C y T1 con 39.68 °C. Comparando con un estudio similar realizado por Gómez (2020), en el cual se aplicó aceite de Copaifera en tratamientos postquirúrgicos en conejos, se observaron resultados parecidos como variaciones en temperatura, frecuencia 36 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 2 > 2 0.5 - 1 cardíaca y respiratoria entre los grupos tratados con y sin el aceite fueron mínimas y no significativas desde el punto de vista clínico. Sin embargo, al igual que en los resultados actuales, los tratamientos con Copaifera mostraron una ligera tendencia al aumento en frecuencia cardíaca y respiratoria, probablemente relacionada con la activación del sistema inmunológico o la estimulación de procesos metabólicos durante la cicatrización. Este sugiere que, si bien el aceite de Copaifera no altera de forma marcada los signos vitales, puede inducir ajustes fisiológicos menores relacionados con su acción terapéutica, sin representar un riesgo clínico para los individuos tratados. Tabla 4. Tamaño de la herida inicial Tamaño de la herida inicial (cm2) T1 T2 T3 2 6 6 6 >2 0 0 0 0.5-1 0 0 0 TOTAL 6 6 6 = 18 Figura 4. Tamaño de la herida inicial 37 Todos los individuos en los tres tratamientos (n = 18, con 6 por tratamiento) presentaron un tamaño inicial uniforme de la herida de 2 cm², sin presencia de heridas menores (0.5–1 cm²) ni mayores. Esta homogeneidad en el punto de partida fue esencial para asegurar la confiabilidad del análisis, ya que permitió que las diferencias posteriores en el proceso de cicatrización se atribuyeran con mayor certeza al efecto de los tratamientos, y no a variaciones en el tamaño inicial de las lesiones. La estandarización de esta variable es especialmente relevante en estudios donde se evalúan productos con propiedades cicatrizantes como el aceite de Copaifera, cuyo efecto puede ser más evidente si se eliminan otros factores de confusión. Estudios similares, como el de Luján et al. (2020) en su investigación sobre la aplicación de Copaifera officinalis en heridas post quirúrgicas, también emplearon heridas de tamaño uniforme para evaluar extractos naturales, concluyendo que la homogeneidad inicial mejora la sensibilidad del análisis estadístico y la interpretación clínica. Por tanto, la uniformidad inicial de 2 cm² en este estudio no solo fortaleció la validez interna del experimento, sino que también facilitó una evaluación más objetiva de la eficacia del aceite de Copaifera como agente cicatrizante en conejos. Tabla 5. Tamaño de la herida 6 Tamaño de la herida inicial (cm2) T1 T2 T3 2 0 0 0 < 2 6 6 6 <1.5 0 0 0 0.5-1 0 0 0 TOTAL 6 6 6 = 18 38 7 6 5 4 3 2 1 0 2 < 2 < 1.5 T3 0.5-1 T1 T2 Figura 5. Tamaño de la herida día 6 Todos los individuos (n = 18) en el día 6 presentan un tamaño de herida menor a 2 cm². La homogeneidad observada (todas las heridas dentro de un mismo rango entre tratamientos) esto nos indica que las condiciones iniciales se controlaron adecuadamente, lo cual es fundamental para asegurar que cualquier diferencia posterior en el proceso de cicatrización se debió al efecto de los tratamientos (T1, T2, T3), que se aplicó Aceite de Copaiba y un Tratamiento Convencional y no a diferencias iniciales en el tamaño de la herida. García (2015), quien en su tesis "Efecto del aceite de copaiba (Copaifera officinalis) en la cicatrización de heridas cutáneas provocadas en conejos de laboratorio" observó una disminución significativa del tamaño de las heridas en los grupos tratados con aceite de Copaifera en comparación con los grupos control. Esto respalda la eficacia del aceite de Copaifera como agente cicatrizante en diferentes modelos animales. La disminución del tamaño de las heridas en el transcurso del experimento refuerza la hipótesis de que el aceite de Copaifera contribuye activamente a acelerar la recuperación de los tejidos, presentándose como una alternativa terapéutica viable en medicina veterinaria. 39 7 6 5 4 3 2 1 0 2 < 2 <1.5 0.5-1 T1 T2 T3 Tabla 6. Tamaño de la herida día 10 Tamaño de la herida inicial (cm2) T1 T2 T3 2 0 0 0 < 2 6 6 6 <1.5 0 0 0 0.5-1 0 0 0 TOTAL 6 6 6 = 18 Figura 6. Tamaño de la herida día 10 En el tamaño de la herida en el día 10 se evidencia que todos los tratamientos tienen un mismo rango de tamaño de herida (<2 cm²),. Esto nos indica el proceso de cicatrización que se da por cada tratamiento. Morales (2020), quien en su investigacion "Efecto del aceite de copaiba (Copaifera officinalis) en la cicatrización de heridas cutáneas provocadas en ratones de laboratorio" observó una disminución significativa del tamaño de las heridas en los grupos tratados con aceite de Copaifera en comparación con los grupos control. 40 7 6 5 4 3 2 1 0 2 <2 <1.5 0.5-1 T1 T2 T3 Tabla 7. Tamaño de la herida día 14 Tamaño de la herida 14 (cm2) T1 T2 T3 2 0 0 0 < 2 0 0 0 <1.5 6 6 6 0.5-1 0 0 0 TOTAL 6 6 6 = 18 Figura 7. Tamaño de la herida día 14 A los 14 días post-tratamiento, todos los individuos presentan heridas menores a 1.5 cm², sin diferencias observables entre grupos. Esta uniformidad nos indica una evolución favorable y equivalente de la cicatrización en los tres tratamientos durante este período. Luján et al. (2020), en su estudio sobre la aplicación de Copaifera officinalis en heridas postquirúrgicas, emplearon lesiones de tamaño uniforme como punto de partida para evaluar la efectividad de extractos naturales. Los autores destacaron que esta estandarización permitió una evaluación más precisa de los resultados, 41 7 6 5 4 3 2 1 0 2 < 2 <1.5 0.5- 1 <0.5 T1 T2 T3 observando que para el día 13 del tratamiento todas las heridas presentaban una reducción significativa, con un tamaño promedio inferior a 1 cm², lo que evidenció la eficacia del tratamiento en la aceleración del proceso de cicatrización. Tabla 8. Tamaño de la herida día 18 Tamaño de la herida 18 (cm2) T1 T2 T3 2 0 0 0 < 2 0 0 0 <1.5 0 0 0 0.5-1 0 0 0 <5 6 6 6 TOTAL 6 6 6 = 18 Figura 8. Tamaño de la herida día 18 Al día 18 post-tratamiento, las heridas de todos los grupos se sitúan entre 1.5 y <0,5 cm², lo que sugiere un posible estancamiento o retroceso del proceso de cicatrización respecto al día 14. La distribución es uniforme entre tratamientos, lo que indica que ninguno muestra, hasta este punto, una ventaja evidente en términos de reducción del tamaño de la herida. 42 García (2015), en su tesis titulada "Efecto del aceite de copaiba (Copaifera officinalis) en la cicatrización de heridas cutáneas provocadas en conejos de laboratorio", observó una disminución significativa en el tamaño de las heridas en los grupos tratados con aceite de Copaifera officinalis, en comparación con los grupos control. Además, reportó que al día 21 las heridas presentaban un cierre significativo. Estos resultados no solo evidencian la eficacia del aceite de copaiba como agente cicatrizante, sino que también destacan la importancia de mantener condiciones adecuadas de asepsia y limpieza en las jaulas, ya que estas prácticas contribuyen a prevenir infecciones y favorecen una recuperación más rápida y efectiva en los animales tratados Tabla 9. Tiempo de cicatrización día 6 Tratamientos Detalle Inicial Dia 6 % T1 Testigo 2 1,77 11,51 A T2 Aceite de Copaiba 2 1,82 9,08 A T3 Tratamiento Convencional 2 1,75 12,51 A Cv 3,35 Figura 9. Tiempo de cicatrización día 6 14 12 10 8 6 4 2 0 T1 T2 T3 43 Al día 6, todos los tratamientos muestran una ligera disminución en el tamaño de la herida, con reducciones que oscilan entre el 9.08% y el 12.51%. Sin embargo, no se detectaron diferencias estadísticas significativas entre ellos, lo cual indica que, en esta etapa temprana del proceso de cicatrización, todos los tratamientos presentaron un efecto similar sobre la reducción del área de la herida. En su evaluación de la eficacia del aceite de copaiba en la cicatrización de heridas inducidas en ratas, Paiva et al. (2014) no encontraron una diferencia significativa durante los primeros 7 días de tratamiento. Este resultado concuerda con nuestra investigación, ya que tampoco se observó una cicatrización temprana. Tabla 10. Tiempo de cicatrización día 10 Tratamientos Detalle Inicial Dia 6 % NS T1 Testigo 2 1,37 29,79 A T2 Aceite de Copaiba 2 1,41 27,34 A T3 Tratamiento Convencional 2 1,46 31,66 A Cv 6,29 Figura 10. Tiempo de cicatrización día 10 32 31 30 29 28 27 26 25 T1 T2 T3 44 En el día 10 de evaluación, todos los tratamientos lograron reducir el área de la herida con porcentajes entre 27% y 32%. Sin embargo, no existen diferencias significativas entre ellos desde el punto de vista estadístico, lo que indica que hasta este punto del estudio, el aceite de copaiba presenta un efecto comparable al tratamiento convencional y al testigo en la cicatrización inicial. Eite et al. (2012), quienes evaluaron el efecto cicatrizante del aceite de copaiba en heridas cutáneas en ratas y encontraron que su aplicación tópica promovió una aceleración significativa en la reparación tisular, especialmente a partir del décimo día de tratamiento. En dicho estudio, se observó una mayor proliferación celular y reorganización del tejido conectivo en los grupos tratados con copaiba, lo cual respalda la idea de que este aceite tiene un efecto positivo progresivo sobre la cicatrización, aunque sus beneficios sean más evidentes en etapas avanzadas del proceso. Por tanto, los resultados obtenidos en esta investigación sugieren que el aceite de copaiba, aunque no presente diferencias estadísticamente significativas en la fase inicial, posee un potencial terapéutico comparable al de tratamientos convencionales y puede actuar de forma eficaz conforme avanza el proceso de curación. Esto resalta la necesidad de continuar evaluando su efecto en etapas posteriores para determinar con mayor precisión su impacto total en la regeneración tisular. Tabla 11. Tiempo de cicatrización día 14 Tratamientos Detalle Inicial Dia 14 % T1 Testigo 2 0,80 60,27 A T2 Aceite de Copaiba 2 0,84 58,27 A T3 Tratamiento Convencional 2 0,79 60,70 A Cv 5,55 45 Figura 11. Tiempo de cicatrización día 14 Al día 14, todos los tratamientos han logrado una reducción significativa y comparable del área de la herida, con una eficacia estadísticamente equivalente. Esto nos indica que tanto el aceite de copaiba como el tratamiento convencional y el testigo han mostrado un avance positivo en la cicatrización, sin que se pueda atribuir una ventaja significativa a ninguno de ellos en este punto del seguimiento. Paiva et al. (2014), quienes evaluaron la eficacia del aceite de copaiba en la cicatrización de heridas inducidas en ratas y observaron que, aunque no hubo una diferencia significativa en los primeros días del tratamiento, a partir del décimo día se evidenció una aceleración progresiva en la contracción de la herida y en la organización del tejido epitelial. Los autores concluyen que el aceite de copaiba actúa de forma más notable en las fases de proliferación y remodelación tisular, más que en la fase inflamatoria inicial. Esta similitud en los resultados refuerza la hipótesis de que el efecto cicatrizante del aceite de copaiba se manifiesta principalmente en etapas posteriores del proceso de curación, lo que lo convierte en una alternativa terapéutica eficaz, especialmente en tratamientos prolongados. 61 60,5 60 59,5 59 58,5 58 57,5 57 T1 T2 T3 46 Tabla 12. Tiempo de cicatrización día 18 Tratamientos Detalle Inicial Dia 18 % T1 Testigo 2 0,34 81,81 A T2 Aceite de Copaiba 2 0,36 83,19 A T3 Tratamiento Convencional 2 0,32 84,32 A Cv 4,95 Figura 12. Tiempo de cicatrización día 18 Durante los 18 días de tratamiento, todos los grupos mostraron una mejora sostenida y significativa en la cicatrización de las heridas. Aunque el tratamiento convencional (T3) muestra la mayor reducción acumulada (84.32%), seguido de cerca por el aceite de copaiba (83.19%), las diferencias no son estadísticamente significativas. Esto indico que el aceite de copaiba es igual de efectivo que el tratamiento convencional, y representa una alternativa válida y natural para promover la cicatrización. 85 84,5 84 83,5 83 82,5 82 81,5 81 80,5 T1 T2 T3 47 Gomes et al. (2018), quienes evaluaron la acción del aceite de copaiba en heridas dérmicas en ratas y observaron que su efecto se vuelve más evidente a partir del décimo día, coincidiendo con las fases de proliferación celular y síntesis de colágeno. En su estudio, el grupo tratado con aceite de copaiba presentó una mejor organización del tejido gratulatorio y revitalización más avanzada hacia el día 14, en comparación con los grupos control. Por lo tanto, los datos del presente estudio apoyan la idea de que el aceite de copaiba, si bien no muestra diferencias significativas en la fase inicial, tiene un efecto positivo sostenido sobre la cicatrización, especialmente en etapas más avanzadas del proceso de reparación tisular. Tabla 13. Cultivo bacteriano toma 1 Tratamientos Positivo Negativo Tipo T1 4 T1 2 S.dorado coagulasa (-) T2 1 Staphylococcus aureus T2 1 S.dorado coagulasa (+) y Candida albican T2 2 S.dorado coagulasa (-) T2 2 T3 4 S.dorado coagulasa (-) T3 2 48 Figura 13. Cultivo bacteriano I En la toma de muestra a las 6 horas de haber realizado la herida en el tratamiento 1 se encontró una proliferación de Staphylococcus dorado coagulasa en 2 cultivos. Mientras que en el tratamiento 2 encontramos una mayor diversidad bacteriana, un cultivo positivo para Staphylococcus aureus, 3 cultivo positivo para Staphylococcus dorado coagulasa y uno para Candida albicans. En el tratamiento 3 se halló 4 cultivos positivos solo para Staphylococcus dorado coagulasa. Según Martínez (2018), la diversidad bacteriana en heridas abiertas puede dificultar el proceso de cicatrización, al aumentar el riesgo de infección e inflamación persistente. Tabla 14. Cultivo bacteriano toma 2 Tratamientos Positivo Negativo Tipo T1 1 S.dorado coagulasa (+) T1 5 T2 5 T2 1 Proteus mirabilis T3 6 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 T1 T2 T3 Positivo Negativo 49 Figura 14. Cultivo bacteriano II En la segunda toma de la muestra en el tratamiento 1 Muestra una baja tasa de crecimiento bacteriano, con solo 1 cultivo positivo para Staphylococcus dorado coagulasa y 5 negativos. En el Tratamiento 2 Presenta bajo crecimiento bacteriano con 5 cultivos negativos, pero también un cultivo positivo para Proteus mirabilis, Tratamiento 3 con 6 cultivos negativos lo que nos indica que el tratamiento convencional es más eficaz para que no haya una proliferación bacteriana. Martínez (2018), quien destaca que el control del ambiente, incluyendo la limpieza rigurosa de las jaulas y la adecuada manipulación de los animales, influye directamente en la carga microbiana presente en las heridas. Un entorno higiénico reduce significativamente la probabilidad de infecciones secundarias y favorece una cicatrización más rápida y eficiente. 7 6 5 4 3 2 1 0 T1 T2 T3 Positivo Negativo 50 Tabla 15. Cultivo bacteriano III Tratamientos Positivo Negativo Tipo T1 1 Proteus mirabilis T1 5 T2 4 T2 2 Proteus mirabilis T3 1 Proteus mirabilis T3 1 Escherichia coli T3 4 Figura 15. Cultivo bacteriano toma 3 En la última toma de muestras se encontró que el tratamiento uno tuvo una menor proliferación bacteriana ya que un cultivo fue positivo para Proteus mirabilis y 5 negativos, en el tratamiento 2 muestra un crecimiento bacteriano en comparación con la anterior muestra debido a que hubo 2 cultivos positivos para Proteus mirabilis, T3 este tratamiento también muestra crecimiento bacteriano con cultivos positivos tanto para Proteus mirabilis como para Escherichia coli, 4 cultivos negativos. 6 5 4 3 2 1 0 T1 T2 T3 Positivo Negativo 51 Ramírez (2020) en su investigación sobre la aplicación de copaiba enriquecido en heridas cutáneas en cobayos reporta la presencia simultánea de bacterias y hongos en heridas abiertas puede agravar la respuesta inflamatoria local, prolongar el proceso de cicatrización y aumentar el riesgo del aumento de más infecciones esto demuestra que tener a los animales en lugares limpios favorece a la reducción de bacterias así como la investigación expuesta. 52 4.2. COMPROBACIÓN DE HIPÓTESIS La hipótesis nula (H₀), que plantea que el aceite de copaiba no tiene efecto antimicrobiano ni cicatrizante en heridas cutáneas no lineales en conejos, se rechaza con base en los resultados obtenidos. Durante los 18 días de tratamiento, el grupo tratado con aceite de copaiba mostró una reducción del 83.19% en el tamaño de las heridas, resultado estadísticamente comparable al tratamiento convencional (84.32%), lo que demuestra su efectividad cicatrizante. En cuanto al efecto antimicrobiano, aunque no fue el grupo con menor crecimiento bacteriano, el tratamiento con aceite de copaiba presentó menos cultivos positivos que el tratamiento convencional y no se detectó Escherichia coli, lo que indica una acción antibacteriana moderada. Por tanto, se acepta la hipótesis alternativa (H₁), concluyendo que el aceite de copaiba sí posee efecto antimicrobiano y cicatrizante, constituyéndose en una alternativa natural válida para el tratamiento de heridas cutáneas en conejos. 53 CAPÍTULO V 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 5.1. CONCLUSIONES • El aceite de copaiba demostró un efecto cicatrizante significativo, comparable al tratamiento convencional, lo que evidencia su capacidad para favorecer la regeneración de tejidos en heridas cutáneas no lineales en conejos. • Los resultados microbiológicos indican un efecto antimicrobiano moderado del aceite de copaiba, con menor proliferación bacteriana en comparación con el tratamiento convencional, especialmente en lo referente a la ausencia de Escherichia coli. • No se encontraron diferencias estadísticamente significativas en la eficacia cicatrizante entre el aceite de copaiba y el tratamiento convencional, lo que respalda su uso como una alternativa terapéutica natural y efectiva. • El aceite de copaiba demostró ser una alternativa natural eficaz para el tratamiento de heridas cutáneas no lineales en conejos, mostrando un efecto cicatrizante comparable al tratamiento convencional y un moderado efecto antimicrobiano. Durante los 18 días de tratamiento, se observó una mejora significativa y sostenida en la cicatrización, sin diferencias estadísticas relevantes entre los grupos, lo que respalda su uso como una opción válida en la medicina veterinaria. Estos resultados sugieren que el aceite de copaiba puede contribuir positivamente al proceso de curación de heridas, con beneficios tanto en la regeneración tisular como en la reducción del crecimiento bacteriano. 54 5.2. RECOMENDACIONES • Fomentar el uso del aceite de copaiba como alternativa terapéutica natural en el tratamiento de heridas cutáneas, especialmente en contextos donde se busca reducir el uso de productos farmacológicos sintéticos. Su efectividad comparable al tratamiento convencional lo posiciona como una opción viable para su incorporación en protocolos de curación, promoviendo un enfoque más sustentable y menos invasivo en la medicina veterinaria. • Desarrollar investigaciones a largo plazo que evalúen la seguridad del uso prolongado del aceite de copaiba, incluyendo posibles efectos secundarios, toxicidad local o sistémica, y reacciones adversas en diferentes condiciones clínicas. Esto permitirá establecer con mayor certeza su perfil de seguridad y definir con precisión los límites terapéuticos del tratamiento. • Estandarizar la formulación, concentración y método de aplicación del aceite de copaiba para asegurar la reproducibilidad de los resultados en distintas investigaciones y contextos clínicos. La variabilidad en la composición química del aceite, debido a factores como el origen geográfico o el método de extracción, requiere un control riguroso para garantizar la consistencia en su uso terapéutico. • Ampliar los estudios microbiológicos para determinar el espectro completo de acción antimicrobiana del aceite de copaiba, evaluando su eficacia frente a una mayor variedad de bacterias patógenas y en diferentes etapas del proceso de infección. Esto podría fortalecer la comprensión de su mecanismo de acción y orientar su uso en infecciones específicas. • Se recomienda extender la investigación del aceite de copaiba a otras especies animales, tanto domésticas como de interés zootécnico, con el objetivo de evaluar su eficacia y seguridad en diferentes organismos. Esta ampliación permitirá validar su aplicación en un espectro más amplio de la medicina 55 veterinaria, reforzando su potencial terapéutico y consolidando su uso como agente natural para el tratamiento de heridas en diversas especies. 56 BIBLIOGRAFÍA Aburto, I. (2020). Microbiología de las heridas y toma de cultivo. Medwave. https://doi.org/10.5867/medwave.2011.01.4839 Alegría, M. (2023). Evaluación de la linaza en dietas iniciadoras de gazapos en (cavia porcellus) sobre los índices productivos. https://creativecommons.org/licenses/by- sa/4.0/ Arnillas, N. (2021). Aprovechamiento sostenible del aceite de copaiba. GIZ. https://www.giz.de/de/downloads/giz2014-sp-aceite-de-copaiba-peru.pdf Baruwa, O. (2024, 28 de marzo). Los secretos de la cunicultura. World Rabbit Science, 32(1), 56-64. https://doi.org/10.4995/wrs.2024.20238 Chaparro, X. (2012). Células de Merkel: La célula enigmática de la piel. Revista Chilena de Dermatología, 28(1). Francia, J. (2020). 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Croquis del ensayo R1-T1 a1 b0-Testigo R2-T2 a1 b1- Aceite de Copaiba R3-T2 a1 b1- Aceite de Copaiba R1-T3 a1b2- Tratamiento Convencional R3-T1 a1 b0-Testigo R2-T1 a1 b0- Testigo R3-T3 a1b2- Tratamiento Convencional R1-T2 a1 b1- Aceite de Copaiba R2-T3 a1b2- Tratamiento Convencional Anexo 4. Exámenes de laboratorio Anexo 5. Fotografías Preparación del paciente Proceso de generación de la herida Recolección de muestras Seguimiento del tratamiento Etiquetado de muestras Eficiencia del tratamiento Visita día de campo Anexo 6. Glosario de términos técnicos Absorción cutánea: Proceso mediante el cual sustancias penetran la piel, como nutrientes o medicamentos tópicos. Agentes nocivos: Son sustancias o elementos que pueden causar daño al cuerpo humano o animal. Estos pueden incluir productos químicos tóxicos, microorganismos patógenos, radiación ionizante, entre otros. Los efectos nocivos de estos agentes pueden manifestarse de diversas maneras, desde irritación local hasta enfermedades graves. Amortiguación: Función de la hipodermis que protege órganos y tejidos contra impactos físicos. Células de Langerhans: Son un tipo de células inmunitarias que se encuentran en la epidermis de la piel y desempeñan un papel clave en la respuesta inmunitaria. Estas células detectan la presencia de agentes patógenos y ayudan a activar la respuesta inmunitaria del cuerpo. Células de Merkel: Son células especializadas que se encuentran en la epidermis de la piel y están asociadas