UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA TEMA PREVALENCIA DE Mycoplasma haemofelis EN FELINOS DE LA PARROQUIA HUACHI DE LA CIUDAD DE AMBATO, PROVINCIA DE TUNGURAHUA. Proyecto de Investigación, previo a la obtención del título de Médica Veterinaria y Zootecnista, otorgado por la Universidad Estatal de Bolívar a través de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente. Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia. AUTORA VANESSA MONSERRATH REYES CASANOVA DIRECTORA MED. ALEJANDRA ELIZABETH BARRIONUEVO MAYORGA. Mg. Guaranda – Ecuador 2021 III DEDICATORIA “Todos los triunfos nacen cuando nos atrevemos a brillar” Me gustaría dedicar esta Tesis a toda mi familia y sobre todo a mi abuelita Angelita que, aunque ya no esté en este mundo, ella fue un motor muy importante en mi vida, enseñándome que no cualquier persona puede hacer lo que tú haces, inspirándome día a día en los motivos por el cual se debe vivir, aunque tu vida se consuma poco a poco. A mis amigas Nao y Daya las cuales siempre han sido un pilar de apoyo en cada uno de mis pasos, estando presentes en buenos y malos momentos, brindándome siempre la fuerza de estar aquí y seguir adelante a pesar de la adversidad, permitiéndome que hoy en día sea la persona que soy. A una gran amistad mi amigo Rodolfo, aquel que siempre supo brindarme su mano en cualquier momento de adversidad y siempre estuvo presente demostrándome que por más que se apriete la soga, Dios nunca nos va a ahorcar. A mi pequeña, la cual siempre me inspiro que se puede hacer algo más, que siempre se puede dar más cuando nace del corazón, que siempre se debe ayudar sin esperar nada a cambio y que muchas personas van a disfrutar de tus fracasos, me enseñó a tener un motivo por el cual levantarme todos los días y ser mejor, aunque las personas no cambien, siempre te querré toda mi vida, gracias por las enseñanzas y por haber estado en mi camino. Vanessa Monserrath Reyes Casanova AGRADECIMIENTO Quiero expresar un sincero agradecimiento, en primer lugar, a Dios por brindarme salud, fortaleza, capacidad y a todas las personas que estuvieron conmigo, apoyándome día tras día en esta nueva meta. Asimismo, quiero hacer un reconocimiento especial a mi Madre por todo su esfuerzo, comprensión y apoyo incondicional para no decaer cuando todo parecía complicado e imposible, a mis hermanos que con sus palabras me hacían sentir orgullosa de lo que soy y de lo que puedo llegar hacer. Ojalá algún día yo me convierta en su fuerza para que puedan seguir avanzando en su camino. De igual forma, agradezco sobre todo a dos amigos profesionales que me supieron brindar una mano amiga, me abrieron las puertas de su hogar, colocando sobre mí una confianza única y sobre todo una amistad, los cuales me han visto crecer como persona, y gracias a sus conocimientos hoy puedo sentirme dichosa y contenta de lo que he logrado. Me faltarían páginas para agradecer a todos los que se han involucrado en la realización de este trabajo, sobre todo a una persona muy importante en mi vida, mi amiga Verónica, la cual supo ayudarme año tras año, con altos y bajos; de la cual toda mi vida estaré siempre agradecida y toda mi vida le deberé algo, aunque siempre me falle tendrá un lugar muy importante en mi corazón y nunca podré terminar de agradecerle todo lo que ha hecho por mí. Deseo expresar gratitud a la Universidad Estatal de Bolívar, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia, y a cada uno de los Docentes quienes impartieron sus conocimientos y por darme la oportunidad de ser un profesional. Para ellos, muchas gracias por todo. Vanessa Monserrath Reyes Casanova. INDICE DE CONTENIDO DESCRIPCIÓN Pág. I. INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS 1 II. PROBLEMA 3 III. MARCO TEÓRICO 4 3.1. RESEÑA HISTÓRICA 4 3.1.1. Reclasificación 4 3.2. GENERALIDADES 5 3.3. CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA 8 3.4. ETIOLOGÍA 8 3.5. FACTORES PREDISPONENTES 9 3.5.1. Del animal 9 3.5.2. Del ambiente 9 3.6. FACTORES DE RIESGO 10 3.7. TRANSMISIÓN 10 3.8. PATOGENIA 11 3.8.1. Periodo de incubación 11 3.9. SIGNOS CLÍNICOS 12 3.10. DIAGNÓSTICO 13 3.10.1. Frotis sanguíneo 14 3.10.2. Hematología 14 3.10.3. PCR (cadena de reacción de la polimerasa) 14 3.11. TÉCNICAS DE TINCIÓN 15 3.11.1. Tinción Diff quick 15 3.12. KIT DE DETECCIÓN MOLECULAR MYCOPLASMA FELINO 15 3.13. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL 15 3.14. TRATAMIENTO 16 3.14.1. Antibioticoterapia 16 3.14.2. Inmunosupresión 17 3.14.3. Terapias de soporte 17 3.15. PRONÓSTICO 17 3.16. CONTROL Y PROFILAXIS 18 3.17. SALUD PÚBLICA 18 IV. MATERIALES Y METODOS 19 4.1. MATERIALES 19 4.1.1. Ubicación de la investigación 19 4.1.2. Localización de la investigación 19 4.1.3. Situación geográfica y climática 19 4.1.4. Zona de vida 19 4.1.5. Materiales y equipos 20 4.1.5.1. Material experimental 20 4.1.5.2. Material de campo 20 4.1.5.3. Instalación 21 4.1.5.4. Material de oficina 21 4.2. MÉTODOS 21 4.2.1. Método de campo 21 4.2.2. Factor en estudio 21 4.2.3. Análisis estadístico y funcional 22 4.2.4. Medición experimental 22 4.2.5. Métodos evaluados y datos tomados 23 4.2.6. Procedimiento experimental 24 4.2.6.1. Frotis sanguíneo 24 4.2.6.2. Hemograma 25 4.2.6.3. Kit PCR 25 4.2.6.3. Frotis sanguíneo 24 4.2.7. Manejo del experimento 27 4.2.7.1. Anamnesis 27 4.2.7.2. Chequeo clínico 27 4.2.7.3. Tomas de muestras 28 4.2.7.4. Identificación de las muestras 28 4.2.8. Diagnostico relativo 28 4.2.9. Envió de muestras 29 4.2.10. Recepción de resultados 29 4.2.11. Tabulación de datos 29 V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 30 5.1. PREVALENCIA (PV) 30 5.2. EDAD (E) 31 5.3. SEXO (S) 32 5.4. RAZA (R) 33 5.5. PESO (P) 34 5.6. CONDICIÓN CORPORAL (C/C) 35 5.7. COLOR DEL PELAJE (CP) 36 5.8. ANÁLISIS DE SANGRE (AS) 37 VI. COMPROBACIÓN DE LA HIPÓTESIS 38 VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 39 7.1. CONCLUSIONES 39 7.2. RECOMENDACIONES 40 BIBLIOGRAFÍA ANEXOS ÍNDICE DE CUADROS DESCRIPCIÓN CUADRO N° Pág. 1. Clasificación taxonómica Mycoplasma haemofelis 8 2. Signos clínicos de Mycoplasma Haemofelis 13 3. Condiciones meteorológicas y climáticas 19 4. Variable prevalencia 30 5. Variable edad 31 6. Variable sexo 32 7. Variable raza 33 8. Variable peso 34 9. Variable condición corporal 35 10. Variable color de pelaje 36 11. Variable análisis de sangre 37 12. Variable análisis hemograma 38 13. Variable análisis leucograma 41 ÍNDICE DE GRÁFICOS DESCRIPCIÓN GRÁFICO N° Pág. 1. Variable prevalencia 30 2. Variable edad 31 3. Variable sexo 32 4. Variable raza 33 5. Variable peso 34 6. Variable condición corporal 35 7. Variable color de pelaje 36 8. Variable análisis de sangre 37 9. Variable análisis hemograma hematrocrito 38 10. Variable análisis hemograma hemoglobina 38 11. Variable análisis hemograma eritrocitos 39 12. Variable análisis hemograma volumen corpuscular medio 39 13. Variable análisis hemograma hemoglobina corpuscular media 40 14. Variable análisis hemograma concentración de hemoglobina corpuscular media 40 15. Variable análisis hemograma reticulocitos 40 16. Variable análisis leucograma leucocitos 42 17. Variable análisis leucograma neutrófilos 42 18. Variable análisis leucograma linfocitos 42 19. Variable análisis leucograma neutrófilos en banda 43 20. Variable análisis leucograma monocitos 43 21. Variable análisis leucograma eosinófilos 43 22. Variable análisis leucograma basófilos 44 ÍNDICE DE ANEXOS DESCRIPCIÓN ANEXO N° 1. Ubicación del proyecto de Investigación 2. Base de datos 3. Historia clínica 4. Resultado de laboratorio 4. Fotos virtual realizadas durante el proceso de investigación RESUMEN En el cantón Ambato, Parroquia Huachi Chico ubicada a 2460 msnm, se comprobó la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos; Se aplicó un modelo estadístico analítico descriptivo en 30 muestras sanguíneas; Se calculó porcentajes, medias, frecuencia y gráfico; Los objetivos planteados fueron: 1) Determinar la presencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos mediante frotis seriado, hemograma y kit de prueba rápida. 2) Identificar cuál de las pruebas es la más eficiente en el diagnóstico de Mycoplasma haemofelis. y 3) Investigar los valores hematológicos en la infección por Mycoplasma haemofelis; Las variables evaluadas y resultados fueron; Prevalencia (PV): Positivo 20%; Edad (E): 2 - 3 años 100%; Sexo (S): hembra 67% y macho 33%; Raza (R): Mestizo 66%, Ragdoll 17% y Romano 17%; Peso (P): 2kg 50%, 3kg 33% y >3 kg 17%; Condición corporal (C/C): Delgado 2/9 - 50%, Normal 5/9 - 33% y Obeso 9/9 - 17%; Color de pelaje (CP): Claro 67% y Obscuro 33%; Análisis de sangre (AS) (hemograma, frotis sanguíneo y Kit de PCRunTM) Positivo100%; Finalmente, se deduce que esta investigación determinó que la prevalencia de Mycoplasma haemofelis, considerada como una patología infecciosa importante de riesgo zoonótico en donde la mayor parte de los gatos sin distinción de sexo, edad o raza están expuestos a la infestación y como no presenta signos patognomónicos su diagnóstico resulta ser complejo lo que indica que la principal fuente de transmisión es la Ctenocephallides feliz. Palabras claves: Mycoplasma haemofelis, Prevalencia, Ctenocephallides feliz. SUMMARY In the Ambato canton, Huachi Chico Parish located at 2460 masl, the prevalence of Mycoplasma haemofelis in domestic cats was verified; A descriptive analytical statistical model was applied in 30 blood samples; Percentages, means, frequency and graph were calculated; The objectives set were: 1) To determine the presence of Mycoplasma haemofelis in domestic cats by means of serial smears, hemogram and rapid test kit. 2) Identify which of the tests is the most efficient in the diagnosis of Mycoplasma haemofelis. and 3) Investigate the hematological values ​​in Mycoplasma haemofelis infection; The variables evaluated and results were; Prevalence (PV): Positive 20%; Age (E): 2 - 3 years 100%; Sex (S): 67% female and 33% male; Race (R): Mestizo 66%, Ragdoll 17% and Romano 17%; Weight (P): 2kg 50%, 3kg 33% and> 3kg 17%; Body condition (C / C): Slim 2/9 - 50%, Normal 5/9 - 33% and Obese 9/9 - 17%; Coat color (CP): Light 67% and Dark 33%; Blood test (AS) (complete blood count, blood smear and PCRunTM Kit) Positive 100%; Finally, it is deduced that this research determined that the prevalence of Mycoplasma haemofelis, considered as an important infectious pathology of zoonotic risk where most of the cats without distinction of sex, age or race are exposed to the infestation and as they do not present signs pathognomonic, its diagnosis turns out to be complex, which indicates that the main source of transmission is Ctenocephallides feliz. Keywords: Mycoplasma haemofelis, Prevalence, Ctenocephallides feliz. CÁPITULO I. INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS La salud depende de un equilibrio biológico, psicológico y social del animal con el ambiente que lo rodeo, esta situación de interdependencia armónica involucra la participación dinámica de adversos elementos en el ecosistema, cuya sobrevivencia está supeditada a la interacción entre la unidad biológica y su ambiente; cuando esta homeostasis se inclina contra el hospedador da lugar a las patologías Dentro de las enfermedades infecciosa más comunes en gatos es la micoplasmosis felina conocida como anemia infecciosa felina o hemobartonellosis, es causada por la especie Mycoplasma haemofelis, microorganismo sanguíneo de distribución mundial; ataca los eritrocitos adosándose a la superficie de estos, en donde se multiplica por fisión binaria produciendo una hemólisis intra y extravascular, lo que desliga un cuadro anémico Microorganismos existentes cuyo tamaño varían entre 0,3 a 0,8µm de diámetro y necesitan un medio de crecimiento rico que contenga suero; debido a la carencia de pared celular, esta especie de bacterias son polimórficas, inmóviles, aerobias, anaerobias facultativas y cocoide de tamaño 0,6µm de diámetro formado con frecuencias cadenas cortas de 3 a 6 organismos El ciclo biológico de este microorganismo implica un hospedador intermediario, un ectoparásito artrópodo vector hematófago Ctenocephallides feliz, que transmite la infección durante su alimentación a un hospedador definitivo Felis catus donde madura, además la patología puede transmitirse a través de mordeduras o arañazos, vía transplacentaria y por transfusión sanguínea de gatos portadores. Aunque la identificación de Mycoplasma haemofelis en la superficie de los glóbulos rojos mediante tinciones especiales del frotis sanguíneo de gatos infectados, es el método disponible, útil y sensible para confirmar el diagnostico Dentro de los factores de riesgo se consideran todos los gatos sin distinción de edad, raza o sexo pueden adquirir la enfermedad y la transmisión de Ctenocephallides feliz que facilita la propagación del agente infeccioso. La Medicina Veterinaria es un campo en cambio constante; se deben seguir las precauciones de seguridad convencionales, pero a medida que las nuevas investigaciones y la experiencia clínica expanden nuestros conocimientos, puede ser necesario o apropiado implementar cambios en la terapéutica y la farmacoterapia Bajo las consideraciones anotadas, desde el punto de vista de la salud pública, argumenta la conducción de la investigación que tuvo como primicia despejar incógnitas de estudios; determinando la prevalencia de Mycoplasma haemofelis; para lo cual se plantearon los siguientes objetivos: · Determinar la presencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos mediante frotis seriado, hemograma y kit de prueba rápida · Identificar cuál de las pruebas es la más eficiente en el diagnostico Mycoplasma haemofelis · Investigar la variación de los valores hematológicos en la infección por Mycoplasma haemofelis CÁPITULO II. PROBLEMA Ningún animal vive aislado en el ambiente que habita, se encuentran en medio de una compleja trama de factores que gravitan en su salud; en el complejo contacto dinámico del animal con la naturaleza se encuentran las explicaciones y causas de los problemas de salud que pudieran aquejarlo. La hemoplasmosis es considerado como una de las enfermedades infecciosas más severas, provocando anemias hemolíticas causada por Mycoplasma haemofelis. puede ocurrir pérdida de peso, anorexia, depresión, membranas y mucosas pálidas, ictericia, debilidad, fiebre o hipotermia, dolor en las articulaciones, hiperestesia y ocasionalmente, esplenomegalia, depresión, deshidratación y caquexia; La prevención se basan en llevar un correcto plan sanitario mediante el control de Ctenocephallides feliz, inmunización y desparasitación interna y externa; Dado que la enfermedad es contagiosa, se deben adoptar rápidas medidas profilácticas, tales como el diagnóstico temprano, efectuando análisis hematológicos de rutina Ya que el interés por tenencia responsable de mascotas y el bienestar animal va incrementándose a diario, fue oportuno realizar esta investigación, la cual beneficio a la sociedad por ser considerada como una base para emprender campañas de prevención para el Mycoplasma haemofelis. reduciendo considerablemente el número de casos y las víctimas mortales que puede ocasionar esta patología Con estos antecedentes, lo expuesto se aprecia la importancia de esta indagación que busco incentivar las áreas de investigación en beneficio de la salud publica; con el fin de proporcionar datos y suministrar información actualizada, considero pertinente y muy necesario determinar la prevalencia de Mycoplasma haemofelis, en la parroquia Huachi, que permitió identificar y analizar los factores de riesgo para luego presentar alternativas posibles de solución. CÁPITULO III. MARCO TEORICO 3.1. RESEÑA HISTÓRICA Los organismos antiguamente conocidos como Haemobartonella spp y Eperythrozoon spp son pequeñas bacterias pleomórficas que parasitan a los glóbulos rojos de un amplio rango de animales vertebrados. Estos parásitos sanguíneos fueron observados por primera vez en ratones (E. coccoides) y perros (H. canis) en Alemania en 1928. Desde entonces, la presencia de estos hemoparásitos fue descrita en cerdos, ovejas, cabras, bovinos, llamas y alpacas, gatos, perros, ratas, monos e incluso en seres humanos, en todo el mundo (Witman, O. 2010). La primera documentación de un organismo epi-eritrocítico desde un gato anémico fue hecha en Sudáfrica y debido a su semejanza a Eperythrozoon spp, fue nombrado Eperythrozoon felis, aunque no se realizó ningún otro estudio, posteriormente fue reconocido en los Estados Unidos. El nombre de Haemobartonella felis, fue sugerido, ya que en contraste con Eperythrozoon spp, Haemobartonella spp se adhiere firmemente al eritrocito y raramente se encuentra libre en el plasma (Cruz, A. 2005). En el año 1953, Flint y Moss reconocieron a Haemobartonella felis. como el agente causal de la “Anemia Infecciosa Felina”, una enfermedad contagiosa en los gatos. Dos especies de Haemobartonella han sido descritas en gatos; el organismo “Ohio” o la forma grande de Haemobartonella felis. el agente causal de la enfermedad y el organismo “California” o la forma pequeña, que parece tener virulencia baja (Messick, J. 2004). 3.1.1. Reclasificación La verdadera naturaleza de Haemobartonella spp y Eperythrozoon spp ha tenido confusiones que han persistido sobre los últimos 50 años. Hasta el año 1993, el orden rickettsiales contenía 3 familias: Rickettsiaceae, Bartonellaceae y Anaplasmaceae. Estas bacterias hemotrópicas eran clasificadas como miembros de la familia Anaplasmataceae, del orden rickettsiales. Esta clasificación fue asignada con base a sus características biológicas y fenotípicas, por su pequeño tamaño, parasitismo del eritrocito, tinción gram negativa, acompañado de la transmisión por artrópodos chupadores de sangre (Méndez, J e Hidalgo, L. 2013). Sin embargo, debido a la carencia de pared celular, flagelos, su pequeño tamaño, la resistencia que genera a la penicilina, la susceptibilidad a las tetraciclinas y gracias a las técnicas de laboratorio y la posibilidad de realizar análisis moleculares se observó que la secuencia del gen 16 ARNr les daba una particularidad, que permitió que se clasificara en el género Mycoplasma de la de la clase Mollicutes (Messick, J. 2004 y Witman, O. 2010). Posteriormente, fue propuesto que la clasificación taxonómica debía ser modificada para reflejar los nuevos conocimientos de la afiliación filogenética de Haemobartonella spp y Eperythrozoon spp con el género Mycoplasma y que la designación “Candidatus” sería adjuntada a las especies que fueran nuevas y/o no completamente descritas. Entonces, Haemobartonella felis fue transferido al género Mycoplasma como Mycoplasma Haemofelis a la forma grande y el organismo California o la forma pequeña, que es una especie con caracterización incompleta, fue designada como Candidatus Mycoplasma Haemominutum, Candidatus Mycoplasma Turicensis, Candidatus Mycoplasma Haemotoparvum (Messick, J. 2004). La hemobartonelosis felina, o anemia infecciosa felina, es un término inexacto, ya que hay muchos organismos infecciosos que pueden ocasionar un cuadro de anemia, y por esta razón, actualmente se le conoce como "Mycoplasmosis hemotrópica felina", que abarca en general los tipos de micoplasma (Bernad, G. 2009) 3.2. GENERALIDADES Las micoplasmas hemotrópicos o hemoplasmas son causantes de anemia infecciosa en gatos de todo el mundo, recientemente y gracias al desarrollo de nuevas técnicas moleculares, Haemobartonella felis fue reclasificada como una micoplasma hemotrópico con tres especies diferentes: Mycoplasma Haemofelis, Candidatus Mycoplasma haemominutum y Candidatus Mycoplasma turicensis (Palmero, M y Carballés, V. 2012). Las micoplasmas hemotrópicos son pequeñas bacterias gram negativas cuyo tamaño varía entre (0.3 a 0.8 μm) se pueden encontrar en forma de cocos, bacilos o en forma de discos y no poseen pared celular, infectan a una gran variedad de especies de mamíferos dentro de los cuales se encuentran los gatos domésticos, gatos domésticos salvajes y los humanos. El periodo de incubación oscila entre 6 y 17 días pos-infección (Palmero, M. 2010). Se considera una enfermedad pandémica (distribución mundial); la infección natural ocurre, probablemente, por picaduras de pulgas o garrapatas, heridas de gatos, mordeduras fundamentalmente, coito y también transmisión vertical: placenta y leche materna. Los cuadros severos generalmente ocurren en gatos con enfermedades virales inmunosupresoras (Durán, F. 2013). Se piensa que no existe predilección por raza o sexo; sin embargo, los machos adultos entre los 3 años de edad parecen ser las poblaciones más vulnerables debido a su estilo de vida (Norsworthy, G. y Crystal, M. 2009). El Mycoplasma haemofelis es una bacteria gran negativa perieritrocitaria de forma coccoides, incapaz de producir energía y sintetizar algunos componentes celulares, por lo que depende de una célula anfitriona, como el eritrocito, para poder desarrollarse y producir signos clínicos (Cushing, I. 2013). La mayoría de las veces se presenta en fase subclínica, existiendo casos de manifestación aguda, causando una anemia hemolítica grave, pirexia y decaimiento (Duran, F. 2013). Los microorganismos poseen una membrana simple y su citoplasma contiene gránulos, se puede observar algunos organelos y vacuolas en su interior. La microscopía permite observar la adherencia del hemoparásito a ciertos puntos del eritrocito. Se conocen dos clases de M. haemofelis: · La de tamaño pequeño; cepa California de H. felis (H. felis-CA) · La de forma larga; cepa Ohio de H. felis (H. felis-OH). (Benard, G. 2009) En algunos gatos pueden producirse infecciones simultáneas con múltiples especies de hemoplasmas (Sykes, J. 2009). Se han identificado cuatro especies en gatos domésticos: · Mycoplasma Haemofelis (Mhf), la más patógena · California o Candidatus Mycoplasma Haemominutum (Mhm), menos patógena · Mycoplasma Turicensis (Mtc) (Sykes, J. 2009) · Candidatus Mycoplasma Haemotoparvum (Mhp) (Sykes, J. 2010) Las especies tiene una presentación variada, siendo así que la Micoplasmosis dada por Mhf, al ser la especie más patógena, causa cuadros de anemias hemolíticas intensas acompañada de una reticulocitosis, normoblastosis y en ocasiones leucopenia y trombocitopenia, junto con cuadros febriles e ictericia; evidente aún en animales inmunosuprimidos por enfermedades virales asociadas como la leucemia viral felina (FeLV) o inmunodeficiencia viral felina (FIV) (Sykes, J. 2009). La Micoplasmosis causada por Mhm. puede considerarse levemente patógena, en gatos inmunocompetentes; provocando ocasionalmente cuadros anémicos. En caso de que los gatos presenten patologías que afecten al sistema inmunológico, está micoplasmosis puede cursar con cuadros anémicos intensos y puede darse el caso de que estos estén siendo desencadenados por otros factores, a diferencia, de gatos inmunosuprimidos infectados por Mhm. Los cuales cursan con cuadros anémicos intensos (Sykes, J. 2009). En caso de las infecciones producidas por Mtc no se ha llegado a establecer la verdadera patogenicidad, aunque parece considerablemente menos patógeno a comparación de Mhf en los gatos infectados de forma natural (Sykes, J .2010). 3.3. CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA Cuadro N° 1. Clasificación taxonómica Mycoplasma haemofelis Reino: Bacteria Filo: Tenericutes Clase: Mollicutes Orden: Mycoplasmatales Familia: Mycoplasmataceae Género: Mycoplasma Especie: Mycoplasma haemofelis. Fuente: Hidalgo, L y Méndez, J. 2013. 3.4. ETIOLOGÍA La Micoplasmosis hemotrópica felina es una enfermedad producida por la ricketsia Mycoplasma haemofelis, que anteriormente era denominada Haemobartonella felis, Anemia Infecciosa Felina o Eperythrozoon felis, que es como se le conoce en el continente europeo (Benard, G. 2009). Es una bacteria hemotrópica parásita, sin pared celular, pleomórfica e incultivable. La carencia de pared celular es en gran medida responsable de la tinción Gram negativa y la nula susceptibilidad frente a ciertos fármacos antibacterianos. Mide menos de 1 µm de diámetro. Hay pequeños gránulos y algunas estructuras filamentosas que se encuentran en el citoplasma. Estos hemoparásitos se adhieren, pero no penetran la superficie del eritrocito, causan una bacteriemia intra eritrocitaria de larga duración en los huéspedes que utiliza de reservorio (Villalva, G. 2018). Se encuentran en depresiones bajas y profundas sobre la superficie eritrocítica, con 15 a 25 µm de separación entre la bacteria hemotrópica parásita y la membrana. Delicadas fibrillas parecen extenderse desde el parásito para anclarlo a la célula huésped, los mismos se presentan como cocos, anillos y bastoncillos, observándose con mayor facilidad en frotis sanguíneos delgados o en los bordes biselados de frotis gruesos, están activos en la sangre 2-17 días después de la infección y puede permanecer activo durante 3-8 semanas (Lively, K. y Care, F. 2015). 3.5. FACTORES PREDISPONENTES Existen factores que pueden aumentar la susceptibilidad del gato doméstico frente a la enfermedad, como la presencia de ectoparásitos hematófagos, y cuadros de inmunosupresión como los provocados por enfermedades virales, por ejemplo, el Virus de Inmunodeficiencia Felina (FIV) o Leucemia viral Felina (FeLV). En cuanto a la edad, raza y sexo no se ha llegado a demostrar una susceptibilidad específica; pero en investigaciones recientes, se ha encontrado que los machos jóvenes tienen mayor probabilidad de contagio de la enfermedad. Algunos autores consideran que este hecho se debe a su comportamiento, ya que se pueden presentar peleas, y contagio de ectoparásitos durante el vagabundeo (Foster, D. 2012). 3.5.1 Del animal No hay diferencias en cuanto a razas, pero se piensa que los machos de las edades de 1 a 3 años lo presentan más que las hembras, debido al estilo de vida más agresivo y callejero. La infección con el virus de la Leucemia Felina (FeLV) e Inmunodeficiencia felina (FIV) son también factores predisponentes, seguramente puede ser debido a que el Mycoplasma haemofelis es inmune-supresor y permite la proliferación del organismo cosa que no sería posible en huéspedes sanos (Carlton, L et al. 2011). Sometimiento a situaciones de estrés y ello conlleva a que se desarrolle la enfermedad, así como drogas inmunosupresoras que desarrollan una clínica manifiesta de la enfermedad que en algunos casos puede conducir a la muerte (Schaer, M. 2009). 3.5.2 Del ambiente La alta prevalencia de pulgas y garrapatas aumenta la persistencia y diseminación de la enfermedad. Lugares de hacinamiento como refugios donde hay un número considerable de gatos. Otro factor a tomar en cuenta es la época del año, habiendo mayor incidencia en época de verano debido a que hay una proliferación de ciertos artrópodos (Veterinaris, R. 2011). 3.6. FACTORES DE RIESGO Los gatos que corren mayor riesgo son aquellos que deambulan en el exterior de los hogares, son los que poseen mayor riesgo para la infestación por pulgas, garrapatas, piojos y mosquitos (Hidalgo, L y Méndez, J. 2013). Los gatos que estadísticamente tienen más probabilidades son gatos machos menores de 1-3 años, que viven fuera y suelen participar en peleas y con un historial incompleto de vacunación y desparasitación externa (Veterinaris, R. 2011). 3.7. TRANSMISIÓN La transmisión de hemoplasmas a gatos domésticos sanos por medio de transfusiones sanguíneas, ha quedado demostrada ya que la sangre infectada que fue almacenada durante un tiempo considerable en el conservante CPDA-1 (Citrato, fosfato, dextrosa, adenina que permiten la supervivencia de los elementos de la sangre), utilizado en las bolsas de transfusión, infectando a gatos sanos (Palmero, M y Carballés, V, 2010). Las formas de contagio son varias: · Transmisión entre individuos: de forma experimental se han realizado inoculaciones de sangre completa infectada vía peritoneal, oral, subcutánea, intravenosa · Inoculación subcutánea por peleas: se creía poco probable, pero en la actualidad se considera una vía de contagio por la presencia de heridas, las cuales entran en contacto con la saliva y sangre contaminada. Estudios recientes han logrado aislar Mycoplasma haemofelis en heces y saliva de gatos (Santos, A. 2008 y Tasker, S. 2010) · Ectoparásitos: La pulga se considera como un potencial vector en la transmisión de la enfermedad. Estudios recientes indican que Ctenocephalides felis contagia la enfermedad de manera experimental (Spada et al, 2014) · Vertical: Las vías: transplacentaria, transmamaria y uterina se han planteado como posibles formas de contagio, pero aún no han sido comprobadas · Iatrogénica: En caso de las trasfusiones con sangre contaminada 3.8. PATOGENIA 3.8.1. Periodo de incubación Mediante estudios experimentales, se ha determinado que en promedio la aparición de síntomas varía entre 2 a 34 días siendo el pico de bacteriemia entre las 2 a 3 semanas post infección; lo que no está directamente relacionado con la presentación de síntomas (Foster, D. 2012 y Tasker, S. 2010). Se describen cinco fases en la infección por Mycoplasma: · Fase Preparasistémica. Se da luego de que el gato es expuesto al microorganismo, antes que este inicie su reproducción. La cual puede durar de dos a tres semanas y luego pueden iniciar los signos clínicos, también se pueden encontrar pacientes asintomáticos o que presenten signos hasta 6 semanas después (Foster, D. 2012 y Cushing, I. 2013) · Fase Parasistémica. - Abarca después de las tres semanas, si la forma de contagio de mycoplasma es por vía intravenosa, la aparición de síntomas y signos será en un lapso de veintidós a cincuenta y un días · Fase Aguda. - Caracterizada por cuadros piréxicos, anémicos, ocasionados por la capacidad del Mycoplasma sp para adherirse a la membrana eritrocitaria, afectando su integridad y por tanto reduciendo su vida media; además se presume la producción de anticuerpos antieritrocitarios o específicos a hemoplasmas, causando una reacción Ag-Ac- Complemento y produciendo hemolisis. Los eritrocitos infectados son retirados por los macrófagos de bazo, hígado, médula y pulmón (Mayors, lab. 2016), la gravedad de la anemia se relaciona con el estado inmunitario y esplénico, debido a que los eritrocitos secuestrados a este nivel pierden su biconcavidad, debilitando a su membrana (Tasker, S. 2010) · Fase de Recuperación. – El volumen glomerular vuelve a la normalidad, disminuyendo de forma significativa el número de bacterias, aumentando el hematocrito permaneciendo en el rango normal. Muchos de los felinos afectados se convierten en portadores, siendo visibles en pequeñas cantidades los microorganismos (Day et al., 2012) · Fase asintomática. – No presentan signos clínicos, se convierten en portadores crónicos lo cual puede durar 2 años o más, donde la replicación y la eliminación del Mycoplasma sp se encuentra en equilibrio. En algunos casos se puede dar la recidiva de la enfermedad debido a situaciones de estrés, enfermedades sistémicas, neoplasias, preñez y retrovirus (Cushing, I. 2013) · Fase de portador.- Puede durar hasta 2 años, son clínicamente normales, y la reaparición de la enfermedad es poco frecuente, ya que se eliminará el microorganismo por mecanismos inmunes, los cuales pueden quedar intactos en las vacuolas fagocíticas de macrófagos de bazo y pulmones, también puede darse la supervivencia de los microorganismos en células provocando estados crónicos indefinidos, y debido a esto los gatos portadores estarán en equilibrio pudiendo combatir la replicación de los microorganismos con la fagocitosis y eliminación de los mismos (Bernard, G. 2009) 3.9. SIGNOS CLÍNICOS Son tres categorías de presentaciones clínicas, pero no es posible catalogar a todos los gatos en una de estas. La variabilidad clínica depende de la patogenicidad del agente y la variación en la susceptibilidad del huésped y cantidad inoculada (Cushing, I. 2013). · Gatos cachorros y algunos adultos: presentan anemia hiperaguda, letargia, palidez e hipotermias repentinas. Antes de la presentación de estos síntomas por lo general se encuentran en estado normal · Algunos gatos cachorros y la mayoría de los adultos: cursan por cuadros febriles, anemia aguda, debilidad, palidez, soplos cardíacos, esplenomegalia, ictericia, dolor corporal difuso, disnea y taquipnea · Gatos adultos: pueden presentar cuadros de anemia leve con fiebre moderada, debilidad y baja de condición corporal (Tasker, S. 2004). Un mayor porcentaje de gatos con fiebre, están infectados con Mycoplasma haemofelis, que los gatos sin fiebre, sugiriendo que el organismo puede estar asociado con fiebre de origen desconocido (Palmero, M. 2010). La anemia es el signo característico de esta enfermedad, la misma es más grave cuando la infección ocurre con M. haemofelis. En la presentación aguda los signos más comunes son: anemia severa, con taquipnea, taquicardia, depresión, anorexia, mucosas pálidas, pérdida de peso, ictericia, disnea, fiebre y en ocasiones la muerte. Ha sido comunicada la esplenomegalia asociada a la destrucción extravascular de los eritrocitos y posiblemente hematopoyesis extramedular (Greene, C. 2012). Cuadro N° 2. Signos clínicos de Mycoplasma Haemofelis Agudo Crónico Letargia, Anemia, Hepatomegalia, Esplenomegalia Dolor corporal, Taquipnea, Disnea, Pirexia, Ictericia, fiebre, mucosas pálidas Pérdida de peso Anemia moderada Pirexia intermitente Fuente: Foster, D. 2012. 3.10. DIAGNÓSTICO Debido a que el microorganismo es incultivable fuera del hospedador, los métodos diagnósticos se ven reducidos. Los frotis de sangre periférica sometidos a distintas tinciones siguen siendo el de preferencia, sin embargo, los avances en técnicas moleculares han permitido tener pruebas como PCR, TEST que pueden implementarse en el diagnóstico, adicional a las pruebas de biometría y química sanguínea que complementan el diagnóstico. El diagnóstico definitivo requiere la demostración del microorganismo en los eritrocitos del paciente. Las muestras sanguíneas deberán tomarse antes de iniciar el tratamiento y es más efectivo tomarlas de las venas de la cara interna del pabellón auricular, pues en dichos vasos es más fácil hallarla. El tipo de anemia detectada en los pacientes con Haemobartonellosis primaria es regenerativa con poiquilocitocis, policromasia, anisocitosis, cuerpos de Howell Jolly y metarrubricitos. Por lo general el recuento de glóbulos blancos está aumentado y con neutrofilia en los casos agudos y con monocitosis en los crónicos (Schaer, M. 2009). En los gatos ViF y/o FeLV positivos la anemia es de tipo aregenerativa, especialmente en los estadios finales de ambas enfermedades (Cruz, A. 2005). Las pruebas bioquímicas no arrojan resultados significativos, a no ser porque en algunos casos pueden hallarse aumentadas la GOT, GPT y FAS así como también la bilirrubina sérica (Schaer, M. 2009). En la Mycoplasmosis haemofelis el número de eritrocitos puede descender por debajo de 2 millones por mm³ de sangre, en formas más crónicas el número de glóbulos rojos puede ser algo más elevado; por ejemplo: 3 millones a 4 millones. 3.10.1. Frotis sanguíneo Se debe tener en cuenta que la sensibilidad fluctúa de 0 al 37,5% y la especificidad entre el 84 al 98% en casos de Mhf, a diferencia de Mhm y Mtc, los cuales son difíciles de evidenciar mediante esta técnica (Sykes, J. 2009). Esta técnica provoca un menor grado de rotura celular, sobre todo en células frágiles, dando lugar a extensiones finas con células bien diseminadas (Cowel,l et al. 2014). 3.10.2. Hematología El detectar el grado de anemia puede dar información de si esta es regenerativa o no y de los cambios celulares que pueden estar presentes como anisocitosis, macrocitosis y reticulocitosis (Foster, D. 2012). Las micoplasmas se adhieren a la membrana del eritrocito con deformación e invaginación de la misma, esta unión a la membrana es necesaria para la replicación del microorganismo. Esta interacción eritrocito-microorganismo produce un daño irreversible en el glóbulo rojo, dando como resultado una hemólisis extravascular (Hoelzle, et al. 2014). 3.10.3. PCR (cadena de reacción de la polimerasa) La reacción de la cadena de polimerasa es una técnica molecular de sensibilidad y especificidad al momento de diagnosticar micoplasmosis, esta técnica se basa en la detección del gen 16S rRNA, una de las ventajas de esta prueba es la detección de la presencia de Mycoplasma Haemofelis en el gato ya sea que se encuentra en fase aguda o de portador, adicionalmente, es de utilidad para saber si en caso de una transfusión sanguínea el donante es portado (Raimundo et al, 2016). 3.11. TÉCNICAS DE TINCIÓN Se pueden utilizar distintas técnicas como: Diff Quick, T15, naranja de acridina, Wright, Wright-gienmsa. 3.11.1. Tinción Diff quick La tinción de mayor empleo en Veterinaria es, sin lugar a dudas, el colorante Diff Quick, que es una modificación rápida del colorante tipo Romanovsky. Sus grandes ventajas son que, en la preparación del frotis, solamente se requiere de fijación al aire, la coloración se efectúa en máximo de 45 segundos (Torres, M. 2017). Los reactivos de Diff Quick se encuentran comercializados lo que facilita su empleo. Consta de tres soluciones: Fijador, colorante I y colorante II. a) Reactivo fijador de Diff-Quick · Tinte Triarilmetano Metanol b) Diff-Quick solución I · Colorante de xanteno · Tampón de pH · La azidasódica c) Diff-Quick solución II · Tiazina · Tampón de pH (García, et al. 2006) 3.12. KIT DE DETECCIÓN MOLECULAR MYCOPLASMA FELINO PCRun es un kit de detección molecular de punto de atención para la detección de enfermedades infecciosas en pequeños animales. Técnica que permite la detección cualitativa de Mycoplasma Haemofelis a partir de ADN extraído de sangre entera. PCRun es un ensayo molecular basado en la amplificación isotérmica de parte del gen 16S RNA (Biogal, 2016). 3.13. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL Se debe diferenciar de otras hemoparasitosis bacterianas, como patologías inmune mediadas por anemia hemolítica, drogas, toxicosis vegetal, infecciones, defectos metabólicos intrínsecos de los eritrocitos, fragmentación, hiperesplenismo, hipoplasia eritroide o aplasia, además de FeLV y FIV (Schaer, M 2009). Es importante distinguir entre la anemia grave que acompaña a la neoplasia de los tejidos hematopoyéticos y la infección por Haemobartonella felis (Cruz, A., 2005). Se debe diferenciar de anemia hemolítica asociada al virus de la leucemia felina, virus de la inmunodeficiencia felina y PIF, hipofosfatemia severa, anemia hemolítica inmunomediada primaria, defectos hereditarios de los eritrocitos (deficiencia de la enzima piruvato quinasa), reacción por transfusión, isoeritrolisis neonatal, anemia por toxinas oxidativas (cebolla, ajo, acetaminofén, propofol, paracetamol, zinc y faces de cetoacidosis, diabética, hipertiroidismo y linfoma) y de la anemia hemolítica microangiopática (Palmero M. 2010). 3.14. TRATAMIENTO Existen varias medidas terapéuticas las cuales se elegirán dependiendo de estado del paciente. 3.14.1. Antibioticoterapia Para el tratamiento de micoplasmosis es habitual el uso de antibióticos como tetraciclinas, cloranfenicol, enrofloxacina, doxiciclina, terapia inmuno- supresora y en casos muy severos, la transfusión sanguínea es sugerida como componentes en el tratamiento de la enfermedad (Foster, D. 2012). Las tetraciclinas y fluoroquinolonas ayudan en la disminución de la bacteremia, pero la capacidad de eliminar la infección no se ha demostrado, lo que sí está comprobado es que con su uso mejoran los signos clínicos y las alteraciones hematologías asociadas a la enfermedad (Tasker, S. 2010). La doxiciclina presenta el mayor grado de liposolubilidad entrando de manera directa como forma activa a través de la membrana lipídica de los agentes infecciosos en este caso el Mycoplasma, se maneja una dosis de 10mg/kg/día oral cada 12- 24 horas durante cuatro semanas, en casos de presentarse cuadros eméticos se sugiere disminuir la dosis a la mitad en dos tomas al día. Se recomienda administrar el medicamento junto con alimento o agua para disminuir efectos adversos como la esofagitis con estenosis esofágica secundaria (Molina, V. Pacheco, C. 2016). La enrofloxacina a dosis de 5mg/kg VO cada 24 horas, demostrada eficacia en gatos, pero las altas y largas dosis puede causar ceguera en los gatos que se recuperan y pueden convertirse en portadores latentes. Los gatos que se recuperan de la infección pueden quedar como portadores crónicos, desde meses hasta años, a pesar del tratamiento. Esto se puede deber a que el hemoplasma es capaz de esquivar el sistema inmune y existiría un equilibrio entre la fagocitosis y la carga bacteriana en la infección crónica. No suele producir signos clínicos, pero la reactivación de la infección puede darse por el estado de estrés tras enfermedades sistémicas, neoplasias, preñez y retrovirus (Rojas, A. 2020). El uso de marbofloxacina a 2/mg/kg/ día ha dado buenos resultados en la reducción de Mhf y Mhm, hasta el momento no se ha descrito efectos desfavorables con este tratamiento (Harvey, J. 2006). El uso de imidocarb se puede considerar en casos crónicos y donde los resultados tanto con tetraciclinas y fluoroquinolonas no han sido favorables y se usa a dosis de 5mg/kg por vía subcutánea cada dos semanas por dos a cuadro aplicaciones (Universidad de Chile, 2010). 3.14.2. Inmunosupresión La corticoterapia ha estado en discusión en los últimos años ya que hay estudios que demuestran que la eliminación del Mhf se ha visto disminuida durante su uso, se sugiere que solo sean usadas en casos excepcionales donde este presenta la hemolisis inmunomediada (Foster, D. 2012). 3.14.3. Terapias de soporte Fluido terapia. - Al encontrar cuadros de deshidratación monitorear de manera constante los valores hematológicos hasta que se complete la terapia (Tasker, S. 2004). Alimentación enteral. - en casos de inapetencia prolongada se recomienda el uso de sondas nasogástricas y tubos enterales (Tasker, S. 2004). Hemoterapia. - Las transfusiones se recomiendan en grados severos de anemia con signos clínicos asociados. Previo al procedimiento se debe realizar la prueba de compatibilidad sanguínea y el test de PCR al donante para estar seguros de que no esté infectado y este en fase de portador (Tasker, S. 2004). 3.15. PRONÓSTICO En general se considera un pronóstico regular favorable el 65 % infectados se recuperan sin tratamiento y 75% tratados sobreviven (Tasker, 2004). 3.16. CONTROL Y PROFILAXIS Como medida de prevención, se recomienda la eliminación de artrópodos hematófagos (Greene, C. 2008). Los productos que repelen y matan a las garrapatas y las pulgas, como los que contienen piretrina, spinosad o componentes similares, son excelentes opciones (González, E. 2014). Es probable que la transmisión iatrogénica pueda prevenirse, en gatos y perros, mediante la realización de PCR a los donantes de sangre (Greene, C. 2008). Actualmente no existe una vacuna disponible contra la micoplasmosis (González, E. 2014). 3.17. SALUD PÚBLICA La Haemobartonellosis felina o Mycoplasma Haemofelis tiene especificidad de especie; es decir que no es una enfermedad zoonótica por lo que no representa ningún riesgo para la salud humana (Hidalgo, L y Méndez, J. 2013). 7 CÁPITULO IV. MATERIALES Y METODOS 4.1. MATERIALES 4.1.1. Ubicación de la investigación El trabajo de investigación se lo ejecutó en la clínica veterinaria “Puppy Planet”. 4.1.2. Localización de la investigación País Ecuador Provincia Tungurahua Cantón Ambato Parroquia Huachi Chico Sector Miñarica II EL La investigación tuvo una duración de 90 días 4.1.3. Situación geográfica y climática Cuadro N° 3. Condiciones meteorológicas y climáticas COORDENADAS DMS Latitud 1°14’30” S Longitud 78°37’11” W COORDENADAS GPS Latitud -1.26667 Longitud -78.6333 CONDICIONES METEOROLÓGICAS Altitud 2460 m.s.n.m. Humedad relativa promedio anual 70 % Precipitación promedio anual 980 mm/año Temperatura máxima 30 ºC Temperatura media 15 ºC Temperatura mínima 5 ºC Fuente: Meoweather. 2020 4.1.4. Zona de vida De acuerdo al sistema de clasificación de zonas de vida por Leslie Ransselaer Holdridge. El sitio experimental correspondió a la formación de Montano bajo (m.b) 4.1.5. Materiales y equipos 4.1.5.1. Material experimental · 30 gatos domésticos 4.1.5.2. Material de campo · Plano de la parroquia Huachi chico · Kit test prueba rápida mycoplasma haemofelis · Jeringas de 3ml · Agujas hipodérmicas 23 G · Torundas de algodón · Alcohol · Termómetro · Fonendoscopio · Cooler · Recolector de cortopunzantes · Portaobjetos · Bolsa para gatos · Vacutainer minicollet con EDTA · Guantes desechables · Rasuradora · Tijeras · Torniquete · Gel refrigerante · Microscopio · Vaso de coplin · Mandil · Mascarilla · Medicina Veterinaria (Clorhidrato de ketamina y Maleato de acepromacina) 4.1.5.3. Instalación · Clínica veterinaria 4.1.5.4. Material de oficina · Cuaderno · Papel bond 4-A · Calculadora · Resaltadores · Hoja de registros · Internet (computadora, impresora, copiadora, pendrive) · Libros, manuales y textos de referencia · Cámara fotográfica 4.2. MÉTODOS 4.2.1. Método de campo Para determinar la prevalencia de Mycoplasma haemofelis, procedentes de Huachi chico, a partir de los cuales se calculó el tamaño de la muestra en 30 gatos domésticos, que determino la muestra total de la población, se estableció el estado general del paciente, la cual se consideró como unidad de muestreo Cada uno de los animales se reseñó un formato adaptado para la investigación; se registró toda la información general relativa obtenida de la observación individual de cada paciente, donde se asignó un número de identificación, se registró el domicilio, datos correspondientes de las variables trazadas del animal, como edad, sexo, raza, peso, condición corporal, color del pelaje, toma y recolección de muestras de sangre para frotis seriado, hemograma y kit de prueba rápida 4.2.2. Factor en estudio 30 muestras sanguíneas 4.2.3. Análisis estadístico y funcional Para esta investigación se utilizó el modelo estadístico cualitativo descriptivo, que permitió analizar casos particulares a partir de los cuales se extrae conclusiones generales, lo cual es factible ya que permitió trabajar con muestras pequeñas; y que es un conjunto de principios, reglas y procedimientos que orientan la investigación con la finalidad de alcanzar un conocimiento objetivo de la realidad Los resultados experimentales obtenidos fueron sometidos a los siguientes análisis estadísticos, a través del programa informático Excel y Statgrafics · Medias µ · Frecuencia Fi – Fa · Gráficos 4.2.4. Medición experimental Los variables, como factores de riesgo para contraer esta enfermedad fueron: · Prevalencia · Edad · Sexo · Raza · Peso · Condición corporal · Color del pelaje · Análisis sanguíneo 4.2.5. Métodos evaluados y datos tomados · Prevalencia (PV): Indicador estático cualitativo que consideró la respuesta del viable, mediante el hemograma y frotis serológico, se lo midió como: · Positivo · Negativo · Edad (E): Variable cuantitativa expresada en años de vida del animal, tomando como referencia los diagnósticos positivos dividido en cuatro grupos etarios: · De 6 meses a 1 año · De 1 años a 2 años · De 2 años a 3 años · ˃ 3 años · Sexo (S): Dato que consideró el género de los animales diagnosticados positivos expresado en: · Machos · Hembras · Raza (R): Variable que estipulo el pedigrí o el mestizaje de los gatos domésticos diagnosticados positivos: · Mestizos · Otros · Peso (P): Datos expresado en kilogramos de acuerdo con los siguientes rangos: · 1 kg · 2kg · 3 kg · ˃ 3 kg · Condición corporal (C/C): Variable que se evaluó según la siguiente escala: · 2/9 Delgado · 5/9 Normal · 9/9 Obeso · Color del pelaje (CP): variable que se evaluó de acuerdo con el color del pelaje: · Oscura · Clara · Análisis de sangre (AS): Indicador cualitativo que consideró la respuesta del viable, mediante la muestra sanguínea, se lo midió como: · Positivo · Negativo 4.2.6. Procedimiento experimental 4.2.6.1. Frotis sanguíneo Esta técnica se la realizó con dos portaobjetos de 75 x 25 mm. En un extremo del portaobjetos se colocó una gota de sangre anticoagulada con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) de alrededor de 3 mm de diámetro. En la preparación del frotis, se extendió la gota de sangre en un ángulo de 30 a 45 grados sobre el portaobjetos, hasta que la sangre se esparce por toda la superficie de contacto entre los portaobjetos, con un movimiento deslizante suave y continuo Para la recolección de muestras se procedió el siguiente protocolo: · Rotulación del portaobjetos · Localización vena auricular; punción para la muestra con una lanceta · Se realizaron dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar la mejor · Secado del frotis al aire lo más rápidamente posible. La rápida desecación evitó la deformación de los glóbulos sanguíneos y la crenación (arrugamiento) · Se empezó la observación con el lente de menor aumento hasta llegar al lente de 100x, el condensador arriba y el diafragma completamente abierto, se observaron las placas obtenidas de las muestras de sangre de gatos domésticos que habitan en la parroquia Huachi Chico, para detectar si existe o no la presencia de la enfermedad 4.2.6.2. Hemograma Se realizó la extracción de 1.5ml de sangre, con una jeringa de 3cc con aguja #23 de la vena cefálica. Se colocó 1cm de sangre en los vacutainer minicollet con EDTA. Obtenida una vez la muestra se realizó el recuento de eritrocitos, concentraciones de hemoglobina, hematocrito, volumen corpuscular medio (VCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM), volumen globular aglomerado (VGA) Para la recolección de muestras se puso en práctica el siguiente protocolo: · Rotulación vacutainer minicollet con EDTA · Localización de la vena cefálica y extracción muestra · Colocación de 1cm de sangre en los vacutainer minicollet con EDTA · Ubicación de gatos domésticos muestreados en observación Se empezó el procesamiento de la muestra, obtenida de los pacientes gatos domésticos que habitan en la parroquia Huachi Chico, para detectar si existió o no la presencia de la enfermedad 4.2.6.3. Kit PCR Se realizó la extracción de 1.5ml de sangre, con una jeringa de 3cc con aguja #23 de la vena cefálica. Se colocó 1cm de sangre en los vacutainer minicollet con EDTA · Protocolo de PCRun ® Rapid DNA Extraction Kit · Limpiar y desinfectar el área de trabajo · Componentes (PCRun tubo tapa roja con buffer para extracción de ADN y Tubo tapa verde con diluyente de buffer para extracción de ADN). · Capilares de 50 ul · Tapas de cierre · Encender la incubadora y programarla a una temperatura de 95 °C · Colocar 50 ul de sangre en el tubo de tapa roja · Incubar durante 5 minutos a 95°C · Retirar el seguro inferior del tubo tapa roja y colocarlo en el tubo tapa verde con el diluyente del buffer · Centrifugar a 1500 rpm durante 1 minuto · Retirar el tubo con el buffer y colocar la tapa verde en el tubo con el diluyente y el DNA extraído · PCRunTM Feline Mycoplasma Molecular Detection Kit Protocolo de utilización: · Muestra de ADN extraída · Bolsa con tubos de reacción · Tubos capilares para dispensar 20 μl de volumen · Encender la incubadora y programar a 60°C · Retirar la tira PCRun ™ de su bolsa protectora · Cortar y separar los tubos necesarios, los sobrantes guardar en la bolsa de aluminio y sellar con cinta adhesiva para evitar ingreso de humedad · Colocar los tubos en una superficie y observe que el pequeño pellet blanco se encuentra en la parte inferior del tubo · Etiquetar la tapa de los tubos para la identificación de la muestra · Abrir la tapa de los tubos de reacción de forma individual y coloque con un capilar 20 μl de ADN se extrajo con PCRun ™ Sample Prep Kit, permitir que el gránulo se disuelva completamente · Colocar el tubo de reacción en la incubadora (60 °C) e incubar durante exactamente 1 hora · Al final del período de incubación (1 h), retirar el tubo de la incubadora y analice inmediatamente en el kit PCRun · Dispositivo de detección de ácido nucleico desechable para cada prueba · Abrir y retirar los componentes del dispositivo de detección. · Verificar la presencia de fluido en la bombilla · Alinear la sección de la tapa del tubo de reacción PCRun ™ con el bulbo de amortiguación · Aplicar una ligera presión en el tubo de reacción al cartucho Amplicon. · Doble el cartucho Amplicon en dos para cerrar · Presionar la palanca hacia abajo para bloquear el dispositivo · Esperar 15-30 minutos para leer los resultados Lectura e interpretación de los resultados · Prueba válida presenta una banda de control rojo · La línea de control aparece independientemente de un resultado positivo o negativo · Resultado positivo: presenta dos bandas, la línea de control superior y la línea de prueba inferior, indica la presencia de Mycoplasma haemofelis · Resultado negativo: aparece solo la línea de control, indica la ausencia de Mycoplasma haemofelis (Biogal, 2016) 4.2.7. Manejo del experimento 4.2.7.1. Anamnesis Se realizó una serie de preguntas al dueño, en las cuales tomamos como prioridad el sexo, raza y edad que tuvieron los pacientes, se indagó sobre el lugar de habitad de los gatos domésticos, si viven dentro o fuera de la casa, si cumplieron o no el protocolo de desparasitación, si presentaron vacunas, si consumen o consumieron drogas inmunosupresoras, si presentaron algún tipo de intervención quirúrgica 4.2.7.2. Chequeo clínico Se revisó de manera exhaustiva a la mascota, desde la cabeza hasta la cola. Se examinó el interior de las orejas, los dientes, las patas; con un estetoscopio se escuchó los latidos del corazón y se verificó la frecuencia respiratoria Se midió y pesó al animal, se palpó los ganglios alrededor del cuello, los músculos y el abdomen en busca de bultos, signos de dolor o inflamación Se tomó temperatura rectal del animal, para luego verificar la capacidad de atención de la mascota, y se observó cómo camina y se sienta Por último, se chequeó el certificado de vacunación esté completa. En el caso de encontrar signos y síntomas de alguna patología durante el chequeo médico, se indicó análisis sanguíneos y de orina específicos 4.2.7.3. Tomas de muestras Se extrajo 3ml de sangre de la vena cefálica con una jeringa de 3cc con aguja #23, la muestra fue representativa y adecuada para realizar el análisis. Las muestras fueron identificadas, la extracción fue de manera aséptica. Se utilizaron medios de transporte y todas las medidas de bioseguridad para evitar la deshidratación de la muestra y lograr una adecuada conservación. Los envases y contenedores utilizados para el envío de muestras fueron irrompibles, herméticos y de dimensiones adecuadas, el transporte de la muestra tuvo un tiempo aproximado de una hora hasta llegar a ser sometida al análisis correspondiente 4.2.7.4. Identificación de las muestras Toda muestra fue etiquetada de la siguiente forma: · Nombre y edad del paciente · Número de historia clínica · Tipo de muestra y sitio anatómico · Fecha y hora de recolección · Iniciales de la persona que obtiene la muestra 4.2.8. Diagnostico relativo De cada ficha se extrajo información relativa a la identificación del animal, prevalencia, edad, sexo, raza, condición corporal y peso. De las cuales se analizó la información para finalmente plantear las conclusiones y recomendaciones dirigidas a mejorar la situación de los gatos domésticos en estudio 4.2.9. Envió de muestras El envío al laboratorio se realizó en el menor tiempo posible, como tiempo máximo 30 minutos, de forma apropiada y con las medidas de bioseguridad, para evitar el deterioro o alteración de la muestra, como medio ideal de conservación, se utilizó la refrigeración, gel refrigerante en fundas herméticas, el cooler fue de espuma flex (icopor) por su bajo peso y fácil manipulación, las muestras se enviaron en recipientes individuales y bien identificadas, la información básica de las muestras estuvo debidamente protegida, dentro de un sobre y en funda plástica. La tapa se cerró de tal manera que todas las esquinas queden selladas con cinta 4.2.10. Recepción de resultados Una vez obtenidos los resultados se procedió a verificar de manera gráfica los resultados positivos y negativos del examen serológico y del hemograma 4.2.11. Tabulación de datos Se procedió a analizar e interpretar la información mediante el modelo estadístico analítico descriptivo, elaborando cuadros de frecuencia y porcentajes, y finalmente demostrar gráficamente los resultados según los objetivos u otros resultados hallados para interpretarlos, describir y poder así comprobar la hipótesis utilizando el programa estadístico Statgrafics permitiéndonos llegar a las conclusiones y recomendaciones de la investigación CÁPITULO V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 5.1. PREVALENCIA (PV) Cuadro N° 4. Variable prevalencia PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa PREVALENCIA APARENTE POSITIVOS 6 20% N° 0.06 20% NEGATIVO 24 80% TOTAL 30 100%  50% PREVALENCIA Gráfico N° 1. Variable prevalencia Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN La prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos de la parroquia Huachi Chico determinó el 20% en 30 muestras sanguíneas, reflejando una media del 50%; en relación con estos datos la prevalencia aparente fue del 20% Merino, V. 2011. Al establecer la detección de Mycoplasma haemofelis y “Candidatus Mycoplasma haemominutum” a través de PCR en gatos de la comuna de Chillán, en cuanto a la prevalencia indica que en 30 muestras el 3.6% fue positivo a Mycoplasma haemofelis En comparación al resultado obtenido por Merino, V. determinó un porcentaje de prevalencia inferior, se concluye que varios son los coeficientes que intervinieron como la infestación de ectoparásitos hematófagos, en particular del Ctenocephallides felis, considerando que es uno de los vectores que hace posible la transmisión del patógeno 5.2. EDAD (E) Cuadro N° 5. Variable edad PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE 2-3 AÑOS 6 100% N° 0.06 6% TOTAL 6 100%  100% EDAD Gráfico N° 2. Variable edad Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN La edad en la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos en la parroquia Huachi chico, estableció que 2 a 3 años fue el 100%, expresando una media de 100%, en proporción con estos datos la prevalencia aparente fue del 6% Ávila, M. 2020. Al establecer la presencia de Mycoplasma spp. en gatos atendidos en dos clínicas veterinarias del sur de la ciudad de Guayaquil, de acuerdo a la edad fluctuaron animales jóvenes de 1 a 3 años 66,67% en 4 gatos En reciprocidad al resultado obtenido por Ávila, M. determina un porcentaje de edad superior, se concluye que varios son los factores que intervinieron como conducta relacionada con la agresividad, conducta sexual, participación de peleas, escapismo y el marcaje 5.3. SEXO (S) Cuadro N° 6. Variable sexo PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE MACHO 2 33% N° 0.33 33% HEMBRA 4 67% N° TOTAL 6 100%  50% SEXO Gráfico N° 3. Variable sexo Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN El sexo en la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos en la parroquia Huachi chico, instauró que en hembras fue el 67%, expresando una media del 50%; en simetría con estos datos la prevalencia aparente fue del 33% Martínez, A. 2012. Al establecer la prevalencia de Micoplasmosis felina en la ciudad de Machala, en cuanto al sexo, determinó 7 hembras que representaron el 8.53% y 5 macho el 7.14% en 152 animales En compensación al resultado obtenido por Martínez, A. estipulo que el porcentaje del sexo es inferior se deriva que varios son los elementos que influyeron como la conducta sexual, gestación, lactancia y el entorno 5.4. RAZA (R) Cuadro N° 7. Variable raza PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE ROMANO 1 17% N° 0.17 17% RAGDOLL 1 17% N° MESTIZO 4 66% N° TOTAL 6 100%  33.3% RAZA Gráfico N° 4. Variable raza Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN La raza en la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos en la parroquia Huachi chico, prescribió que el 66%, fueron mestizo, expresando una media del 33.3%; en proporción con estos datos la prevalencia aparente fue del 17% Onofre, M. 2018. Al determinar la prevalencia de Micoplasmosis en gatos atendidos en la casa comunal Ana María de Olmedo del cantón Durán; de acuerdo a la raza de los animales presento una incidencia del 0% Se podría deducir que el resultado obtenido por Onofre, M. estipulo un porcentaje inferior; 0% casos positivos en razas; se deriva que varios son las componentes intrínsecas predisponentes que presentan una disposición genética y el género 5.5. PESO (P) Cuadro N° 8. Variable Peso PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE ˃ 3 kg 1 17% N° 0.17 17% 3 kg 2 33% N° 2 kg 3 50% N° TOTAL 6 100%  33,3% PESO Gráfico N° 5. Variable peso Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN El peso en la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos en la parroquia Huachi chico, determinó que el 50% presento pesos relativos de 2Kg, expresando una media del 33.3%; en equivalencia con estos datos la prevalencia aparente fue del 17% Carvajal, D. 2012. Frecuencia de infecciones rickettsiales y hemoparasitarias en gatos domésticos (felis catus schereber 1775) de los Centros de Zoonosis, en las Ciudades de Bogotá y Cali; menciona que de acuerdo con el peso de los animales fue un 69% en animales que alcanzaron los 2kg En relación con el resultado obtenido por Carvajal, D. determinó un porcentaje superior en peso, se deduce que varios son los factores que influyen como edad, condición corporal, anemia y la repentina pérdida de peso que son síntomas clínicos de la patología 5.6. CONDICIÓN CORPORAL (C/C) Cuadro N° 9. Variable condición corporal PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE 9/9 OBESO 1 17% N° 0.17 17% 5/9 NORMAL 2 33% N° 0.33 2/9 DELGADO 3 50% N° 0.5 TOTAL 6 100%  33.3% CONDICIÓN CORPORAL Gráfico N° 6. Variable condición corporal Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN La condición corporal de los gatos domésticos en la ciudad de Ambato, parroquia Huachi chico, determinó que el 50% obtuvo una C/c delgada de 2/9, expresando una media del 33.33%; en proporción con estos datos la prevalencia aparente fue del 17% Romero, G. 2018. De acuerdo con la prevalencia de Haemobartonella felis en la población felina que habita en la Universidad Católica de Santiago de Guayaquil; menciona que el 10% obtuvo una C/c ideal en 1 animal Con relación al resultado obtenido por Romero, G, determinó un porcentaje inferior, se deriva que la condición corporal es una medida más relacionada con el estado de salud y se asocia con la entidad clínica de la enfermedad, nutrición y estrés 5.7 COLOR DE PELAJE (CP) Cuadro N° 10. Variable color de pelaje PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE OBSCURO 2 33% N° 0.33 33% CLARO 4 67% N° 0.67 TOTAL 6 100%  50% COLOR DE PELAJE Gráfico N° 7. Variable color de pelaje Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN El color del pelaje de los gatos domésticos en la ciudad de Ambato, parroquia Huachi chico, estableció que el 67% obtuvo un color de pelaje claro, enunciando una media del 50%; en proporción con estos datos la prevalencia aparente fue del 33% Carvajal, D. 2012. Frecuencia de infecciones rickettsiales y hemoparasitarias en gatos domésticos (felis catus schereber 1775) de los Centros de Zoonosis, en las Ciudades de Bogotá y Cali; menciona que el 48% fue en gatos con un color de pelaje claro En relación con el resultado obtenido por Carvajal, D, determinó una proporción superior, ya que el color de pelaje es descriptivo, y que no se correlaciona el hemoparasitismo con el fenotipo de los animales 5.8. ANÁLISIS DE SANGRE (AS) Cuadro N° 11. Variable análisis de sangre PORCENTAJE DE FRECUENCIA ITEM´S Fi Fa FRECUENCIA APARENTE HEMOGRAMA 6 100% N° 0.06 6% FROTIS SERIADO 6 100% 0.06 6% Kits de PCRunTM 6 100% 0.06 6% TOTAL 18 100%  33.3% ANÁLISIS DE SANGRE Gráfico N° 8. Variable análisis de sangre Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN El análisis de sangre (hemograma, frotis sanguíneo y Kit de PCRunTM) de los gatos domésticos en la ciudad de Ambato, parroquia Huachi chico, estableció que el 100% presentaron alteraciones hematológicas, enunciando una media del 33.3%; en simetría con estos datos la prevalencia aparente fue del 6% Tapia, D. 2018. Al determinar la presencia de Mycoplasma haemofelis en refugios felinos de la ciudad de Quito y sus Valles; menciono que el 10,7% que presentaron alteraciones hematológicas, frotis 0% y kit de PCRunTM 29% en la provincia de Pichincha en 65 gatos En comparación al resultado obtenido por Tapia, D. determinó que el hemograma presenta una sensibilidad y especificidad del 50 – 75%, el frotis sanguíneo presenta una especificidad del 0 – 35 %, y un porcentaje de especificidad y sensibilidad superior del 99% fue el uso del kit, el cual comprueba que es el método más eficiente para determinar la presencia del hemoparasito. 5.9. ANÁLISIS HEMOGRAMA (AH) Cuadro N° 12. Variable análisis hemograma N° GATOS Nombre Htc Hb Eritrocitos VCM MCH CGMH Reticulocitos 1 Pepe 21 6,7 4,97 42,2 13,4 32,8 1,3 2 Leo 39,6 11,3 7,11 55,7 15,9 28,5 0,5 3 Misha 30 9,9 6,21 48,3 15,4 33 1 4 Reina 10 3,2 3,02 33,1 10,5 32 3 5 Luna 21 6,7 4,97 42,2 13,4 32,8 1,3 6 Osiris 40,8 13,7 7,16 56,9 19,1 33,5 1 Valores Referenciales 27-45 8-14 5-10 millones 39-55 12,5-17,5 30-36 Hasta 1,0 Unidades % g/Dl mm3 fL Pg g/dL % Gráfico N° 9. Variable análisis hemograma hematrocrito Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 10. Variable análisis hemograma hemoglobina Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 11. Variable análisis hemograma eritrocitos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 12. Variable análisis hemograma volumen corpuscular medio Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 13. Variable análisis hemograma hemoglobina corpuscular media Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 14. Variable análisis hemograma concentración de hemoglobina corpuscular media Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 15. Variable análisis hemograma reticulocitos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN Se observó la presencia de resultados por debajo del valor referencial para gatos en distintos analitos en estudio, determinando que, de los seis pacientes, uno presenta un caso de anemia severa, en tres casos se encuentran con una anemia leve y en dos casos se presentaron sin anemia, pudiendo deberse a las diferentes raza, edades ya que el estudio no estaba dirigido a uno de estos parámetros en específico, asi mismo se pudo determinar que en la mayoría de los casos la anemia presentada en los casos fue de tipo regenerativa, lo que indica que los pacientes tendrán un pronostico favorable. Tapia, D. 2018. Al determinar la presencia de Mycoplasma haemofelis en refugios felinos de la ciudad de Quito y sus Valles; menciono que generalmente un hematocrito por debajo del valor referencial, a menudo indica: Un suministro insuficiente de glóbulos rojos sanos (anemia), también menciona que la MCH indica el contenido medio de hemoglobina de un eritrocito y expresa el peso promedio de la hemoglobina en los hematíes, además que nos indica el tipo de anemia, así como si es regenerativa o no regenerativa y la presencia de reticulocitos dan una estimación del grado de regeneración de una anemia. En comparación al resultado obtenido por Tapia, D. determinó que el hemograma presenta es especifico ya que nos ayuda con los indicadores hematológicos para determinar el tipo de anemia que presentan los pacientes y determinar si existe un pronóstico favorable o no ya que nos indica si la anemia es regenerativa o no. 5.10. ANÁLISIS LEUCOGRAMA (AL) Cuadro N° 13. Variable análisis leucograma N° GATOS Nombre WBC Neu N. Banda Linfocitos Monocitos Eosinofilos Basófilos 1 Pepe 10,45 15 0 80 5 0 0 2 Leo 5,6 18 0 75 6 1 0 3 Misha 1,75 58 0 38 3 1 0 4 Reina 20,45 87 0 11 2 0 0 5 Luna 10,45 15 0 80 5 0 0 6 Osiris 5,45 24 0 74 2 0 0 Valores Referenciales 5,500-19,500 35,0-75,0 0-3,0 20,0-55,0 0,0-4 0,0-12,0 raros Unidades mm3 % % % % % % Gráfico N° 16. Variable análisis leucograma leucocitos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 17. Variable análisis leucograma neutrófilos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 18. Variable análisis leucograma linfocitos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 19. Variable análisis leucograma neutrófilos en banda Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 20. Variable análisis leucograma monocitos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 21. Variable análisis leucograma eosinófilos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova Gráfico N° 22. Variable análisis leucograma basófilos Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova ANALISIS E INTERPRETACIÓN Se observó la presencia de resultados por debajo del valor referencial para gatos en distintos analitos en estudio, determinando que, en relación con el leucograma se puede determinar que solamente en un paciente se presentó una leucocitosis muy marcada, así mismo se puede indicar que en uno de los casos existe una linfopenia que posiblemente sea por estrés, también se puede indicar que un paciente presento una ligera leucocitosis por neutrófilia. En comparación al resultado obtenido, se determinó que el leucograma es un indicador hematológico que nos permite ver el nivel de respuesta positiva o negativa tras la enfermedad, pero no hay estudios que lo validen ya que se basan más en el estudio de la línea roja, que en el de la línea blanca. VI. COMPROBACIÓN DE HIPOTESIS De acuerdo con los resultados estadísticos obtenidos en esta investigación; se comprobó la hipótesis alternativa, la prevalencia de Mycoplasma haemofelis en gatos domésticos de la parroquia Huachi Chico de la ciudad de Ambato, provincia de Tungurahua; preexiste casos confirmados mediante frotis seriado, hemograma y kit de prueba rápida, que influenció estadísticamente sobre las variables evaluadas a través del tiempo de la investigación VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 7.1. CONCLUSIONES De acuerdo con los resultados y análisis estadísticos, se sintetizan las siguientes conclusiones: · El Mycoplasma haemofelis considerada como una patología infecciosa importante de riesgo zoonótico en donde la mayor parte de los gatos están expuestos a la infestación · La prevalencia del Mycoplasma haemofelis fue; 20% positivo en 30 muestras sanguíneas · En cuanto a la edad, los animales más susceptibles determino 2-3 años 100% · Con relación al sexo las hembras representan el 67% y machos 33% de los casos clínicos · En concordancia la raza se estipulo el 66% mestizos y 17% romano y ragdoll · Se estableció que el peso de los gatos positivos fue de 2 kg el 50%, 3 kg el 33% y ˃ 3 kg el 17% · La presentación de la patología en cuanto a la condición corporal determinó en gatos delgado 2/9 en el 50%, normal 5/9 el 33% y obeso 9/9 el 17% · En cuanto al color del pelaje, estableció el color claro en un 67%, y obscuro el 33% · Los resultados logrados revelan que es posible implementar el análisis de sangre para detectar la presencia de Mycoplasma haemofelis (hemograma, frotis seriado y kits de PCRunTM) que es muy útil, preciso y altamente sensible el cual instauro el 100% positivo en 6 gatos · Los resultados de esta investigación nos permiten deducir que la prevalencia de Mycoplasma haemofelis, en gatos domésticos en la ciudad de Ambato, parroquia Huachi chico; afecta a gatos sin distinción de sexo, edad, o raza, y como no presenta signos patognomónicos su diagnóstico resulta ser complejo, lo que indica que la principal fuente de transmisión es la Ctenocephallides feliz 7.2. RECOMENDACIONES. Como resultado de esta investigación, se sugieren las siguientes recomendaciones: · Llevar un correcto plan sanitario mediante el control de vectores hematófagos, especialmente del Ctenocephallides feliz, inmunización y desparasitación interna y externa · Esterilizar a los gatos en edad temprana, que beneficiará que se reduzca las conductas de agresividad, celo, escapismo y el marcaje, evitando el riesgo de infección al contacto con animales de riesgo · Efectuar análisis hematológicos de rutina para detectar la presencia de Mycoplasma haemofelis (frotis seriado, hemograma y kit de prueba rápida) · Es importante la visita al Médico Veterinario para un chequeo de rutina y estar atentos a cualquier cambio de conducta o irregularidades en la morfología o fisiología del organismo del animal · Realizar charlas de concientización a las personas sobre una tendencia responsable de mascotas y de las patologías que pueden cursar los gatos domésticos, el riesgo zoonótico que estas pueden presentar y los beneficios que tiene llevar un adecuado régimen de vacunación y desparasitación BIBLIOGRAFÍA 1. 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AS: Análisis sanguíneo UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLIVAR FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA N° GATOS Variable 1 PV Variable 2 E Variable 3 S Variable 4 R Variable 5 P Variable 6 C/C Variable 7 CP 1 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Macho Mestizo ˃3kg 9/9 Obeso Oscuro 2 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Macho Mestizo 2kg 2/9 Delgado Oscuro 3 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Hembra Ragdoll 2kg 2/9 Delgado Claro 4 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Hembra Romano 3kg 5/9 Normal Claro 5 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Hembra Mestizo 3kg 5/9 Normal Oscuro 6 Mycoplasma haemofelis 2-3 años Hembra Mestizo 2kg 2/9 Delgado Oscuro Variable 8 AS N° GATOS Htc % Hb g/dL Eritrocitos millones/mm³ VCM fL HCM pg/cél CHCM g/dL Reticulocitos % Morfología Eritrocito Significado Clínico 1 39.6 11.3 7’110.000 55.7 15.9 28.5 0.50 Cuerpos de Heinz Positivo 2 21.0 6.7 4’970.000 42.2 13.4 32.8 1.3 Anisocitosis, Cuerpos de Heinz Positivo 3 10.0 3.2 3’020.000 33.1 10.5 32.0 3.0 Anisocitosis, Poiquilocitos, Hipocromía Positivo 4 21.0 6.7 4’970.000 42.2 13.4 32.8 1.3 Anisocitosis, Cuerpos de Heinz Positivo 5 30.0 9.9 6’210.000 48.3 15.4 33.0 1.0 Cuerpos de Heinz Positivo 6 40.8 13.7 7’160.000 56.9 19.1 33.5 1.0 Cuerpos de Heinz Positivo Htc: Hematócrito Hb: Hemoglobina VCM: Volumen corpuscular medio HCM: Hemoglobina corpuscular medio CHCM: Concentración de hemoglobina corpuscular media Variable 8 AS N° GATOS Leucocitos mm3 Neutrófilos % Linfocitos % Monocitos % Eusinófilos % Basofilos % Morfología Significado Clínico 1 5.600 18.0 75.0 6.0 1.0 0.0 Normal Neutropenia, linfocitosis, monocitosis 2 10.450 15.0 80.0 5.0 0.0 0.0 Normal Neutropenia, linfocitosis, monocitosis 3 20.450 87.0 11.0 2.0 0.0 0.0 Normal Leucocitosis, neutrofilia, linfopenia 4 10.450 15.0 80.0 5.0 0.0 0.0 Normal Neutropenia, linfocitosis, monocitosis 5 1.750 58.0 38.0 3.0 1.0 0.0 Normal Leucocitopenia 6 5.450 24.0 74.0 2.0 0.0 0.0 Normal Leucocitopenia, Neutropenia, linfocitosis VALORES DE ERITROCITOS VALOR VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO VALORES DE HEMOGLOBINA VALORES DE HEMATOCRITOS VALORES DE RETICULOCITOS VALOR HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO VALOR CONCENTRACION HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova VALORES LINFOCITOS VALOR NEUTROFILOS EN BANDA VALORES NEUTRÓFILOS VALORES LEUCOCITOS VALORES BASÓFILOS VALOR EOSINOFILOS VALOR MONOCITOS Fuente: Investigación de campo 2020 Elaborado por: Vanessa Reyes Casanova 60 ANEXO 3. Historia clínica Ficha N°1 Ficha N°2 Ficha N°3 Ficha N°4 Ficha N°5 Ficha N°6 ANEXO 4. Resultado de laboratorio Ficha N°1 Ficha N°2 Ficha N°3 Ficha N°4 Ficha N°5 Ficha N°6 ANEXO 5. Fotos virtual realizadas durante el proceso de investigación KIT MOLECULAR PCRUNTM FELINMycoplMycoplasma Egda. Vanessa Monserrath Reyes Casanova Med. Alejandra Elizabeth Barrionuevo Mayorga. Mg DIRECTORA Dr. Washington Rolando Carrasco Mancero. MSc ÁREA DE REDACCIÓN TÉCNICA Dr. Luis Xavier Salas Mujica. MSc ÁREA DE BIOMETRÍA Dr. Franco Bolívar Cordero Salazar. MSc CORDINADOR CARRERA Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] NEGATIVO POSITIVO 80 20 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] 2-3 AÑOS 100 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] HEMBRA MACHO 66.7 33 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] MESTIZO RAGDOLL ROMANO 66 17 17 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] 2 Kg 3 Kg ˃ 3 kg 50 33 17 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] 9/9 OBESO 5/9 NORMAL 2/9 DELGADO 50 33 17 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] [VALOR] CLARO OBSCURO 66.7 33 Porcentaje % Serie 1 [VALOR] [VALOR] 100 HEMOGRAMA FROTIS SANGUINEO KITS DE PCRumTM 100 100 100 Porcentaje % Hematocrito Valor Referencial 27 27 27 27 27 27 Hematocrito 21 39.6 30 10 21 40.799999999999997 Hemoglobina Valor Referencial 8 8 8 8 8 8 Hemoglobina 6.7 11.3 9.9 3.2 6.7 13.7 Eritrocitos Valor Referencial 5 5 5 5 5 5 Eritrocitos 4.97 7.11 6.21 3.02 4.97 7.16 VCM Valor Referencial 39 39 39 39 39 39 VCM 42.2 55.7 48.3 33.1 42.2 56.9 MCH Valor Referencial 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 MCH 13.4 15.9 15.4 10.5 13.4 19.100000000000001 CGMH Valor Referencial 30 30 30 30 30 30 CGMH 32.799999999999997 28.5 33 32 32.799999999999997 33.5 Reticulocitos Valor Referencial 1 1 1 1 1 1 Reticulocitos 1.3 0.5 1 3 1.3 1 Leucocitos Valor Referencial 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 Leucocitos 10.45 5.6 1.75 20.45 10.45 5.45 Neutrofilos Valor Referencial 35 35 35 35 35 35 Neutrofilos 15 18 58 87 15 24 Linfocitos Valor Referencial 20 20 20 20 20 20 Linfocitos 80 75 38 11 80 74 N.Banda Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 N. Banda 0 0 0 0 0 0 Monocitos Valor Referencial 4 4 4 4 4 4 Monocitos 5 6 3 2 5 2 Eosinófilos Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 Eosinofilos 0 1 1 0 0 0 Basófilos Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 Basofilos 0 0 0 0 0 0 Hematocrito Valor Referencial 27 27 27 27 27 27 Hematocrito 21 39.6 30 10 21 40.799999999999997 Hemoglobina Valor Referencial 8 8 8 8 8 8 Hemoglobina 6.7 11.3 9.9 3.2 6.7 13.7 VCM Valor Referencial 39 39 39 39 39 39 VCM 42.2 55.7 48.3 33.1 42.2 56.9 Eritrocitos Valor Referencial 5 5 5 5 5 5 Eritrocitos 4.97 7.11 6.21 3.02 4.97 7.16 CGMH Valor Referencial 30 30 30 30 30 30 CGMH 32.799999999999997 28.5 33 32 32.799999999999997 33.5 MCH Valor Referencial 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 12.5 MCH 13.4 15.9 15.4 10.5 13.4 19.100000000000001 Reticulocitos Valor Referencial 1 1 1 1 1 1 Reticulocitos 1.3 0.5 1 3 1.3 1 Neutrofilos Valor Referencial 35 35 35 35 35 35 Neutrofilos 15 18 58 87 15 24 Leucocitos Valor Referencial 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 Leucocitos 10.45 5.6 1.75 20.45 10.45 5.45 N.Banda Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 N. Banda 0 0 0 0 0 0 Linfocitos Valor Referencial 20 20 20 20 20 20 Linfocitos 80 75 38 11 80 74 Monocitos Valor Referencial 4 4 4 4 4 4 Monocitos 5 6 3 2 5 2 Eosinófilos Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 Eosinofilos 0 1 1 0 0 0 Basófilos Valor Referencial 0 0 0 0 0 0 Basofilos 0 0 0 0 0 0 image2.jpeg image3.jpeg image4.jpeg image5.png image6.emf image7.jpeg image8.jpeg image9.jpeg image10.jpeg image11.jpeg image12.jpeg image13.jpeg image14.jpeg image15.jpeg image1.png image16.jpeg image17.jpeg image18.jpeg image19.png image20.png